Сазан на пару: Сазан на пару рецепт 👌 с фото пошаговый

Делаю речную рыбу на новогодний стол. Сазан на пару с интересным соусом | Шеф-повар Василий Емельяненко

В недавнем опросе о том, что вы хотите увидеть на новогоднем столе, очень многие проголосовали за рыбу. И у меня возникла идея приготовить сазан (можно сделать из карпа) на пару.

Рыба – вообще универсальный продукт, который богат полезными витаминами и микроэлементами. Блюда из рыбы вкусны и питательны, очень полезны и легко усваиваются любым организмом. А так как не все едят мясо на праздники, то рецепт сазана на пару, который я вам покажу, будет идеальным вариантом. У сазана сочное и очень нежное мясо, слегка сладковатое на вкус. А с соусом, который мы приготовим к нему, блюдо будет по-настоящему праздничным.

Ингредиенты:

  • Сазан – половина
  • Томат – половина
  • Лимон – четверть
  • Имбирь – небольшой кусочек
  • Чеснок – зубчик
  • Чили перец – половина
  • Стебли укропа или петрушки
  • Зеленый лук – несколько перышек
  • Лавровый лист – 2 шт
  • Кунжут – 1 ч. ложка
  • Соус наршараб – чуть меньше чайной ложки
  • Соевый соус – 3 ст.ложки
  • Растительное масло
  • Кинза – пучок
  • Смесь перцев
  • Соль

Приготовление:

Сазана моем и очищаем от чешуи. Небольшим тонким ножиком делаем надрез от хвоста вдоль спины. Подрезаем по позвоночнику, огибая ребра. Доходим до нижнего плавника и обрезаем филешку. Цель – оставить минимум мяса на хребтине и ребрах, чтобы получилось чистое филе.

Небольшой сотейник с водой отправляем на огонь. Добавляем лавровый лист.

Для блюда нам понадобится одна филешка. Проверяем её. Если есть чешуя, то убираем оставшиеся чешуйки. Отрезаем плавник и убираем пинцетом кости. Нарезаем филе крупными кусочками. Далее каждый кусочек надрезаем пополам вдоль до кожи (кожу не прорезаем).

В бамбуковую пароварку (можно заменить металлическим ситом для муки) на дно выкладываем пергаментную бумагу, а на неё – кусочки филе. Чтобы рыбка не пахла болотом, добавляем тонко нарезанные колечки имбиря. Имбирь будет нагреваться и отдавать рыбе прекрасный аромат. Стебли петрушки или укропа нарезаем крупными трубочками, слегка придавливаем их руками и отправляем на рыбу.

Пароварку ставим сверху на сотейник и накрываем крышечкой. Оставляем рыбку пропариваться в течение десяти минут.

сазан

сазан

В это время сделаем соус для рыбы.

В миску добавляем нарезанный тонкой соломкой корень имбиря (примерно чайная ложка), половину нарезанного колечками чили перца, раздавленный тыльной стороной ножа зубчик чеснока, мелко порубленный пучок кинзы и нарезанную мелким кубиком половинку томата. Выдавливаем сок четверти лимона, наливаем растительное масло, три столовые ложки соевого соуса и чуть меньше чайной ложки соуса наршараб. Перчим и добавляем примерно чайную ложку обжаренного кунжута. Перемешиваем.

В тарелку выкладываем пропаренную рыбку и заливаем соусом. Посыпаем мелко порубленным зеленым луком.

Великолепная яркая гамма вкусов вам обеспечена. Обязательно попробуйте!!!

Рыба на пару в мультиварке: 3 простых рецепта | Рыбалка

Мультиварка – это лучший из двух девайсов, способных сохранить вкус и пищевую ценность продукта. К тому же блюда, приготовленные в мультиварке, являются диетическими, что немаловажно и для тех, кто стремится к снижению своего веса и тех, кто является приверженцем правильного питания. Готовка с помощью мультиварки – это также и экономия времени. Мультиварочная кастрюля, как правило, имеет режим «варка на пару». Достаточно выбрать эту программу – и половина дела сделано (извините за тавтологию)!

Классический алгоритм приготовления состоит из нескольких шагов: в контейнер-пароварку, который входит в набор мультиварочной машины, укладываются продукты. Какая последовательность заполнения контейнера – дело каждого, но в чашу не забудьте налить два или три стакана воды.

Продукты, которые помещаются в пароварочную чашу, необходимо посолить, добавить специи, если нужно…. Одним словом, нужно загрузить все ингредиенты, закрыть мультиварку, и остальное сделает ваша чудо-кастрюля.

Предлагаем вам, дорогие гости нашего сайта три рецепта рыбы на пару в мультиварке:

1. Лосось с картофелем,

2. Толстолобик с овощами в сметанном соусе,

3. Сазан на пару в мультиварке, приготовленный в фольге.

Рецепт № 1

Рыба на пару в мультиварке с картофелем, а в качестве основного ингредиента мы выбрали лосось. Перед тем, как загружать его в чудо-кастрюлю, рыбу почистим, выпотрошим, отрежем плавники, хвост, голову.

Используемые продукты для лосося с картофелем на пару в мультиварке:

  • Стейки лосося – 500 г.
  • Картофель – 300 г.
  • Масло (растительное, лучше оливковое или сливочное) – на ваш вкус.
  • Соль, перец, приправа для рыбы – на ваше усмотрение.
  • Несколько ломтиков лимона без кожуры (она придаёт горечь блюду).

Способ приготовления:

  • Подготовленный лосось мы разрезаем на порционные кусочки.
  • Высушиваем рыбу бумажными полотенцами, натираем куски приправой для рыбы, перцем и солью (если в состав приправы не входит соль).
  • Картошку чистим и разрезаем вдоль на шесть или восемь долек (быстрее приготовится). Слегка присаливаем и укладываем три или четыре ломтика лимона, разрезанных пополам.
  • Рыбу и картошку перемешиваем и выкладываем в контейнер-пароварку. Можно уложить продукты слоями, не перемешивая, на ваше усмотрение.
  • Выставляем режим варки на пару на 30 минут.
  • Перед подачей на стол посыпьте блюдо мелко резанным укропом и растопленным сливочным маслом, или оливковым.

Лосось на пару в мультиварке готов, приятного аппетита!

 

Рецепт № 2

Рыба на пару в мультиварке – это толстолобик с овощами

Алгоритм приготовления не отличается от первого рецепта. Вместо лосося мы готовим стейки толстолобика, но к картошке мы добавим тыкву.

Какие продукты:

  • Стейки толстолобика (уже готовые) – 400 г (два кусочка).
  • Очищенная тыква, мякоть – 120 г.
  • Лук – 100 г.
  • Картофель – три клубня среднего размера.
  • Сметана низкокалорийная – 200 г.
  • Пряности (на ваш вкус: органа, кориандр и др.) – по одной чайной ложке.
  • Соус «Сан-Сэй» — 25 г.

Как готовить:

  • Подготовленные стейки толстолобика нужно присолить (в состав соевого соуса входит соль, поэтому досаливать будем на последнем этапе приготовления блюда).
  • Далее готовим соус: очищенный лук нарезаем полукольцами, выкладываем в посуду для приготовления соуса и посыпаем молотой приправой. Сюда же добавляем сметану, немного соли, соевый соус, перемешиваем и пробуем. Если соли недостаточно, досаливаем. Готовый соус можно приправить двумя столовыми ложками свежевыжатого сока лимона.
  • Тыкву очищаем и нарезаем средними брусочками; если брусочки будут слишком маленькими и тонкими, тогда тыква будет похожа на размазню.
  • Берем чашу для варки на пару и аккуратно выкладываем в её центр рыбу. Пустоты заполняем тыквенными брусочками, распределяя их по бокам ёмкости.
  • Очищенный картофель нарезаем ломтиками и выкладываем сверху рыбы.
  • Подготовленное блюдо сверху надо залить сметанным соусом, стараясь распределить его равномерно по всей чаше.
  • Выставляем режим варки на пару на полчаса.

Подавать можно и с зеленью, и с маринованными или консервированными огурцами и томатами.

Рецепт № 3

Рыба сазан на пару в мультиварке с использованием фольги

Этот рецепт совсем прост: подготавливаем рыбу, нарезаем на порционные кусочки, солим, перчим. Заворачиваем в фольгу каждый кусок и укладываем мультиварку. Выставляем режим приготовления на пару.

Продукты:

  • Сазан – около одного килограмма или чуть-чуть меньше.
  • Лимон – половинка.
  • Специи – на ваш вкус.

Способ готовки:

  • Рыбу очищаем от чешуи, освобождаем от плавников, хвоста, отрезаем голову. Вспарываем брюхо и вытаскиваем внутренности. Тщательно моем и нарезаем на порционные кусочки. Можно наоборот: сначала порезать, а затем помыть. Солим и перчим по вкусу и даём рыбе немного промариноваться.
  • Тем временем подготавливаем и нарезаем фольгу, чтобы листочки были в два раза больше рыбы. Можно изнутри фольгу слегка смазать растительным маслом, чтобы рыба не пристала.
  • Берём по отдельности каждый кусочек сазана, укладываем его ровно посередине фольги, а сверху – половину ломтика лимона. Аккуратно заворачиваем каждый кусочек в фольгу. Нужно постараться завернуть в виде «конфетки», тогда сок во время приготовления не будет вытекать наружу.
  • Каждую «конфетку» укладываем в контейнер-пароварку, закрываем чудо-машину крышкой и выставляем режим варки на пару минут на двадцать. Если кусочки рыбы покрупнее, тогда время приготовления можно увеличить на пять минут.

Сазан в фольге на пару в мультиварке готов. Пора к столу!

тушенный, жеренный и диетический в фольге

Приобретайте качественные товары по доступным ценам в лучших рыболовных интернет магазинах. Делайте подарки себе и своим близким!

Мы в социальных сетях – подписывайтесь на нас в Facebook, Youtube, Вконтакте и Instagram. Будьте в курсе последних новостей сайта.

Если ваши познания в кулинарии ограничиваются бутербродами и яичницей, если времени возиться на кухне с уловом категорически не хватает, если вам хочется приготовить не только вкусное, но и полезное рыбное блюдо, обязательно воспользуйтесь таким достижением современных технологий, как мультиварка! Попробуем приготовить в ней сазана.

Содержание:

Тушенный сазан в мультиварке

Нужно сказать, что режимы мультиварки позволяют творить настоящие чудеса на кухне. Сазан в мультиварке получается жаренным, тушеным, приготовленным на пару, а в некоторых моделях — даже запеченный на гриле. Все зависит от желания повара и возможностей агрегата!

Самый простой, но очень вкусный способ, как приготовить сазана в мультиварке  – тушение. Его достоинство не только в простоте, но и в том, что рыба готовится без капли масла, и получается диетической, хотя на вкусовых качествах готового блюда это ну никак не сказывается. Ингредиенты для тушеного сазана понадобятся следующие:

  • сазан — 1 килограмм филе или тушка без головы и хвоста,
  • лимон — 2-3 дольки,
  • имбирь — 1-2 ломтика свежего или ½ чайной ложки сухого,
  • соль и черный перец.

Филе или потрошенную и очищенную тушку нужно нарезать на небольшие куски, которые можно будет уложить в чашу мультиварки. Если вы предварительно замораживали рыбу, обязательно дайте ей полностью разморозиться! Некрупного сазана можно посолить уже непосредственно перед запуском мультиварки, а вот рыбу, весом более 2 килограммов лучше посыпать солью хотя бы за полчаса до приготовления.

Когда наш сазан уже в мультиварке, посыпаем его перцем, сверху выкладываем кружки лимона и ломтики имбиря. Поверх вливаем примерно 1/3 стакана воды и запускаем режим «тушение» примерно на полчаса. Всего через 30 минут вы сможете смело раскладывать тушеного сазана по тарелкам и угощать гостей! Хорошим гарниром к нему станут тушеные овощи, отварной рис или гречка.

Диетический рецепт сазана в фольге

Если у вас есть дети, домочадцы, сидящие на диете или знакомые девушки, следящие за фигурой, угостите их паровым филе сазана в фольге! Впрочем, этот способ, как приготовить сазана в мультиварке, оценят даже те, кто любит рыбу исключительно жареную или на гриле — уж очень вкусный получается результат! Возьмем:

  • филе сазана — примерно 800 граммов,
  • половина лимона,
  • черный перец и соль — по вкусу.

Сазана филируем — чистим от чешуи, удаляем голову, хвост и плавники, потрошим и аккуратно срезаем острым ножом мясо с хребта. Нарезаем филе на ровные куски прямоугольной формы, посыпаем каждый солью и перцем. Поверх каждого кусочка сазана укладываем дольку лимона и заворачиваем в фольгу. Укладываем получившиеся конвертики в контейнер для готовки на пару швом вниз. В мультиварку вливаем примерно 1 литр воды (4 стакана), устанавливаем контейнер и включаем режим «варка на пару» на 25-30 минут. Готового сазана извлекаем, даем немного остыть. Пока рыба остывает, можно заглянуть на сайт “Рыбалка всем”, а потом уже наслаждаться вкусным и очень полезным паровым сазаном с лимоном!

Жаренный сазан в мультиварке

Пожалуй, самый простой рецепт сазана в мультиварке — это жарка рыбы. Для нее нужны все те же ингредиенты, что и для обычной поджарки на сковороде: собственно, сазан, мука для панировки, соль и перец в качестве специй, растительное масло для жарки. Самое большое преимущество мультиварки в этом блюде: вам не приходится следить за рыбой, чтобы она не пригорела и уворачиваться от капель раскаленного масла.

Очищенного и потрошенного сазана режем на кусочки-порции, промываем и подсушиваем бумажными полотенцами. Муку смешиваем с солью и перцем. В этой смеси обваливаем каждый кусок сазана. В мультиварку наливаем масло, закладываем рыбу и выбираем режим «жарка» – умная машина справится с поджаркой рыбы буквально за считанные минуты.

А если вы хотите узнать больше рецептов из сазана и его родича — карпа, заходите на “Кухню рыбака”! Здесь вы найдете карпа под овощной подушкой, рецепт шашлыка из сазана и запеченного сазана в духовке.

Хорошие рыболовные интернет магазины позволят вам приобрести любые товары для рыбалки по выгодным ценам!

Подписывайтесь на нас в социальных сетях – через них мы публикуем много интересной информации, фото и видео.

Популярные разделы сайта:

Календарь рыбака позволит вам понять, как клюют все рыбы в зависимости от времени года и месяца.

Страница рыболовные снасти расскажет о многих популярных снастях и приспособлениях для ужения рыбы.

Насадки для рыбалки – подробно описываем живые, растительные, искусственные и необычные.

В статье прикормки вы познакомитесь с основными видами, а также с тактиками их использования.

Изучите все приманки для рыбалки, что бы стать настоящим рыболовом и научиться правильному выбору.

как приготовить на пару с овощами, в сметане, с копчёной грудинкой, рецепты приготовления, фото


Добавить в избранное



Одним из самых вкусных и полезных речных обитателей считается сазан. Его мясо низкокалорийное, обладает нежным приятным вкусом, практически лишено костей, что даёт возможность применять продукт в диетическом и детском рационе. Сазан — универсальная рыба, которая хороша в запечённом, отварном, тушёном или жареном виде. Как вкусно приготовить описываемый ингредиент, и с чем его лучше сочетать — узнайте из статьи.

ПоказатьСкрыть

Выбор и подготовка ингредиентов

Залогом вкусного, полезного и безопасного блюда, безусловно, являются качественные, свежие продукты.

Важно! Как и любой другой речной рыбе, сазану присущ запах тины. Чтобы от него избавиться, рекомендуется вымочить тушку в молоке на протяжении 1 часа, затем обвалять в соли или замочить рыбу на 2 часа в лимонном растворе.

При выборе главного ингредиента — сазана, следует обратить внимание на следующие аспекты:

  • специалисты советуют отдавать предпочтение охлаждённой рыбе, масса которой не превышает 1,5 кг;
  • глаза у сазана должны быть блестящими, прозрачными, без мутного оттенка;
  • жабры — без излишней слизи, у свежей рыбы они красно-розового окраса;
  • тушка должна хорошо «пружинить», при нажатии на неё не должно оставаться вмятин;
  • сазан должен издавать приятный рыбный аромат, без признаков затхлости или аммиака.

Также при приготовлении понадобится сметана. Лучше воспользоваться продуктом с высоким процентом жирности, поскольку низкокалорийный при воздействии высоких температур свернётся или расслоится. Идеальным вариантом станет домашняя сметана.

Рецепты сазана в мультиварке

Рецепты приготовления сазана многогранны и разнообразны. Его варят, готовят на пару, запекают в духовке, тушат в мультиварке и т. п. В любом варианте мясо получается очень нежным, сочным и чрезвычайно вкусным. Особой популярностью у хозяек пользуется рецепт рыбы в сметане и тушёной с овощами. Более подробное приготовление блюд — узнайте далее из статьи.

В сметане

6–860 мин.

Шаги

6 ингредиентов

  • луковица (больших размеров)

    1 шт.

  • вода горячая

    100 мл

  • растительное масло

    150 мл

Пищевая ценность на 100 г:

Калории

75,7 ккал

  1. Рыбу тщательно очистить, освободить от внутренностей, промыть несколько раз под струёй холодной воды.
  2. Порезать тушку на произвольные ломти.
  3. Рыбные куски посолить, обвалять в муке с двух сторон.
  4. На растительном масле жарить рыбу до золотистой корочки (около 15–20 минут).
  5. Лук очистить, измельчить в виде кубиков.
  6. Луковое сырьё добавить к рыбному.
  7. Рыбно-луковую смесь довести «до вкуса» посредством соли, перца и сушёного чеснока.
  8. В чашу мультиварки заложить: рыбно-луковое сырьё, сметану, горячую воду.
  9. Включить режим тушения.
  10. После приготовления, рыбу украсить зеленью.

Знаете ли вы? С наступлением холодов сазаны опускаются в донные ямы, зарываются в ил и там впадают в спячку до наступления весны. В это период рыба ничем не питается.

С овощами

6–8 60 мин.

Шаги

7 ингредиентов

  • морковь (среднего размера)

    1 шт.

  • лук-репка

    1 головка

  • сыр твёрдый

    75 г

  • сливки

    250–300 мл

  • растительное масло

    2-3 ст. л. для жарки

  • соль и перец

    по вкусу

Пищевая ценность на 100 г:

Калории

102,2 ккал

  1. Тушку тщательно очистить, промыть, нарезать порционными кусками.
  2. К рыбе добавить специи.
  3. Овощи очистить. Морковь — натереть на тёрке, лук — измельчить на квадратные ломтики.
  4. Включить мультиварку, выставить режим «Выпечка», залить в чашу растительное масло и обжарить на нём сначала луковое, затем морковное сырьё до полуготовности.
  5. На овощную подушку выложить рыбные заготовки. Залить сливками, присыпать натёртым на тёрке твёрдым сыром.
  6. В этом же режиме тушить блюдо около 30–40 минут.

Знаете ли вы? Сазан считается самой «жизнелюбивой» рыбой. По утверждению опытных рыбаков, он будет из последних сил неистово биться за спасение своей жизни и делать всё возможное, чтобы уйти с крючка.

Тушёный с копчёной грудинкой

6–8 60 мин.

Шаги

6 ингредиентов

  • грудинка копчёная

    150–200 г

  • луковица (средних размеров)

    2 шт.

  • молоко свежее

    2 стакана

  • соль, перец

    по вкусу

Пищевая ценность на 100 г:

Калории

109,0 ккал

  1. Сазана освободить от чешуи и внутренностей, тщательно промыть, разделать на куски (толщина — по желанию). Посолить и поперчить.
  2. Луковицы нарезать в виде кубиков.
  3. Мультиварку привести в режим «Выпечка», в чашу залить масло, заложить луковое сырьё, рыбные куски. Жарить на протяжении 30 минут.
  4. Сделать соус: соединить муку с молоком. Смесь залить в чашу.
  5. Переключить аппарат в режим «Тушение» и готовить рыбу ещё 40 минут.

Важно! Чтобы получить более пикантный вкус блюда, перед закладкой сазана в чашу мультиварки его рекомендуется обвалять в мелко измельчённом зелёном луке.

Сазан — речной представитель семейства Карповые, который обладает плотным, сочным мясом, практически не имеющим костей. Чтобы по максимуму сохранить нежную консистенцию филе, его неповторимый вкус и аромат, опытные кулинары советуют готовить рыбу посредством её тушения. Приготовленный таким образом сазан будет отлично смотреться на праздничном столе в качестве отдельного блюда, или с дополнением — гарниром из риса или отварного картофеля.

Сазан в мультиварке

Приготовить сазана в мультиварке не составит никакого труда. Мясо сазана очень нежное, сочное, а его вкус – насыщенный. Мультиварка позволит сохранить все его вкусовые качества. Также, это блюдо подходит для приготовления в пост и тем, кто придерживается диетического питания. Сазан в мультиварке готовится быстро и без особых хлопот! Пробуйте и наслаждайтесь!

Рецепт №1. Сазан с томатами в мультиварке

Ингредиенты:

  • Сазан (филе) – порционные кусочки
  • Помидоры черри – 13 шт.
  • Болгарский перец – 1-2 шт.
  • Лук репчатый – 1-2 шт.
  • Масло растительное – 1 ст.л.
  • Соль, перец – по вкусу (перец лучше использовать свежесмолотый)
  • Цедра лимона, натертая на мелкой терке – 1 ч.л.
  • Вино полусладкое – 2 ст.л.

Приготовление:

  1. Рыбу промыть, посолить. Дать настояться.
  2. Лук, перец мелко покрошить.
  3. В чашу мультиварки, смазанную маслом сложить цедру, лук, перец. Посолить, поперчить, добавить 1 ст.л. вина. Обжарить на режиме «Выпечка» 5-10 минут с открытой крышкой.
  4. Выложить сазана на овощи. Сверху положить помидоры целиком. Еще раз поперчить, вылить оставшееся вино и поставить на режим «Тушение» на 25-30 минут.

Вот и все! Ваш сазан готов! На гарнир можно сделать пюре, рис или отварные овощи. Подаем к столу горячим. Приятного аппетита!!!

Совет: используйте только свежего сазана, т.к. его заморозка приводит к ухудшению его вкусовых качеств. Будьте осторожны, когда чистите рыбу – не повредите желчный пузырь. Если это произойдет, то вкус рыбы будет испорчен.

Рецепт №2. Фаршированный сазан в мультиварке

Ингредиенты:

  • Сазан – 1 небольшая рыбка.
  • Морковь – 2 шт.
  • Лук – 1 шт.
  • Майонез, мед – для обмазывания.
  • Приправа для рыбы, соль – по вкусу.
  • Растительное масло.

Приготовление:

  1. Рыбу почистить, удалить внутренности, промыть, обсушить салфетками. Сделать несколько поперечных надрезов.
  2. Морковь натереть, лук мелко порезать.
  3. Смазать всю рыбу медом и майонезом. Натереть приправой по вкусу.
  4. Начинить сазана подготовленными овощами и дать постоять минут 20-30 для маринования.
  5. Чашу мультиварки смазываем растительным маслом. Выкладываем рыбу и готовим на «Выпечке» 45 – 50 минут.

А теперь ждем звукового сигнала! За это время можно отварить картофель или рис на гарнир. Ваш сазан в мультиварке готов! Получается безумно вкусно! Приятного аппетита!!!

Похожие блюда:

Узнаем как правильно приготовить сазана: будничные и праздничные блюда

Пресноводная рыба сазан водится в наших реках и озерах. Но ее не так часто можно увидеть на прилавках магазинов. Поэтому многие хозяйки не знают, как правильно приготовить сазана. А ведь он – близкий родственник карпа. Такой же крупный, у него похожее сочное и плотное мясо, но не так много костей. Единственная разница – сазана так и не удалось заставить размножаться в прудах и рыбхозах. Карп оказался более «одомашненным». Поэтому, если нежданно вы разжились сазаном, не переживайте. Все кулинарные рецепты, в которых фигурирует карп, подходят и для этой «дикой» рыбы.

Но здесь все же мы дадим несколько рецептов того, как приготовить сазана. Эта рыба хороша для любой кулинарной обработки. Вы можете ее приготовить за пару минут, просто пожарив в мучной панировке. Можно сделать фаршированного заливного сазана в качестве главного украшения праздничного стола. Также можно перемолоть его мясо на фарш и пожарить очень вкусные рыбные котлеты или биточки. Но сначала тушку необходимо почистить от чешуи, удалить внутренности и жабры. Желательно также замариновать его на четверть часа в смеси лимонного сока и растительного масла с солью. После этого обваляйте в муке кусочки рыбы, и смело выкладывайте их в разогретое подсолнечное масло.

Теперь, когда мы научились тому, как приготовить сазана на сковороде самым быстрым способом, усложним задачу. Рыбу чистим, разрезаем на куски, припускаем. Порезанную луковицу пассируем в сливочном масле, заливаем тремя ложками белого сухого вина, кипятим пять минут. Три помидора ошпариваем кипятком, снимаем с них кожу, разрезаем на кусочки и кладем на сковороду вместе с несколькими нашинкованными ломтиками шампиньонами. Кипятим соус 3-5 минут, после чего заливаем им рыбу.

Еще один способ того, как приготовить сазана под соусом – потушить его. Наливаем на сковороду растительное масло так, чтобы оно полностью покрыло дно, нагреваем его. Выкладываем слегка замаринованные кусочки рыбы и жарим четверть часа на среднем огне. Выливаем в сковороду 100 г коньяка и поджигаем. Убираем с плиты, дожидаемся, когда алкоголь прогорит. Снова возвращаем сковороду на конфорку, добавляем чуток воды и тушим под крышкой 10 минут. После этого заливаем рыбу 300 г жирной сметаны, посыпаем специями и тушим еще с полчаса на медленном огне.

В вопросе о том, как приготовить сазана, не стоит сбрасывать со счетов и такой способ кулинарной обработки, как запекание в духовке. Рыбу можно уложить на противень «соло», а можно и в хоре с овощами – картофелем, цветной капустой, горошком, луком, брокколи или морковкой. Чтобы уберечь сазана от пересыхания в печи, его можно укутать в алюминиевую фольгу или укрыть “одеялом” из какого-либо соуса. Самый простой из них – смешать 150 г сметаны (или майонеза) с яйцом и четвертью стакана молока.

Как приготовить сазана на праздник? Удаляем голову, кожу и хребет, ставим их вариться вместе с кореньями для супа и специями. Лук и шампиньоны тушим до готовности. Потом пропускаем через мясорубку грибы, вареную мякоть рыбы и вымоченную в молоке булочку. Два яйца разводим бульоном, вымешиваем с фаршем и добавляем ложку манки. Этой смесью начиняем тушку сазана и варим ее в бульоне на медленном огне час. Из ложки желатина, двух стаканов бульона, двух яичных белков и лимона готовим желе. Заливаем им остывшую рыбу.

Сазан отварной с яйцами. Паровая кулинария

Читайте также

Сазан

Сазан

Сазан с картофелем и солеными огурцами
Ингредиенты: 400 граммов сазана, 4 картофелины, 2 соленых огурца, 2 столовые ложки томатной пасты, лимонной сок, мука, 60 граммов подсолнечного масла, укроп, соль.Способ приготовления: рыбу почистить, снять с нее кожу, нарезать на

Сазан по-крестьянски

Сазан по-крестьянски
Ингредиенты:600 г сазана, 50 г репчатого лука, 50 мл 3 %-ного уксуса, 35 мл растительного масла, 40 г сливочного масла, 1 лимон, 1 пучок укропа, перец, соль.Способ приготовления:Рыбу чистят, потрошат, снимают кожу, промывают, разделывают на филе и нарезают

Сазан по-самарски

Сазан по-самарски
сазан (около 1,5–2 кг)2 крупные головки репчатого лука1 клубень картофеля? лимона? грейпфрута50 г зелени укропа30 г кедровых орешковлавровый лист сольДля маринада:500 мл майонезапо ? ч. ложки карри и куркумыКарри и куркуму смешайте с майонезом. Репчатый лук

Карп, сазан

Карп, сазан
Карп – одомашненная форма сазана, основной объект прудового рыбоводства во многих странах, в том числе в России, на Украине, в Белоруссии, а также в Китае. Исходной формой европейского домашнего карпа явился карп дунайский. Домашний карп не требователен в

316. Сазан с овощами

316. Сазан с овощами

продукты
1 кг филе сазана, 2 ст. л. лимонного сока, 2 зубчика чеснока, 2 ст. л. растительного масла, 1 пучок зелени базилика, 4 помидора, 2 сладких перца, 1 небольшой цукини, 200 г картофельного пюре, черный молотый перец, соль
Время приготовления –

Сазан с сыром

Сазан с сыром
Филе сазана – 500 г, лук – 2 шт. , яйцо – 3 шт., мука – 2 ст. л., молоко – 50 мл, сыр твердый – 50 г, перец черный молотый – по вкусу, растительное масло для обжаривания, сольНарежьте лук полукольцами, нагрейте растительное масло в мультиварке в режиме «подогрев»,

Сазан с овощами

Сазан с овощами
Ингредиенты: 1 кг филе сазана, 2 зубчика чеснока, 2 столовые ложки лимонного сока, 2 столовые ложки растительного масла, 1 пучок базилика, 4 помидора, 2 стручка болгарского перца, 1 цукини (небольшой), 200 г картофельного пюре, перец, соль.Способ приготовления:

Салат из витлуфа и черешкового сельдерея с отварной морковью и яйцами

Салат из витлуфа и черешкового сельдерея с отварной морковью и яйцами
Яйца отварить вкрутую, очистить и измельчить. Черешковый сельдерей промыть и нарезать кусочками кочанчики витлуфа разобрать на пластины, промыть и нарезать поперек тонкими ломтиками. Все соединить,

Линь отварной с маслом и яйцами

Линь отварной с маслом и яйцами
Время приготовления: 25 минКоличество порций: 3 — 4Ингредиенты: 800 г линя, 40 г сливочного масла, 3 сваренных яйца, 1 ложка мелко нарубленной зелени петрушки, 1 лимон, уксус.Для отвара: 200 г овощей (без капусты), 30 г репчатого лука, 1–2 лавровых

Сазан в пиве

Сазан в пиве
Время приготовления: 20 минКоличество порций: 2Ингредиенты: 0,5 кг сазана, 20 г жира, 10 г муки, 10 г лука, 40 г пива, 3 бутона гвоздики, соль по вкусу.ПриготовлениеРазделать рыбу на филе, удалить кости, нарезать порциями и припустить до готовности. Из муки и

Карп отварной с крутыми яйцами

Карп отварной с крутыми яйцами
Подготовить карпа, выпотрошить. Не отрезая головы, удалить жабры и глаза. Тщательно промыть, посолить, поставить на холод на 30 минут. Приготовить пряный отвар, процедить его в кастрюлю. Довести отвар до кипения, положить рыбу в один слой,

Карп отварной с маслом и яйцами

Карп отварной с маслом и яйцами
Приготовить отвар из очищенных овощей и приправ, процедить, посолить. Рыбу разделать, удалить жабры, тщательно промыть, опустить в горячий отвар так, чтобы он слегка покрывал рыбу. Варить на пару на очень слабом огне в закрытой тщательно

Рис отварной «по-польски» с яйцами и маслом

Рис отварной «по-польски» с яйцами и маслом

1/2 фунта (205 г) риса, 3 ст. ложки масла, укроп, петрушка, 4 яйца.
Отварить 1/2 фунта (205 г) риса (с солью) рассыпчато, положить горкой на блюдо. Залить тремя столовыми ложками горячего масла, перемешать, посыпать четырьмя крутыми

Сазан

Сазан
Сазан по-русски300 г. сазана, специи, соль, сельдерей, зелень петрушки, репчатый лук, 200 г. гарнира, 100 г. соуса.Порционные куски рыбы с кожей и реберными костями положить в посуду, с наклоном один на другой. Налить бульон или воду, чтобы рыба была залита на треть, добавить

Сазан

Сазан
Если спросить нынешнее поколение советских людей, которым было обещано, что они будут жить при коммунизме, то о сазане они знают столько же, сколько и о коммунизме. Одно — рыба, другое — строй. И все. Если спросить, какая это рыба, большинство вынуждено будет сказать

Взаимосвязь между распространением обыкновенного карпа и его экологической ДНК в малом озере

Abstract

Хотя экологическая ДНК (eDNA) использовалась для определения присутствия редких водных видов, многие аспекты этого метода остаются нерешенными. В частности, связь между эДНК и распределением рыб неизвестна. Мы исследовали взаимосвязь между распределением рыб и их эДНК (скоростью обнаружения и концентрацией) в озере.Количественный анализ ПЦР (qPCR) для области в пределах гена цитохрома b обыкновенного карпа ( Cyprinus carpio или «карп»), повсеместно распространенной инвазивной рыбы, был разработан и использован для измерения эДНК в озере Старинг (MN, США), в котором как за плотностью карпа, так и за его распространением пристально следят уже несколько лет. Пробы поверхностных и подземных вод, а также отложений были отобраны в 22 местах озера, включая участки, часто используемые карпом. В воде районы с высоким использованием карпа имели более высокую скорость обнаружения и концентрацию эДНК, но использование рыбы не влияло на эДНК отложений.Частота обнаружения и концентрация эДНК в поверхностных и подповерхностных водах существенно не различались (p≥0,5), что указывает на отсутствие накопления эДНК в поверхностных водах. Скорость обнаружения соответствовала тенденции: вода с интенсивным использованием> вода с низким потреблением> осадок. Концентрация эДНК в образцах донных отложений, которые превышали предел обнаружения, была на несколько порядков выше, чем в воде в расчете на массу, но низкий предел обнаружения приводил к низким показателям обнаружения. Неравномерное распределение эДНК в воде изучаемого нами озера предполагает, что механизмы удаления эДНК из водной толщи, такие как распад и осаждение, действуют быстро.В совокупности эти результаты показывают, что эффективные методы отбора образцов эДНК должны основываться на распределении рыбы, поскольку было показано, что концентрация эДНК резко различается между образцами, взятыми на расстоянии менее 100 м друг от друга.

Образец цитирования: Эйхмиллер Дж. Дж., Байер П. Г., Соренсен П. В. (2014) Взаимосвязь между распространением обыкновенного карпа и их экологической ДНК в небольшом озере. ПЛОС ОДИН 9(11):
е112611.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0112611

Редактор: Арга Чандрашекар Анил, CSIR – Национальный институт океанографии, Индия

Поступила в редакцию: 27 мая 2014 г. ; Принято: 19 октября 2014 г.; Опубликовано: 10 ноября 2014 г.

Авторские права: © 2014 Eichmiller et al.Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания оригинального автора и источника.

Доступность данных: Авторы подтверждают, что все данные, лежащие в основе выводов, полностью доступны без ограничений. Все соответствующие данные содержатся в документе и файлах со вспомогательной информацией.

Финансирование: Финансирование этого проекта было предоставлено Миннесотским трастовым фондом окружающей среды и природных ресурсов в соответствии с рекомендациями Законодательной и гражданской комиссии по ресурсам Миннесоты (LCCMR).Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Методы количественной оценки численности рыбных популяций, такие как повторная метка и электролов, являются дорогостоящими и трудоемкими. Кроме того, рыбу часто трудно поймать и обнаружить при низкой плотности, а сами методы отлова могут привести к изменению поведения целевых видов [1]–[3].Молекулярные методы обнаружения ДНК, выделяемой водными организмами в окружающую среду, являются неинвазивными, быстрыми и потенциально более чувствительными, чем традиционные методы учета [4]–[6]. Эта экологическая ДНК (eDNA) высвобождается в результате таких процессов, как слущивание клеток, выделение слизи и дефекация [7]. Примечательно, что eDNA в настоящее время используется для мониторинга присутствия инвазивных большеголовых толстолобиков (часто называемых «азиатскими карпами») ( Hypophthalmichthys spp.) в Чикагской системе водных путей и реке Миссисипи [8]. Хотя молекулярные методы, использующие эДНК, изначально разрабатывались как инструмент обнаружения, они развиваются, чтобы отвечать на более сложные вопросы. Например, в нескольких исследованиях установлена ​​взаимосвязь между концентрацией эДНК и биомассой в водной среде обитания [9]–[11]. Подходы секвенирования следующего поколения успешно идентифицировали несколько видов одновременно [11], [12].

Несмотря на огромный потенциал технологии эДНК для революционного изменения программ мониторинга рыб и других водных видов, мало что известно о производстве, судьбе и распространении эДНК в естественной среде.Распределение эДНК имеет особое значение для разработки эффективных методов мониторинга [6]. Удивительно, но Pilliod et al. [9] обнаружили, что время суток, место отбора проб и расстояние от целевого организма (саламандры) не оказывали явного влияния на концентрацию эДНК в небольших ручьях. Напротив, эДНК улиток была более распространена в середине русла реки по сравнению с краями русла [13]. Пробы поверхностных вод широко используются для исследований эДНК [8], [9], [14]. Обоснование этого подхода было подтверждено только в одном исследовании, проведенном в экспериментальных прудах [15].Возможность того, что концентрация эДНК в водоеме может зависеть от распределения рыб, была первоначально высказана Takahara et al. [10]. Зимой в лагуне концентрация эДНК обыкновенного карпа ( Cyprinus carpio , далее «карп») положительно коррелировала с температурой воды и была пространственно неоднородной. Причина такой закономерности и, в частности, была ли она связана с распределением карпа или более высокой метаболической активностью рыбы в более теплых водах, не изучалась, поскольку распределение карпа не измерялось.Из нескольких исследований, посвященных вопросу распределения эДНК в воде, ясно, что оно варьируется в зависимости от типа среды обитания, и необходимы более убедительные объяснения моделей распределения эДНК. Также представляет интерес распределение эДНК в отложениях, поскольку отложения, вероятно, сохраняют эДНК в течение длительных периодов времени [16].

Чтобы определить, влияет ли распространение рыбы на концентрацию эДНК и скорость обнаружения в озерной воде и донных отложениях, мы исследовали распределение эДНК карпа в небольшом мелководном озере и сравнили его с известными моделями распределения карпа, за которыми наблюдали в течение нескольких лет.Нас интересовала как частота обнаружения (процент образцов, в которых уровни эДНК превышали порог обнаружения), так и концентрация, поскольку первая обычно используется для оценки вероятного распределения инвазивных большеголовых толстолобиков, а вторая мера, если ее понять, может добавить больше разрешения и ценности к технике. Во-первых, был разработан и проверен в лаборатории метод количественной ПЦР, специфичный для эДНК C. carpio . Затем, поскольку часто предполагается, что эДНК накапливается в поверхностных водах и отложениях, по всему озеру были взяты поверхностные, подповерхностные и донные пробы.Наконец, концентрация и уровень обнаружения эДНК сравнивались между районами с низким и высоким уровнем использования рыбы, определенными по данным радиотелеметрии. Результаты этого исследования дают представление об оптимальных методах отбора проб эДНК для небольших озер, а также информацию о том, как эДНК распределяется в водных системах по отношению к распределению целевых организмов.

Материалы и методы

Разработка и проверка маркеров количественной ПЦР

Несмотря на то, что до этого исследования были разработаны два анализа C. carpio qPCR [10], [17], скрининг по базе данных NCBI показал потенциальную неспецифическую амплификацию нецелевых видов рыб (таблица S1).Поэтому для текущего исследования был разработан анализ количественной ПЦР. При разработке нового маркера количественной ПЦР, специфичного для карпа, рассматривались четыре гена: (1) митохондриальный ген цитохрома b , (2) митохондриальный ген цитохрома c оксидазной субъединицы 1, (3) митохондриальный ген контроля (D- loop) и (4) ген 1, активирующий рекомбинацию ядерных генов (RAG1). Наборы праймеров-кандидатов идентифицировали с помощью NCBI Primer-BLAST с использованием последовательностей под номером доступа GenBank X61010. 1 [18] для мтДНК и EF458304.1 [19] для гена RAG1. Специфичность была первоначально проверена по последовательностям базы данных BLASTn для 15 видов рыб (таблица S1). Зонды для связывания малых канавок (MGB) были спроектированы вручную с использованием инструмента для тестирования зондов Primer в программном обеспечении Primer Express v3.0.1 (Life Technologies, Гранд-Айленд, Нью-Йорк). Анализы с эффективностью амплификации вне диапазона допустимых значений 90–110% или пределом обнаружения выше 300 копий на реакцию не рассматривались. Мы определили предел обнаружения (LOD) как наименьшее значение, при котором три повторные реакции будут успешно амплифицироваться с числом циклов количественного определения (C q ) менее 40 циклов в пределах линейного диапазона стандартной кривой.

Маркеры-кандидаты были проверены на специфичность для карпа путем тестирования на амплификацию 15 нг ДНК срезов плавников карпа и 34 местных и неместных видов рыб (таблица S1). Образцы зажимов для плавников для тестирования специфичности генетических маркеров извлекали с использованием набора DNeasy Blood and Tissue Kit (Qiagen, Hilden, Germany) и анализировали, как описано ниже.

Затем мы протестировали маркеры с использованием водных образцов. Были установлены три проточных резервуара объемом 340 л, чтобы подтвердить способность маркера обнаруживать эДНК карпа.Перед этим экспериментом все резервуары обрабатывали 10% отбеливателем в течение 30 минут, чтобы удалить все следы ДНК. Скорость потока устанавливали на уровне 600 мл/мин, а температуру поддерживали на уровне 18°С. В первом аквариуме было 10 карпов (35 г), во втором аквариуме было 10 золотых рыбок ( Carassius auratus ) (50 г), а в третьем аквариуме было по пять рыб обоих видов. Эти уровни посадки соответствовали биомассе 0, 438 и 875 мг/л карпа. Рыбу кормили один раз в день вволю комбинацией хлопьевидного корма (Color Tropical Marine Flake, Pentair Aquatic Eco-systems, Inc., Апопка, Флорида) и гранулированный корм размером 2,5 мм (Oncor Fry, Skretting USA, Tooele, UT), не содержащий целевых генетических маркеров. Через 6 дней из каждого резервуара отобрали 4 пробы воды объемом 1 л, немедленно хранили при 4°C и фильтровали в течение 4 часов. Молекулярные анализы следовали протоколам, описанным ниже. Это исследование было проведено в строгом соответствии с рекомендациями Руководства по уходу и использованию лабораторных животных Национального института здоровья. Протокол по уходу и содержанию лабораторных рыб был одобрен Институциональным комитетом по уходу и использованию животных Университета Миннесоты (IACUC) (Протокол: 1407-31659A).В рамках этого исследования не требовалось ни анестезии, ни эвтаназии.

Учебный центр

Объектом исследования было озеро Старинг, небольшое пресноводное озеро, расположенное в верхнем бассейне реки Миссисипи (44°50’14” с.ш., −93°27’18” з.д.). Озеро Старинг – это небольшое мелкое озеро, которое часто перемешивается из-за ветра и типично для озер с высокой плотностью карпа в этом регионе [20]. Площадь зеркала озера составляет 65,7 га, в основном это прибрежная зона с глубиной менее 2 м. Максимальная глубина 4.8 м, а дно озера сложено мелкими отложениями. Из-за высокой плотности карпа в озере отсутствует водная растительность, за исключением белой кувшинки ( Nymphaea odorata ), которая занимает менее 10% площади озера.

Численность

популяции карпа в озере Старинг была оценена в 2011 г. с использованием анализа мечения-повторной поимки [20]. Этот анализ показал, что в озере обитало примерно 26 000 карпов, 95% ДИ [21 000, 31 000], или примерно 400 карпов/га. Средняя длина тела карпа составила 444 мм, что указывает на то, что популяция в основном состоит из взрослых особей [20].Зимой 2012 и 2013 годов из озера было выловлено около 14 000 рыб, а осенью 2013 года была получена новая оценка популяции путем проведения анализа повторной поимки. Для анализа метки-повторной поимки в ноябре 2013 г. 46 карпов были помечены индивидуально пронумерованными метками, 22 из которых были повторно пойманы в течение следующих четырех месяцев из 5 457 карпов, пойманных и обследованных на наличие меток. Используя эти данные, мы подсчитали, что осенью 2013 года в озере Старинг обитало 11 153 карпа, 95% ДИ [7 972, 14 334].Биомасса снизилась лишь незначительно, с 490 кг/га в 2011 г. до 397 кг/га в 2013 г., поскольку средняя длина тела карпа за это время увеличилась до 559 мм. Биомасса во время этого исследования составляла примерно 20 мг/л при средней глубине озера 2 м.

С 2011 года распределение карпа регулярно оценивается путем обнаружения 10–20 карпов, оснащенных внутренними радиометками (F 1850, Advanced Telemetry Systems, Isanti, MN). Местонахождение карпа определяли путем определения направленности сигнала (азимута) с помощью переносной антенны и компаса в пределах 200 м от меченой рыбы.Для каждой рыбы были измерены два пеленга, каждый из разных мест, и рассчитано их пересечение (LOAS, Ecological Software Solutions, CA) для оценки местоположения рыбы. Средняя ошибка измерения (30 м) оценивалась с использованием фиктивных меток.

С использованием ранее определенных местонахождений карпа была изучена схема использования местообитаний карпа в теплое время года (июнь–октябрь), когда карп сохраняет стабильное летнее распределение [21]. Всего за период 2011–2013 гг. было проведено 12 радиотелеметрических съемок.Отдельные локации (N = 135) вытягивались по рыбам и годам. Области интенсивного использования карпа оценивались путем расчета плотности ядра (радиус поиска  = 35 м, приблизительно одна юго-восток от оценки местонахождения карпа; размер выходной ячейки  = 4,2 м) с использованием пространственного аналитика в ArcMap (10,0, Esri, Редлендс, Калифорния).

Карп показал четко определенные области использования среды обитания в озере Старинг (рис. 1А). Плотность 800 меченых карпов/км 2 использовалась как граница между зонами интенсивного и редкого использования. Таким образом, районы с более низкими значениями считались районами с низким уровнем использования, тогда как районы с более высокой плотностью были классифицированы как районы с интенсивным использованием.Значение 800 меченых карпов/км 2 соответствует примерно 1248 карпам/га. Это пороговое значение было выбрано потому, что более низкие плотности были связаны с относительно изолированными наблюдениями меченых карпов. Районы с интенсивным использованием были расположены внутри или рядом с участками лилий, которые карп, скорее всего, использует в качестве укрытия, поскольку в озере отсутствует другая физическая структура. Кроме того, все зоны интенсивного использования находились в пределах 200 м от береговой линии и на глубине менее 2 м.

Рис. 1. Использование карпом и распределение эДНК в озере Старинг.

На панели A показано местонахождение карпа с радиоактивной меткой, а также зоны интенсивного и редкого использования. Категории плотности представляют собой среднее количество местонахождений меченого карпа/км 2 . Пороговое значение площади с высоким и низким уровнем использования, составляющее 800 меченых карпов/км 2 , соответствует примерно 1248 карпам/га. Панели B-D показывают характер обнаружения и концентрации эДНК в поверхностных водах (B), подповерхностных водах (C) и отложениях (D). Все фигуры имеют одинаковый масштаб. Обозначения символов в правом верхнем углу относятся к панели A, а в правом нижнем углу — к панелям B–D.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0112611.g001

Полевой отбор проб

Полевой отбор проб был проведен 8 октября 2013 г. Средняя скорость ветра составила 20 км/ч с юга [22], а температура воздуха и воды 17,8°С и 19,8°С соответственно. Пробы воды и отложений были отобраны в 24 точках озера. Пробы были взяты в 18 точках в 4-5 местах на трех участках озера с севера на юг и в одном месте на востоке и западе. Шесть дополнительных точек отбора проб были добавлены в пределах трех участков (по два образца на участок) Н.odorata , где, как мы знали, обычно водится карп. На каждом участке отбора проб были взяты пробы поверхностных вод, подповерхностных (глубина 0,5 м) вод и донных отложений. Также были взяты пробы поверхностных вод как на притоке, так и на выходе из озера.

Образцы воды были собраны в 1-литровые бутылки из полиэтилена высокой плотности (Nalgene, Rochester, NY), которые предварительно были замочены в 10% отбеливателе не менее чем на 30 минут для удаления всех следов ДНК. Затем бутылки ополаскивали дистиллированной водой для удаления остатков отбеливателя. Пробы поверхностных вод были взяты путем частичного погружения бутыли для проб, чтобы собрать воду с верхних нескольких сантиметров. Пробы подповерхностного слоя были взяты с использованием пробоотборника Van Dorn из нержавеющей стали (Wildlife Supply Company, Yulee, FL). Образцы отложений были собраны с помощью грейферного пробоотборника Petite Ponar из нержавеющей стали (Wildlife Supply Company, Yulee, FL). Осадок переносили в стерильный пакет Whirl-Pak (Nasco, Fort Atkinson, WI) с помощью стерильного полистиролового шпателя (Bel-Art, Wayne, NJ). После сбора образцы немедленно помещали на лед. Пробы воды и донных отложений хранили при 4°С и фильтровали в течение 24 часов. Никаких специальных разрешений для доступа к исследовательскому участку или сбора образцов в рамках этого исследования не требовалось.В рамках этого исследования животных не собирали.

Молекулярный анализ

Образцы воды фильтровали через фильтры из стеклянного микроволокна Whatman 934-AH 1,5 мкм (GE Whatman, Fairfield, CT) с использованием полифенилсульфоновой фильтрующей воронки (Pall Corporation, Port Washington, NY). Фильтрующие воронки и щипцы были пропитаны 10% отбеливателем и промыты дистиллированной водой перед использованием и между образцами. Для проб из резервуаров фильтровали 1 л воды на пробу. Для полевых образцов можно было отфильтровать только 200 мл на образец из-за засорения из-за большого количества взвешенных твердых частиц.Фильтры хранили при -80°С до выделения ДНК.

Образцы осадка были гомогенизированы, а подобразец весом 0,1 г хранился при температуре -80°C для выделения ДНК. Предварительные эксперименты показали, что экстракция более 0,1 г осадка приводит к снижению выхода эДНК и ингибированию количественной ПЦР, независимо от протоколов удаления ингибитора после экстракции или включения адъювантов ПЦР. Для определения влажности взвешивали навеску осадка массой 10 г и сушили при 100°С в течение 24 ч.

ДНК

экстрагировали с использованием набора QIAamp DNA Stool Mini Kit (Qiagen, Hilden, Germany) с использованием протокола анализа ДНК человека.Замороженные фильтры разрезали на фрагменты размером 1 мм × 5 мм стерильным лезвием бритвы, а затем переносили в пробирки для экстракции. Для образцов осадка буфер для экстракции добавляли непосредственно к замороженному осадку. Перед экстракцией добавляли 50 нг раствора UltraPure Salmon Sperm Solution (Life Technologies, Гранд-Айленд, Нью-Йорк) для корректировки эффективности экстракции ДНК, как описано ранее [23]. ДНК элюировали в конечном объеме 50 мкл. Для дальнейшего удаления потенциальных ингибиторов все экстракты ДНК обрабатывали с помощью набора Wizard Genomic DNA Purification Kit (Promega, Мэдисон, Висконсин).

Мультиплексный анализ кПЦР был разработан для амплификации как CarpCyt b , так и контрольных мишеней выделения, а концентрации олигонуклеотидов были оптимизированы для этого исследования (таблица 1). Стандарт CarpCyt b был создан путем клонирования продукта ПЦР, амплифицированного из ДНК зажима плавника карпа, для генетического маркера CarpCyt b (таблица 1) с использованием набора для ПЦР StrataClone (Stratagene, Санта-Клара, Калифорния). Очищенную плазмидную ДНК количественно определяли с использованием флуорометра QuantiFluor-ST (Promega, Madison, WI).Для контроля экстракции стандарты были созданы путем разбавления UltraPure Salmon Sperm Solution (Life Technologies, Гранд-Айленд, Нью-Йорк). CarpCyt b и стандарты контроля экстракции объединяли перед приготовлением пяти стандартов количественной ПЦР в диапазоне от 50 до 300 000 копий CarpCyt b и от 1,6 до 10 000 пг контрольной ДНК на 5 мкл.

В анализе использовались универсальные зонды iTaq Supermix (Bio-Rad, Hercules, CA). Реакции содержали 12,5 мкл мастер-микса, 10 мкг бычьего сывороточного альбумина (New England Biolabs Inc., Ипсвич, Массачусетс) праймеры и зонд, а также вода или осадок ДНК в конечном реакционном объеме 25 мкл. Объем ДНК воды и осадка, добавляемой в реакцию количественной ПЦР, регулировали путем тестирования серии разведений подмножества из 5 образцов воды и осадка, чтобы подтвердить отсутствие ингибирования. Для образцов донных отложений в реакцию добавляли 2,5 мкл экстракта ДНК, а для образцов воды – 5 мкл экстракта ДНК. Условия реакции включали начальную денатурацию при 95°С в течение 3 мин, затем 40 циклов денатурации при 95°С в течение 15 с и стадию отжига и удлинения при 60°С в течение 1 мин. Каждый запуск количественной ПЦР содержал три реакции стандартов, контролей без транскрипции и образцов. Амплификацию проводили с использованием системы ПЦР в реальном времени StepOnePlus (Life Technologies, Гранд-Айленд, Нью-Йорк), и значения C q определяли автоматически с использованием системного программного обеспечения. Концентрации маркеров в образцах рассчитывали для каждого запуска. Все значения осадка приведены в пересчете на сухой г.

Статистический анализ

Уровень обнаружения кДНК определяли как долю образцов, которые превышали LOD анализа qPCR.Чтобы проанализировать влияние глубины пробы воды (поверхностная, подповерхностная), использования карпа (малоиспользование, интенсивное использование) и типа матрицы (вода, отложения) на уровень обнаружения эДНК, количество обнаружений и необнаружений было статистически сравнивали с использованием точного критерия Фишера. Был использован точный критерий Фишера из-за низких ожидаемых значений (<5) в некоторых ячейках.

Концентрацию эДНК в воде анализировали с использованием трехфакторного дисперсионного анализа (ANOVA). Были изучены основные эффекты и двустороннее взаимодействие использования карпа (малопользование, интенсивное использование), глубины пробы воды (поверхностная, подповерхностная) и глубины озера (м).Глубина озера была включена для определения потенциального влияния взвешенных отложений на концентрацию эДНК водной толщи, при этом более мелкие глубины с большей вероятностью будут затронуты смешиванием отложений с водной толщей. Трехфакторный дисперсионный анализ был ограничен участками глубиной более 0,5 м и менее 2 м (т. е. были исключены 2 более мелких и 7 более глубоких участков отбора проб) из-за частичного смешения (зоны интенсивного использования не были обнаружены на глубинах более 2 м, пробы на малоиспользуемых участках на глубинах менее 0,5 м не отбирались). Наконец, t-критерий Стьюдента использовался для определения того, существует ли значительная разница между концентрацией эДНК в сайтах, включенных в дисперсионный анализ, и сайтах, исключенных для областей с низким уровнем использования. Поскольку были исключены только 2 участка в зоне интенсивного использования, статистическое сравнение не проводилось.

Для всех параметрических описательных анализов и статистических тестов концентрации эДНК были преобразованы в log 10 для достижения нормального распределения данных. Значениям ниже LOD перед анализом присваивалось значение половины LOD, чтобы уменьшить искажение данных. Для графического представления концентраций эДНК в точках отбора проб данные выше LOD были разделены на четыре равные категории процентилей.Процентили были определены независимо для двух типов проб: (1) поверхностных и подповерхностных вод и (2) проб донных отложений. Все статистические тесты проводились в JMP, версия 10 (SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина).

Результаты

Разработка генетических маркеров карпа и лабораторная проверка

Генетический маркер, специфичный для карпа (CarpCyt b ), был разработан для участка размером 149 п. н. в гене цитохрома b (табл. 1). Этот анализ имел R 2 более 0.99 и средней эффективностью ПЦР 92%. Наименьшее количество копий, при котором все три репликативные реакции надежно и успешно амплифицируются, определяют как LOD анализа. LOD анализа составлял 50 копий на реакцию, что соответствовало 2,0×10 4 копий/л для проб воды и 1,0×10 5 копий/г для проб донных отложений (рассчитано по количеству проанализированного экстракта ДНК и объему отфильтрованной воды). или извлеченный вес). LOD образца незначительно варьировался для отдельных образцов в зависимости от эффективности экстракции.Более подробную информацию о калибровочных кривых qPCR можно найти в таблице S2. Средняя эффективность извлечения составила 11% для проб воды и 6% для проб донных отложений. Анализ надежно определял количество до 3,0×10 5 копий на реакцию, что является самым высоким испытанным стандартом. Никакой амплификации нетранскриптных контролей не наблюдалось. В анализе не амплифицируется ДНК 34 аборигенных и неаборигенных видов рыб, включая пестрого толстолобика и других родственных карповых рыб (таблица S1).

В ходе проверочных испытаний с использованием лабораторных аквариумов, в которых содержались карпы и золотые рыбки, маркеры CarpCyt b не были обнаружены в аквариуме, где содержались только золотые рыбки.В аквариуме с 10 карпами концентрация маркеров в среднем составила 1,3×10 7 экз./л 95% ДИ [1,0×10 7 , 1,6×10 7 ]. В аквариуме с 5 карпами и золотыми рыбками концентрация маркеров составила 4,5×10 6 копий/л, 95% ДИ [3,1×10 6 , 6,7×10 6 ], что было значительно ниже ( p  = 0,007, критерий Стьюдента), чем у одного карпа, что указывает на то, что присутствие большего количества особей дает больше эДНК. В среднем на одного карпа приходится 3.1×10 11 копий CarpCyt b в аквариуме со смешанными видами и 4,4×10 11 копий на особь в аквариуме только с карпом.

Показатели обнаружения эДНК в озере Старинг

Общая частота обнаружения CarpCyt b в пробах воды составила 75% (табл. 2). Распределение вкДНК было пятнистым, при этом вкДНК карпа обнаруживалась в десятках метров от участков, где вкДНК не обнаруживалась (рис. 1Б, В). Скорость обнаружения статистически не отличалась между поверхностными и подповерхностными образцами ( p  = 1.00, точный критерий Фишера). Однако уровень обнаружения был значительно выше в пробах воды, отобранных в районах с интенсивным использованием ( p  = 0,009, точный критерий Фишера), разница составляет почти 40% (таблица 2).

Общая частота обнаружения CarpCyt b в осадке составила всего 36% (таблица 3). Подобно образцам воды, картина обнаружения была пятнистой (рис. 1D). Уровень обнаружения CarpCyt b в отложениях был немного выше в районах с интенсивным использованием по сравнению с районами с низким уровнем использования, однако разница между этими районами использования была незначительной ( p  = 1. 00, точный критерий Фишера). Частота обнаружения CarpCyt b в малоиспользуемых участках в донных отложениях была примерно на 30 % меньше, чем в среднем по пробам воды, однако не было разницы между частотой обнаружения ( p  = 0,11, точный критерий Фишера ). Уровень обнаружения эДНК в отложениях в районах с интенсивным использованием был почти на 60% меньше, чем в воде в районах с интенсивным использованием, и разница была статистически значимой ( p  = 0,005, точный критерий Фишера).

Концентрация эДНК в озере Старинг

Концентрация

CarpCyt b в воде колебалась ниже LOD (2.0×10 4 копий/л) до 1,7×10 6 копий/л (таблица S3). Средняя концентрация CarpCyt b во всех пробах воды составила 5,7×10 4 копий/л, 95% ДИ [3,9×10 4 , 8,3×10 4 ] (таблица 2). Большинство образцов (84%) имели менее 3,0×10 5 копий/л. Только три образца имели концентрацию маркера выше 5,0×10 5 копий/л. Образцы поверхностных вод притока и оттока имели концентрацию CarpCyt b , равную 6.0×10 4 и 3,4×10 4 копий/л соответственно.

Трехфакторный дисперсионный анализ показал, что схема использования карпа оказывает значительное (основное) влияние на концентрацию эДНК (таблица 4). Не было значительного влияния глубины озера или глубины образца на эДНК, и двусторонние взаимодействия не были значительными (таблица 4). Для подмножества мест отбора проб, рассматриваемых в ANOVA (глубина озера от 0,5 до 2 м), в районах с низким уровнем использования средняя концентрация CarpCyt b составляла 3,3×10 4 копий/л, 95% ДИ [1.8×10 4 , 5,9×10 4 ], а в районах интенсивного использования концентрация CarpCyt b в среднем составляла 1,6×10 5 копий/л, 95% ДИ [1,1×10× 5 1, 0 2,2, 5 ]. Не было существенной разницы в концентрации эДНК в мелководных участках, включенных в дисперсионный анализ, и в участках, исключенных из участков с низким уровнем использования карпа ( p  = 0,75).

Для образцов донных отложений концентрация эДНК варьировалась от ниже LOD (1,0×10 5 копий/г) до 5.4×10 5 копий/г (таблица S3). Для образцов донных отложений выше LOD концентрация CarpCyt b была немного выше в районах с интенсивным использованием (таблица 3), но разница не была значительной ( p  = 0,3, критерий Стьюдента). В пересчете на массу самая низкая измеримая концентрация CarpCyt b в отложениях была почти на два порядка выше, чем в пробе воды с самой высокой концентрацией CarpCyt b .

Обсуждение

Это исследование показало, что как скорость обнаружения, так и концентрация эДНК карпа сильно коррелируют с распределением карпа в озерной воде.В воде концентрация генетического маркера карпа CarpCyt b была более чем в 7 раз выше в районах с интенсивным использованием по сравнению с районами с низким уровнем использования, а уровень обнаружения вырос с 63% до 100%. Скорость обнаружения и концентрация эДНК не различались между пробами поверхностных и подповерхностных вод. Уровень обнаружения был сравнительно низким в отложениях и составил 36%. Распределение эДНК принципиально важно при разработке схем выборки эДНК и точной интерпретации данных эДНК [6]. Таким образом, мы показали, что распределение целевого организма необходимо тщательно учитывать при разработке схем отбора образцов эДНК и точной интерпретации данных эДНК.В частности, эДНК распределена в окружающей среде неравномерно, и вероятность обнаружения целевого организма может резко снижаться в десятках метров от часто обитаемых районов. В рамках этого исследования был разработан и валидирован высокоспецифичный анализ количественной ПЦР для карпа, инвазивной и широко распространенной рыбы.

Неоднородность распределения эДНК в пробах воды и отложений, взятых из озера Старинг, была неожиданной, учитывая, что озеро небольшое, мелкое и имеет высокую биомассу карпа.Однако Пиллиод и соавт. [9] также наблюдали высокую вариабельность концентрации эДНК амфибий в повторных пробах воды в небольших пресноводных ручьях. Авторы предположили, что изменчивость была обусловлена ​​нисходящими импульсами эДНК из-за активности организма-мишени или изменениями в типе клеток или форме (свободной или клеточной) эДНК. Альтернативное и, возможно, дополнительное объяснение состоит в том, что механизмы удаления эДНК из водной толщи, такие как осаждение и распад, являются быстрыми. Озеро Старинг — эвтрофное озеро с высокой продуктивностью и мутной, богатой питательными веществами водой.ЭДНК карпа в основном содержится во фракции размером от 1,0 до 10 мкм [24]. Частицы эДНК постоянно оседают в озерных отложениях, но взвешенные частицы также являются горячими точками микробной деградации в водных системах [25]. Хотя распад внДНК в этом исследовании не измерялся, микрокосмические исследования предполагают, что внДНК быстро распадается в окружающей среде, а в воде в течение нескольких дней разлагается почти на 90% [12], [26], [27], [28]. В совокупности вполне вероятно, что быстрое удаление эДНК из водной толщи в результате процессов разложения и осаждения предотвратило ее накопление и распространение из точек выпуска в озере Старинг, что привело к значительно более высоким концентрациям эДНК в районах, где обитал карп.

Независимо от причины неравномерного распределения эДНК, это имеет значение для оптимальной выборки эДНК. В малоиспользуемых областях уровень обнаружения eDNA был на 40% ниже в малоиспользуемых областях по сравнению с интенсивными. Расстояния между часто используемыми и малоиспользуемыми участками отбора проб составляли десятки или сотни метров, и это небольшое расстояние в некоторых случаях влияло на то, была ли обнаружена эДНК или нет. Различия в мелком пространственном масштабе наблюдались в ручьях [9], [29], экспериментальных прудах [15] и озерах [10].Таким образом, мы делаем вывод, что выборка эДНК должна проводиться в небольших пространственных масштабах. Только после тщательного тестирования и рассмотрения следует использовать интервалы выборки на больших расстояниях.

Насколько известно авторам, только в одном другом исследовании была предпринята попытка корреляции распределения эДНК рыб в лентической системе. Положительная связь между концентрацией эДНК карпа и температурой была отмечена Takahara et al. [10] в японской лагуне с использованием другого маркера в несколько более крупном масштабе без подробной информации о распределении карпа.Авторы предположили, что распределение соответствовало температуре, поскольку карп предпочитает более теплую воду; однако данные не сравнивались с фактическим распределением карпа, как в настоящем исследовании. Поэтому нельзя исключать и другие факторы, такие как более высокая метаболическая активность рыб в более теплых водах. Тем не менее, между этими исследованиями есть совпадения с закономерностями. Например, за исключением канала лагуны, области с более высокой эДНК, по-видимому, располагались вблизи береговой линии [10].Точно так же горячие точки эДНК вблизи берега наблюдались в озере Старинг из-за скопления карпа.

Общий уровень обнаружения эДНК карпа в воде озера Старинг составил 77%, как и в других исследованиях, проведенных в районах с высокой численностью рыбы. Например, эДНК пестрого толстолобика в поверхностных водах участка реки Миссисипи с высокой целевой популяцией обнаружена в 64% проб [30]. Точно так же 90% образцов были положительными на эДНК обыкновенного карпа в лагуне, используемой для целей разведения Takahara et al.[10].

Несмотря на предположение о накоплении эДНК в поверхностных водах, глубина воды не влияла на концентрацию или скорость обнаружения эДНК карпа в исследуемом озере. Следовательно, как поверхностные, так и подповерхностные образцы были одинаково эффективны для отбора проб эДНК в настоящем исследовании. Хотя большинство образцов эДНК берется с поверхности воды [11], [14], [26], [31], только одно исследование, проведенное в экспериментальных прудах, подтвердило, что эДНК чаще всего обнаруживается в поверхностных водах [15]. Обычай отбора проб поверхностных вод может быть пережитком ранних методов, в которых эДНК использовалась для обнаружения плавающих фекалий крупных морских млекопитающих [32].Наши результаты показывают, что уровень накопления эДНК в поверхностных водах может различаться у разных видов, и накопление, вероятно, зависит от относительной доли источников эДНК, плавучести фекального материала и факторов, специфичных для места.

Хотя предполагается, что эДНК накапливается в отложениях, уровень обнаружения оказался неожиданно низким — 36%. Вероятно, это связано с высоким LOD маркера CarpCyt b в отложениях. LOD в отложениях составлял 100 000 копий / г, что почти на 4 порядка выше, чем для проб воды в расчете на г.Высокий LOD, вероятно, частично связан с ограниченным количеством отложений, которые могут быть извлечены. Было обнаружено, что экстракты ДНК, приготовленные с более чем 0,1 г осадка, ингибируют реакцию количественной ПЦР; следовательно, большее количество осадка было невозможно переработать. Хотя эффективность экстракции осадка находилась в диапазоне, ранее наблюдаемом для коммерческих наборов для экстракции ДНК [33], она была примерно вдвое меньше, чем у проб воды. Мы не знаем причину этого несоответствия, но мы предполагаем, что химический состав образца может по-разному влиять на эффективность экстракции.Из-за сложности извлечения ДНК из донных отложений и возможного ингибирования количественной ПЦР отбор проб воды оказался более эффективным для обнаружения карпа в изучаемом озере.

Несмотря на низкий уровень обнаружения эДНК в донных отложениях, нельзя игнорировать ее важность как резервуара эДНК карпа. Концентрация CarpCyt b была высокой в ​​местах отложений, где была обнаружена эДНК, но, поскольку большинство образцов (63%) были ниже LOD, мы не смогли надежно рассчитать среднюю концентрацию эДНК в отложениях.Накопление эДНК в отложениях предполагалось на основании высокой концентрации микробной ДНК в отложениях [34], [35], но измерения эДНК рыб в отложениях ранее не публиковались. Горячие точки эДНК в отложениях не коррелировали с использованием карпа. Таким образом, необходимы будущие исследования для измерения факторов, которые могут контролировать распределение эДНК в отложениях, таких как отложение, ресуспендирование и скорость деградации.

Выводы

План выборки был ранее определен как один из четырех критических аспектов, которые необходимо оптимизировать в программе мониторинга на основе ДНК [6].Настоящее исследование показало, что распределение обыкновенного карпа привело к пространственным закономерностям как в концентрации эДНК, так и в частоте обнаружения в небольшом мелководном озере. Наши результаты показывают, что в то время как эДНК относительно равномерно распределена в толще воды, эДНК распределена по горизонтали фрагментарно. Большая вариация эДНК в небольшом пространственном масштабе, от десятков до сотен метров, указывает на то, что выборка водных видов с использованием эДНК должна использовать такой же мелкий масштаб, по крайней мере, для первоначальных исследований. Результаты этого исследования также косвенно предполагают, что механизмы удаления эДНК из водной толщи являются быстрыми и могут частично контролировать распределение эДНК.Хотя наблюдения текущего исследования не могут быть универсально применимы ко всем видам и средам обитания, наши результаты показывают, что схемы отбора проб эДНК следует критически оценивать для конкретного организма и типа водной среды, в которой они обитают. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы изучить роль разложения, повторного взвешивания отложений и высвобождения эДНК на распределение эДНК в водной среде обитания.

Благодарности

Авторы благодарят Sendréa Best за помощь в полевых и лабораторных условиях.Данные телеметрии рыбы были собраны Мэри Хедрик, Джозефом Лешелтом, Бреттом Миллером, Робертом Молленхойером и Трейси Зела. Эрик Смит и Джастин Кох помогали с ArcGIS. Марк Хоув любезно предоставил зажимы для плавников для использования в тестировании специфичности. Коммерческий рыбак Тим Адамс и его команда также оказали ценную помощь в приобретении зажимов для плавников для проверки специфичности из реки Миссисипи.

Вклад авторов

Задумал и разработал эксперименты: JJE PGB PWS. Выполнял эксперименты: JJE PGB.Проанализированы данные: JJE PGB PWS. Предоставленные реагенты/материалы/инструменты для анализа: JJE PGB PWS. Написал статью: JJE PGB PWS.

Каталожные номера

  1. 1.
    Меса М.Г., Шрек С.Б. (1989) Электрорыболовные методы повторной поимки и истощения вызывают поведенческие и физиологические изменения у головорезов. Trans Amer Fish Soc 118: 644–658.
  2. 2.
    Кросс Д.Г., Стотт Б. (1975)Влияние электрической рыбалки на последующую поимку рыбы. J Fish Biol 7: 349–357.
  3. 3.
    Бэйли П.Б., Остин Д.Дж. (2002) Эффективность захвата лодочного электролова. Trans Amer Fish Soc 131: 435–451.
  4. 4.
    Lodge DM, Turner CR, Jerde CL, Barnes MA, Chadderton L, et al. (2012) Сохранение в чашке воды: оценка биоразнообразия и численности населения по ДНК окружающей среды. Мол Экол 21: 2555–2558.
  5. 5.
    Олсон З.Х., Бригглер Дж.Т., Уильямс Р.Н. (2012)Подход eDNA для обнаружения восточных магов ада ( Cryptobranchus a.alleganiensis ) с использованием образцов воды. Уайлд Рез 39: 629–636.
  6. 6.
    Дарлинг Дж. А., Махон А. Р. (2011) От молекул к управлению: внедрение методов на основе ДНК для мониторинга биологических инвазий в водной среде. Окружная рез. 111: 978–988.
  7. 7.
    Ficetola GF, Miaud C, Pompanon F, Taberlet P (2008) Обнаружение видов с использованием ДНК окружающей среды из проб воды. Биол. Летт 4: 423–425.
  8. 8.
    Джерде К.Л., Махон А.Р., Чаддертон В.Л., Лодж Д.М. (2011) «Невидимое» обнаружение редких водных видов с использованием ДНК окружающей среды.Conserv Lett 4: 150–157.
  9. 9.
    Пиллиод Д.С., Голдберг К.С., Аркл Р.С., Уэйтс Л.П. (2013)Оценка численности и численности речных амфибий с использованием ДНК окружающей среды из отфильтрованных проб воды. Can J Fish Aquat Sci 70: 1123–1130.
  10. 10.
    Такахара Т., Минамото Т., Яманака Х., Дои Х., Кавабата З. (2012) Оценка биомассы рыб с использованием ДНК окружающей среды. PLoS One 7: e35868.
  11. 11.
    Томсен П.Ф., Килгаст Дж., Иверсен Л.Л., Виуф С., Расмуссен М. и соавт.(2012) Мониторинг находящегося под угрозой исчезновения пресноводного биоразнообразия с использованием ДНК окружающей среды. Мол Экол 21: 2555–2558.
  12. 12.
    Томсен П.Ф., Килгаст Дж., Иверсен Л.Л., Меллер П.Р., Расмуссен М. и др. (2012) Обнаружение разнообразной морской ихтиофауны с использованием ДНК окружающей среды из образцов морской воды. PLoS One 7: e41732.
  13. 13.
    Голдберг К.С., Сепульведа А., Рэй А., Баумгардт Дж., Уэйтс Л.П. (2013) Экологическая ДНК как новый метод раннего обнаружения новозеландских грязевых улиток ( Potamopyrgus antipodarum ).Свежая наука 32: 2555–2558.
  14. 14.
    Служба рыболовства и дикой природы США (2013 г.) План проекта по обеспечению качества (QAPP): мониторинг электронной ДНК пестрого толстолобика и толстолобика. 89 стр.
  15. 15.
    Moyer GR, Díaz-Ferguson E, Hill JE, Shea C (2014)Оценка обнаружения ДНК в окружающей среде в контролируемых лентичных системах. PLoS Один 9: e103767.
  16. 16.
    Бохманн К., Эванс А., Гилберт Т.П., Карвалью Г.Р., Крир С. и др. (2014) ДНК для биологии дикой природы и мониторинга биоразнообразия.Тенденции Ecol Evol 29: 358–357.
  17. 17.
    Махон А.Р., Джерде К.Л., Галаска М., Бергнер Дж.Л., Чаддертон В.Л. и др. (2013) Подтверждение чувствительности наблюдения эДНК для выделения азиатских карпов в контролируемых и полевых экспериментах. PLoS One 8: e58316.
  18. 18.
    Chang Y, Huang F, Lo UT (1994)Полная последовательность нуклеотидов и организация генов митохондриального генома карпа ( Cyprinus carpio ). Дж. Мол Эвол 38: 138–155.
  19. 19.
    Mayden RL, Tang KL, Conway KW, Freyhof J, Sudkamp M, et al.(2007) Филогенетические отношения Danio в отряде Cypriniformes: основа для сравнительных и эволюционных исследований модельных видов. J Exp Zoo B Mol Dev Evol 308: 642–654.
  20. 20.
    Байер П.Г., Соренсен П.В. (2012) Использование электролова с лодки для оценки численности инвазивного обыкновенного карпа в небольших озерах Среднего Запада. Н. Амер Дж. Фиш Манаг 32: 817–822.
  21. 21.
    Байер П.Г., Чизински С.Дж., Соренсен П.В. (2011) Использование метода Иуды для обнаружения и удаления зимних скоплений инвазивного карпа.Fish Manag Ecol 18: 497–505.
  22. 22.
    (NOAA) Глобальная историческая климатическая сеть Национального управления океанических и атмосферных исследований. Доступно: http://www.ncdc.noaa.gov/cdo-web/datasets#GHCND. По состоянию на 11 февраля 2014 г.
  23. 23.
    Haugland RA, Siefring SC, Wymer LJ, Brenner KP, Dufour AP (2005) Сравнение измерений Enterococcus в пресной воде на двух рекреационных пляжах с помощью количественной полимеразной цепной реакции и анализа культуры мембранного фильтра.Water Res 39: 559–568.
  24. 24.
    Turner CR, Barnes MA, Xu CCY, Jones SE, Jerde CL, et al. (2014) Распределение частиц по размерам и оптимальное улавливание водной макробиологической среды Edna. Метод Ecol Evol doi: 10.1111/2041-210X.12206.
  25. 25.
    Саймон М., Гроссарт Х.-П., Швейцер Б., Плауг Х. (2002) Микробная экология органических агрегатов в водных экосистемах. Акват Микроб Экол 28: 175–211.
  26. 26.
    Пиллиод Д.С., Голдберг С.С., Аркл Р.С., Уэйтс Л.П. (2014) Факторы, влияющие на обнаружение кДНК у земноводных, обитающих в ручьях.Мол Эколь Рез 14: 109–116.
  27. 27.
    Дежан Т. , Валентини А., Дюпарк А., Пелье-Кюит С., Помпанон Ф. и др. (2011) Стойкость ДНК окружающей среды в пресноводных экосистемах. PLoS One 6: e23398.
  28. 28.
    Барнс М.А., Тернер К.Р., Джерде К.Л., Реншоу М.А., Чаддертон В.Л. и соавт. (2014) Условия окружающей среды влияют на устойчивость эДНК в водных системах. Environ Sci Technol 48: 1819–1827.
  29. 29.
    Джейн С.Ф., Уилкокс Т.М., МакКелви К.С., Янг М.К., Шварц М.К. и др.(2014)Расстояние, поток и ингибирование ПЦР: динамика эДНК в двух истоках реки. Mol Ecol Res doi: 10.1111/1755-0998.12285.
  30. 30.
    Амберг Дж. Дж., МакКалла С. Г., Миллер Л., Соренсен П., Гайковски М. П. (2013) Обнаружение ДНК пестрых карпов из окружающей среды в образцах, собранных в отдельных местах на реке Санта-Крус и реке Миссисипи: отчет Геологической службы США с открытым файлом, 2013 г. –1080: 44 стр.
  31. 31.
    Такахара Т., Минамото Т., Дои Х. (2013) Использование ДНК окружающей среды для оценки распространения инвазивных видов рыб в прудах. PLoS One 8: e56584.
  32. 32.
    Тикель Д., Блэр Д., Марш Х.Д. (1996) Фекалии морских млекопитающих как источник ДНК. Мол Экол 5: 456–457.
  33. 33.
    Mumy KL, Findlay RH (2004) Удобное определение эффективности извлечения ДНК с использованием внешнего стандарта восстановления ДНК и количественно-конкурентной ПЦР. J Microbiol Meth 57: 259–268.
  34. 34.
    Анно А.Д., Коринальдези С. (2004)Деградация и оборот внеклеточной ДНК в морских отложениях: экологические и методологические соображения.Appl Environ Microbiol 70: 4384–4386.
  35. 35.
    Пьетрамеллара Г., Ашер Дж., Боргоньи Ф., Чеккерини М.Т., Герри Г. и др. (2008) Внеклеточная ДНК в почве и отложениях: судьба и экологическая значимость. Биол Плодородные почвы 45: 219–235.
  36. 36.
    Domanico MJ, Phillips RB, Oakley TH (1997) Филогенетический анализ тихоокеанского лосося (род Oncorhynchus ) с использованием последовательностей ядерной и митохондриальной ДНК. Can J Fish Aquat Sci 54: 1865–1872.

Пара «ловит» 15-фунтовую рыбу без удочки

Трей и Дарлин Кэти из Хот-Спрингс, Арканзас., останавливались в одном из коттеджей государственного парка Моро-Бэй на этих выходных и рассказали о рыбной сказке. Пара арендовала лодку в парке, чтобы увидеть живописные водные пути залива Моро, реки Уашита и озера Раймонд в воскресенье утром. Во время спуска на лодке по озеру Рэймонд Трей Кэти был поражен вспышкой серебра и чем-то ударившим его по ноге. К его удивлению, вместе с ними в лодку прыгнула большая рыба. Потрясенные этим, они принесли рыбу обратно в центр для посетителей, чтобы показать ее мне, смотрителю парка и суперинтенданту.Он сказал, что впервые поймал рыбу без удочки!

Рыба представляет собой толстолобика, экзотического вида из Азии, который в 1970-х годах содержался в муниципальных отстойниках сточных вод в Арканзасе государственными, федеральными и частными предприятиями. Толстолобик и толстолобик внешне похожи и являются экзотическими видами из Азии. Они оба были зарыблены, потому что поедают большое количество планктона и детрита. Толстолобик отличается тем, что, испугавшись, может подпрыгнуть на 10 футов.Оба вида сбежали из мест, где они изначально были заселены на юге, и с тех пор перебрались вверх по Миссисипи в реки Арканзас и Уайт. Хотя они редки, они также встречаются в реке Уашита.

Рыба весила 15 фунтов 1 унцию и имела длину 33 дюйма. Это много по сравнению с большинством толстолобиков, но они могут вырасти до 60 фунтов. Я был в государственном парке Моро-Бэй в течение 12 лет, и за последние несколько лет я видел несколько прыгающих карпов в этом районе во время катания на лодке.Тем не менее, это первое сообщение о том, что кто-то действительно прыгнул в лодку!

Впервые я начал их видеть около трех лет назад, и, говоря о них, я имею в виду одного-двух за лето. Я связался с биологом-рыболовом, который сказал мне, что в университете проводятся исследования, чтобы попытаться найти для них рыночную цель, чтобы помочь в искоренении. Мне также сказали, что прыгающее поведение толстолобика более характерно для молоди и мелководья, поэтому ожидается, что вероятность появления этих летучих рыб в нашей большой и относительно глубокой реке будет минимальной.Однако у Кэти есть настоящая рыбная сказка!

 

Взаимоотношения золотых рыбок и карпов. (a) Филогенетическое дерево…

Контекст 1

… Представленные здесь данные о нокдауне МО позволяют предположить, что недавно продублированные паралогичные гены хордин, возможно, способствовали генетической фиксации морфологии двойного хвоста в линии золотых рыбок, что согласуется с нашими предыдущие выводы 9 . Напротив, наличие паралогичных генов могло препятствовать появлению этой морфологии в линии обыкновенного карпа (рис. 1а и 4).Ожидается, что цис- и/или транс-регуляторные факторы и дивергенция кодирующих последовательностей могут способствовать различиям в перекрывающихся паттернах экспрессии хординовых паралогов у золотых рыбок и обыкновенных карпов.

Контекст 2

… по данным нокдауна мы можем предсказать, что, даже если ген chdA обыкновенного карпа обладал мутацией стоп-кодона, эквивалентной мутации chdA золотой рыбки E127X/E127X (дополнительный рисунок S1), мутация стоп-кодона не будет обнаружена и зафиксирована в популяции селекционерами, потому что ее эффект будет замаскирован перекрывающимся паттерном экспрессии chdB (Figs 1a и 4) 23,25 .Более того, этот гипотетический мутантный ген chdA обыкновенного карпа, скорее всего, стал бы псевдогеном, в соответствии с общей судьбой дуплицированных генов, присутствующих в геномах рыбок данио и медака 26,27 ; такая псевдогенизация привела бы к тому, что обыкновенный карп стал бы эквивалентен рыбке данио и медаке по количеству генов хордина. …

Контекст 3

… по данным нокдауна мы можем предсказать, что, даже если ген chdA обыкновенного карпа обладал мутацией стоп-кодона, эквивалентной chdA E127X/E127X золотой рыбки (дополнительный рис. S1), мутация стоп-кодона не будет обнаружена и зафиксирована в популяции селекционерами, потому что ее эффект будет замаскирован перекрывающимся паттерном экспрессии chdB (Figs 1a и 4) 23,25 . Более того, этот гипотетический мутантный ген chdA обыкновенного карпа, скорее всего, стал бы псевдогеном, в соответствии с общей судьбой дуплицированных генов, присутствующих в геномах рыбок данио и медака 26,27 ; такая псевдогенизация привела бы к тому, что обыкновенный карп стал бы эквивалентен рыбке данио и медаке по количеству генов хордина….

Контекст 4

… в совокупности можно сделать вывод, что золотые рыбки претерпели ряд эволюционных событий (удвоение гена chordin, субфункционализация паттернов экспрессии гена chordin и отбор морфологических признаков, которые позволили зафиксировать аллель chdA E127X в популяции золотых рыбок в порядке, обеспечивающем резкое морфологическое изменение; хотя обыкновенный карп претерпел дупликацию гена chordin и подвергся тому же типу селективного давления, что и золотая рыбка, отсутствие события субфункционализации предотвратило появление морфологии двойного хвоста (рис. 1 и 4).Наконец, сравнение представленных здесь результатов с фенотипическими и геномными данными других видов позвоночных обещает дать представление о том, как широкомасштабные морфологические изменения могут происходить в определенной линии. …

Контекст 5

… инъецированные эмбрионы инкубировались при 24 °C. Последовательность МО, используемых для блокирования трансляции, следующая: ca-chdA-MO: GCGCTGACAGAGACGACGAAACCAA; ca-chdB-MO: ACAGCACTCGCGCAGCTTCCATTCC; cy-chdA-MO: GAACCGCTTCCTCTGCGCCAAAACGC; ca-chdB-MO: AACTTCTGATTCTAACTCTCCTGCGC (дополнительный рис.С1). …

Супружеская пара из Китая оштрафована на 1500 долларов США за приготовление для своих родителей голого карпа, находящегося под угрозой исчезновения

Пара из северо-западного Китая, решившая угостить своих родителей домашней едой, недавно оказалась в горячей воде после того, как их выбор основного блюда изменился быть редким и охраняемым видом рыб.

Проблема началась, когда пара из провинции Цинхай засняла, как готовят голого карпа ( Gymnocypris przewalskii ), и загрузила кадры в социальные сети, сообщила в пятницу государственная телекомпания CCTV.

Сколько стоит экотуризм? 6000 китайских осетров погибло при строительстве «зеленого» курорта

Зоркие интернет-пользователи быстро заметили ошибку пары и тут же отругали их. Их коллективное излияние гнева привлекло внимание местных властей, и пара обнаружила, что их посетила полиция из Национального природного заповедника озера Цинхай.

Голый карп, получивший свое название за то, что у него почти нет чешуи, ежегодно мигрирует из пресноводных рек, где происходит нерест, в соленое озеро Цинхай, крупнейшее в Китае.

Несмотря на то, что их численность неуклонно растет – примерно с 2 600 тонн в 2002 году до 88 000 тонн в ноябре – эти рыбы по-прежнему классифицируются как находящиеся под угрозой исчезновения в Красном списке видов Китая после многих лет перелова и потери среды обитания.

10 000 китайских рыб наслаждаются свободой, но ненадолго

Из-за охраняемого статуса пара была оштрафована на 10 000 юаней (1500 долларов США) в соответствии с Законом Китая об охране дикой природы, говорится в отчете.

Не сказано, как супруги нашли рыбу, но жена, которую назвали только Сун, сказала, что ее купил ее муж, имя которого не называется.

Несмотря на враждебную реакцию, которую видео пары получило в Интернете, реакция на отчет видеонаблюдения была более благосклонной.

«[Голый карп] очень вкусный. Как житель Цинхая, я ел его. Они оштрафуют меня на 10 000 юаней из-за этого комментария?» написал один человек.

«Рыбу купили у других. Возможно, они не знали, что это за вид. Почему они не наказали того, кто им это продал?» — спросил другой.

История продолжается

Супружеская пара не первая, кто нарушает законы Китая о защите дикой природы.

В ноябре мужчина был задержан на пять месяцев и оштрафован почти на 12 000 юаней после того, как его поймали на ловле голого карпа, а месяцем ранее мужчина из Синина, столицы Цинхая, был оштрафован на 7 000 юаней за публикацию своего видео. приготовление рыбы.

Эта статья Китайская пара оштрафована на 1500 долларов США за приготовление голого карпа, находящегося под угрозой исчезновения, для своих родителей. Copyright 2019.

Борьба с растительностью с помощью триплоидного белого амура в прудах

Если важной целью является выращивание крупного большеротого окуня, рассмотрите возможность создания плотного укрытия для мелкой рыбы до уничтожения нежелательной растительности. Этого можно добиться, посадив полезную надводную растительность, такую ​​как сорняк и утиный картофель, на мелководье, а также добавив кучу плотных искусственных или природных материалов в воду на глубине менее пяти футов.

Другим недостатком для тех, кто управляет рыбными прудами, является то, что белый амур может облениться и припарковаться перед вашими кормушками, особенно если в пруду не осталось растительности.Если вы используете кормушки для рыб в качестве основного способа повышения продуктивности, то поймите, что в какой-то момент белый амур, скорее всего, будет конкурировать за корм для рыб, как правило, когда они проходят несколько лет под своей чешуей. Если вы заметили, что они едят корм для рыб, вы должны их поймать. Наиболее распространенный метод удаления белого амура — это отстрел или вылов. Кстати, это легче сказать, чем сделать.

Дополнительным недостатком является то, что белый амур является речной рыбой и имеет тенденцию хотеть путешествовать. Они, кажется, тянутся к звуку движущейся воды, поэтому в зависимости от пруда; им может быть трудно удержаться от бегства вниз по течению.Чтобы решить эту проблему, запланируйте отрегулировать сток водоемов, чтобы карп не мог убежать. На самом деле, во многих штатах требуется изменить сток пруда, чтобы рыба не убегала.

Хотя эта рыба может показаться волшебной палочкой, не забывайте думать за пределами очевидного. Как только вы определите, что белый амур нацелится на ваши инвазивные растения, подумайте, что будет дальше.

Например, один из сценариев, который следует рассмотреть, — это пруд с повышенным содержанием питательных веществ, а также забитый подводной водной растительностью, такой как гидрилла или тысячелистник.В таких ситуациях зарыбление белого амура в больших количествах, например, 10-15 рыб на акр, часто уничтожает растительность и оставляет еще больше питательных веществ, делая пруд склонным к густому цветению водорослей. В этом случае вам, возможно, придется рассмотреть возможность применения альгицидов для борьбы с нежелательными водорослями, а также реализовать стратегии управления, которые помогут снизить уровень питательных веществ. Пруды в районах со стоком могут свести к минимуму этот риск за счет промывки пресной водой.

Прежде чем заселить белого амура, вы должны правильно ответить на следующие вопросы: Законны ли они в вашем штате? Есть ли у вас достаточное укрытие, чтобы поддерживать баланс между хищниками и жертвами после уничтожения вашей подводной растительности? Является ли ваша нежелательная растительность видом, который съест белый амур? Если вы используете кормушки для рыб, и белый амур начнет есть корм для рыб, предпримете ли вы необходимые действия, чтобы удалить белого амура? Или вы измените свою стратегию кормления? Планируете ли вы в будущем установить полезную эмерджентную растительность? Ответы на эти вопросы закладывают основу для мудрых решений.

Один из важных факторов при заселении белого амура – правильный размер. Слишком часто я вижу и слышу о людях, зарыбляющих 8-дюймовую рыбу. 8-дюймовый белый амур является закуской для большинства взрослых окуней и сомов. Чтобы повысить шансы на успех, важно иметь белого амура длиной не менее 10 дюймов, но предпочтительно 12 дюймов. Эти более крупные рыбы более выносливы и могут легче избегать нападения хищников. Кроме того, у них есть способность есть более агрессивно и быстрее достигать больших размеров, что поможет уменьшить хищничество, а также уменьшит их способность убегать через отток.Если у вас есть стая окуня весом 5-10 и более фунтов, вам следует попросить у поставщика рыбы 2-фунтового белого амура. 14-дюймовый белый амур весит около 2 фунтов и лучше подходит для защиты от хищников со стороны более крупного окуня.

Если более крупный белый амур недоступен, рассмотрите возможность увеличения посадки 10-дюймовой рыбы.

Пара карпов SW1749 Круглый ковер, милый коврик для детской игровой комнаты, круглый коврик для спальни

СКОЛЬКО ДОЛГО ЗАНИМАЕТСЯ ОБРАБОТКА ЗАКАЗОВ?

Обработка заказов обычно занимает от до 7 дней до отправки, за исключением выходных и праздничных дней. В праздничные дни обработка может занять до 14 дней.

СКОЛЬКО ВРЕМЕНИ ПОЛУЧИТ МОЙ ЗАКАЗ?

Заказы будут отправлены в зависимости от центра выполнения, из которого поступил продукт.

  • США:  10–21 рабочих дней. Для всех заказов предусмотрены отслеживание и безопасная проверка.
  • Великобритания, Австралия, Новая Зеландия, Канада:  15–30 рабочих дней. Для всех заказов предусмотрены отслеживание и безопасная проверка.
  • Остальной мир: 20-40 рабочих дней . Для всех заказов предусмотрены отслеживание и безопасная проверка.
  • Среднее время доставки обычно составляет 3 недели.

Существуют неконтролируемые обстоятельства (стихийные бедствия, праздники, погода и т. д.), которые могут привести к задержке доставки. Хотя большинство посылок доставляются вовремя, могут возникнуть обстоятельства и задержки, с которыми могут столкнуться наши перевозчики. По этой причине мы не гарантируем точное время доставки; вопрос доставки является обязанностью транспортной компании.

Возврат
Наш полис действует 30 дней. Если с момента покупки прошло 30 дней, к сожалению, мы не можем предложить вам возврат или обмен.

Чтобы иметь право на возврат, ваш товар должен быть неиспользованным и находиться в том же состоянии, в котором вы его получили. Он также должен быть в оригинальной упаковке.

Некоторые виды товаров не подлежат возврату. Пожалуйста, прочитайте ниже.

Возврат (если применимо)
После получения и проверки вашего возврата мы отправим вам электронное письмо, чтобы уведомить вас о том, что мы получили ваш возвращенный товар.Мы также уведомим вас об одобрении или отклонении вашего возмещения.
Если вы одобрены, ваш возврат будет обработан, и кредит будет автоматически применен к вашей кредитной карте или исходному способу оплаты в течение определенного количества дней.

Задержка или отсутствие возмещения (если применимо)
Если вы еще не получили возмещение, сначала проверьте свой банковский счет еще раз.
Затем свяжитесь с компанией, выпустившей вашу кредитную карту, может пройти некоторое время, прежде чем ваш возврат будет официально отправлен.
Далее обратитесь в свой банк. Часто перед отправкой возмещения требуется некоторое время на обработку.
Если вы сделали все это, но до сих пор не получили возмещение, свяжитесь с нами по адресу [email protected]

Предметы со скидкой (если применимо)
Возврату подлежат только товары по обычной цене, к сожалению, товары со скидкой не может быть возвращен.

Обмен (если применимо)
Мы заменяем товары только в случае их дефекта или повреждения. Если вам нужно обменять его на такой же товар, отправьте нам электронное письмо по адресу [email protected]

Подарки
Если товар был помечен как подарок при покупке и доставке непосредственно вам, вы получите подарочный кредит на стоимость вашего возвращения. Как только возвращенный товар будет получен, подарочный сертификат будет отправлен вам по электронной почте.

Если товар не был помечен как подарок при покупке, или даритель отправил заказ себе, чтобы передать вам позже, мы отправим возврат дарителю, и он узнает о вашем возврате.

Доставка
Чтобы вернуть товар, свяжитесь с нами по адресу [email protected]

Вы будете нести ответственность за оплату транспортных расходов при возврате товара.Стоимость доставки не возвращается. Если вы получите возмещение, стоимость обратной доставки будет вычтена из вашего возмещения.

В зависимости от того, где вы живете, время, которое может потребоваться для того, чтобы ваш обмениваемый товар был доставлен к вам, может различаться.

Если вы отправляете товар на сумму более 75 долларов США, вам следует рассмотреть возможность использования отслеживаемой службы доставки или приобретения страховки доставки. Мы не гарантируем, что получим ваш возвращенный товар.

Бизнесмен из Восточной Пеории намерен откусить от популяции азиатского карпа в реке Иллинойс

Скотт Хильярд
| шильярд@pjstar.com

ВОСТОЧНАЯ ПЕОРИЯ — Весь день они работали на реке Иллинойс, выслеживая карпа, забрасывая сети и загружая дневной улов в свои 30-футовые джонботы.

Ближе к вечеру рыбаки причалили к различным пристаням, расположенным вверх и вниз по водным артериям штата, их лодки были нагружены тысячами фунтов мертвых и умирающих буйволов, пестрых, толстолобиков и белого амура.

Затем они прицепили свои лодки к большегрузным пикапам, а затем ехали час, два, три часа на какой-нибудь рыбный завод, чтобы продать свою дневную работу и выгрузить свой груз, чтобы они могли вернуться домой и подготовиться к рыбалке в другой день. .Обычно на следующий день.

«Они прибудут к двери (предприятия по переработке)», — сказал Рой Сорс, бизнесмен из Восточной Пеории, который стремится перестроить и модернизировать карповую промышленность в центральном Иллинойсе, заработать пару баксов и, возможно, спасти реку и пара Великих озер в процессе. «И иногда вам говорят: «Сегодня мы не покупаем рыбу». Что вы тогда делаете?»

Десять тысяч фунтов разлагающегося карпа к вечеру станут хуже, чем бесполезными — с одной стороны, ненужными и непригодными для продажи, а с другой — занимающими место, необходимое для более свежего улова на следующий день.

Иногда второго варианта не было. Иногда мертвую рыбу сбрасывали на сельскохозяйственные угодья. Иногда их возвращали в реку.

Эти дни меняются.

Sorce, Sorce Enterprises, Sorce Freshwater и группа выносливых независимых рыбаков не хотят навредить реке, они хотят ей помочь. На временной шкале, параллельной разрушительному распространению коронавируса в этом году, Sorce официально собрал всех, кроме одного, из 13 рыбаков, которые ловят рыбу в так называемом бассейне Пеории — примерно от Пеории на север до Ютики — в санкционированную государством рыбную ловлю Среднего Запада. Кооператив.

— Рыбаки считают, что это лучшее, что с ними когда-либо случалось, — сказал Сорс. — А мы только начинаем.

Этот бизнес-план читается как художественная литература, и карп, возможно, не самая странная сюжетная линия книги. Компания Sorce Enterprises уже почти 50 лет работает в районе Пеории, снабжая рестораны быстрого питания Среднего Запада продуктами питания, бумагой и замороженными продуктами. Операция в Восточной Пеории физически превратилась в обширный склад, способный хранить как охлажденные, так и замороженные продукты.

Но ко второму десятилетию 21 века мелкие независимые дистрибьюторы начали вытесняться с рынка. Сорс наблюдал за падением своего бизнеса и стремился диверсифицировать его.

«Моя мотивация заключалась в том, чтобы удержать моих рабочих на работе», — сказал Сорс.

Появились две совершенно разные возможности, которые затем объединились в то, что теперь, вероятно, является единственным легальным партнерством по бизнесу каннабиса и азиатского карпа на планете. С его объектами, расположенными всего в нескольких шагах от восточного берега реки Иллинойс, Сорс знал, что штат ищет способы сократить популяцию вредоносного азиатского карпа, чтобы очистить реку и лишить рыбу доступа к Великим озерам.

Он вошел, чтобы узнать, может ли он помочь.

«То, что начиналось как простое предложение предоставить местным рыбакам склад с регулируемой температурой для хранения их рыбы, с тех пор превратилось в Sorce Freshwater, бизнес, который планирует использовать этих карпов множеством выгодных способов», — говорится в рекламном ролике компании. материал.

Вторая возможность для бизнеса появилась в начале 2020 года, когда государство легализовало покупку и употребление рекреационной марихуаны. Сорс провел линию от одного к другому.

«Мы подали заявку на получение лицензии на производство каннабиса, чтобы использовать оставшуюся часть нашего предприятия и предложить прибыль Sorce Freshwater, чтобы мы могли приобрести необходимое оборудование и расширения для здания», — говорится в обзоре бизнеса. «Эти две возможности будут работать рука об руку, чтобы очистить наши реки, обеспечить здоровой пищей (обработанный карп) людей любого социально-экономического статуса, уменьшить нехватку каннабиса в Иллинойсе и обеспечить крупный источник налоговых поступлений для государство.

Ожидается решение государства о выдаче лицензии, но депутаты горсовета дали свое согласие в январе.

Каннабис и карп. Имеет смысл.

Пока вы читаете это, согласно статистике, которую изучил Sorce, в реке Иллинойс плавает и прыгает от 60 до 75 миллионов фунтов промыслового карпа. И поскольку рыба — это живой, жаберно-дышащий, размножающийся организм, их количество постоянно пополняется и увеличивается. Если не контролировать, цифры могут быстро вырасти до 100-150 миллионов фунтов стерлингов.

Плодовитые виды перенаселяют водоемы, доминируют над источниками пищи и вытесняют более благоприятные виды рыб, как и любой другой вид, который не выпрыгивает из воды и не сбивает людей со своих наездников на волнах.

Цель Sorce — ежегодно вылавливать из реки 15 миллионов фунтов рыбы, что составляет значительную часть популяции, но только небольшую часть. Если бы еще девять предприятий последовали модели, которую пытается внедрить Sorce, можно было бы добиться реального прогресса в управлении численностью инвазивных видов в реке.

Директор Департамента природных ресурсов Иллинойса Коллин Каллахан знакома с усилиями Sorce.

«То, что делает Рой, абсолютно необходимо для процесса удаления азиатского карпа из реки Иллинойс, — сказал Каллахан.«То, что он помог установить, было еще одним инструментом среди нескольких, которые мы используем для очистки реки и предотвращения попадания рыбы в Великие озера».

В прошлый четверг рыбак Брюс Харпер осторожно загнал свой пикап Dodge Ram и лодку на прицепе через дверь гаража в назначенную зону доставки склада Sorce. Негабаритный пикап и 30-футовая джонбот едва помещаются в пространстве. Харпер и его напарник Бретт Уитситт из Астории весь день ловили рыбу на разных лодках вокруг Чилликота.

Карп только что прибыл на склад, но рыбного запаха в огороженном помещении не было. В комнате с высоким потолком больше пахло дезинфицирующим средством, достаточно мощным, чтобы уничтожить последнюю десятую часть вирусов и бактерий, которые даже салфетки Clorox не претендуют на уничтожение.

В резиновых сапогах, джинсах, масках и резиновых перчатках от бицепса до кончиков пальцев работники Sorce Закари МакГиннис и Дэниел Уэббер забрались на лодку, открыли контейнеры и обнажили груды серебристобрюхих карпов.

«О, этот парень только что высунул голову», — сказала Ребекка Клопфенштайн, которая занимается бизнес-транзакциями с рыбаками.

Это был единственный признак жизни в курганах.

Рабочие по очереди поднимали карпа за хвост и бросали его в одну из стоявших на земле ванн, выстланных тяжелым пластиком и заполненных примерно двумя футами ледяной крошки на дне. Рыба разделена по видам и по двум классам качества – А и Б.

Рыбаки стояли и смотрели.

«(Кооператив) изменил все», — сказал Харпер. «Как нам платят. Как мы работаем. Теперь мы пойдем домой пораньше».

В зависимости от рыбы рыбаки получают от 10 до 20 центов за фунт. Во многих случаях государство выплачивает дополнительную субсидию в размере 10 центов за фунт. Меньший улов в 5000 фунтов может принести 1000 долларов в день; за большой улов в 20 000 фунтов можно было заплатить 4 000 долларов. Они выплачиваются каждую пятницу и получат чек на дивиденды в конце года.

Преимущества кооператива не ограничиваются деньгами.Рабочий день от 14 до 16 часов теперь больше похож на 10. Они ловят рыбу только четыре дня в неделю. Рыбакам больше не нужно доставлять свою рыбу на один из немногих перерабатывающих заводов в течение нескольких часов от бассейна Пеории. Теперь они разгружаются в Sorce, где рыба лежит на льду примерно до 5 часов утра, после чего ее грузовиками отправляют на перерабатывающие заводы.

Рыба, признанная пригодной для употребления в пищу человеком, поступает в основном в компанию Thomson; неподходящие отправляются в Бердстаун, где их измельчают для использования в качестве удобрения. Не имея собственной промышленной машины для производства льда, Сорс отвозит замороженную рыбу на перерабатывающие предприятия, а грузовики возвращаются заполненными льдом для использования в конце дня рыбалки.

В конце концов, Колдун хочет переработать рыбу в кооперативе Восточной Пеории. С сотнями тысяч долларов, вложенными в бизнес, он ищет помощь от государства, чтобы купить две машины для производства льда весом 15 000 фунтов. Лед — ключ к расширению его деятельности.

«Штат помогает закупить льдогенераторы», — сказал Каллахан. «Насколько я понимаю, мы намного ближе к достижению этой цели».

Инженер Джаред Фогель вырос в Бартонвилле, но переехал в Сан-Франциско, где работал в Underwriter Laboratories, взламывая компьютерные системы автомобилей, чтобы помочь автомобильным компаниям разрабатывать защищенные от взлома автомобили.Он связался с Sorce, прочитав о его планах выращивать и продавать марихуану в Восточной Пеории. Теперь он работает на него. Его титул, неофициально, «волшебник».

«Сейчас мы едва окупаемся в этой операции», — сказал недавно Фогель. «Мы должны оплачивать счета за воду и электричество и покрывать все другие расходы, но пока мы не откроем часть бизнеса по переработке (рыбы), нам будет трудно зарабатывать деньги».

Склад Sorce намного больше, чем гараж, в котором Стив Джобс высидел Apple, но предприятие по выращиванию марихуаны и азиатского карпа пахнет единственным в своем роде предпринимательским предприятием.

«Рой работает без остановок», — сказал Фогель в зале заседаний на втором этаже офиса на подъездной дороге, параллельной Иллинойсскому шоссе 116 в Ист-Пеории. «Он никогда ничего не оставляет наполовину. Он — причина, по которой мы идем по этому пути».

В команду менеджеров вошли шесть новых сотрудников. Перерабатывающий завод обеспечит 20-25 рабочих мест с полной занятостью.

«Рой делает это по всем правильным причинам, — сказал Каллахан. «Да, для него это бизнес, но он также удовлетворяет потребности государства и вносит свой вклад в решение крупной проблемы»

Колдун очень хочет начать переработку рыбы на месте.Его видение состоит в том, чтобы создать модельную операцию, которой могут следовать другие. Следующим большим препятствием будет маркетинговая кампания, направленная на то, чтобы убедить скептически настроенную общественность в том, что перемолотая плоть пресловутой прыгучей рыбы — слишком костлявая для филе — совершит прыжок с поверхности реки на обеденную тарелку.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *