Активатор клева fishhungry отзывы: развод или нет, купить, отзывы, состав

Satom.ru – Страница не найдена

Россия

Абакан, Александров, Альметьевск, Анапа, Ангарск, Арзамас, Армавир, Архангельск, Астрахань, Ачинск, Балаково, Балашиха, Барнаул, Батайск, Белгород, Бердск, Березники, Бийск, Благовещенск, Борисоглебск, Братск, Брянск, Великий Новгород, Владивосток, Владикавказ, Владимир, Волгоград, Волгодонск, Волжский, Вологда, Воронеж, Воскресенск, Воткинск, Выборг, Выкса, Вязьма, Гатчина, Глазов, Горно-Алтайск, Грозный, Губкин, Дзержинск, Димитровград, Долгопрудный, Домодедово, Дубна, Евпатория, Екатеринбург, Ессентуки, Железногорск, Железнодорожный, Жуковский, Златоуст, Иваново, Ижевск, Иркутск, Ишим, Йошкар-Ола, Казань, Калининград, Калуга, Каменск-Уральский, Каменск-Шахтинский, Камышин, Канск, Кашира, Кемерово, Керчь, Кинешма, Киров, Кисловодск, Ковров, Коломна, Комсомольск-на-Амуре, Копейск, Королёв, Кострома, Красногорск, Краснодар, Красноярск, Крым, Кстово, Кузнецк, Курган, Курск, Липецк, Люберцы, Магадан, Магнитогорск, Майкоп, Махачкала, Миасс, Минеральные Воды, Михнево, Мичуринск, Москва, Мурманск, Муром, Мытищи, Набережные Челны, Нальчик, Находка, Невинномысск, Нефтекамск, Нефтеюганск, Нижневартовск, Нижнекамск, Нижний Новгород, Нижний Тагил, Новокузнецк, Новомосковск, Новороссийск, Новосибирск, Новочеркасск, Ногинск, Обнинск, Одинцово, Ожерелье, Озеры, Октябрьский, Омск, Орёл, Оренбург, Орехово-Зуево, Орск, Пенза, Первоуральск, Пермь, Петрозаводск, Петропавловск-Камчатский, Подольск, Прокопьевск, Псков, Пушкино, Пятигорск, Ржев, Россия, Россошь, Ростов-на-Дону, Рубцовск, Рыбинск, Рязань, Салават, Салехард, Самара, Санкт-Петербург, Саранск, Сарапул, Саратов, Саров, Севастополь, Северодвинск, Сергиев Посад, Серпухов, Симферополь, Смоленск, Сочи, Ставрополь, Старый Оскол, Стерлитамак, Ступино, Сургут, Сызрань, Сыктывкар, Таганрог, Тамбов, Тверь, Тихвин, Тобольск, Тольятти, Томск, Туапсе, Тула, Тюмень, Улан-Удэ, Ульяновск, Уссурийск, Уфа, Ухта, Феодосия, Хабаровск, Ханты-Мансийск, Хасавюрт, Химки, Чебоксары, Челябинск, Череповец, Черкесск, Чита, Шахты, Щёлково, Электросталь, Элиста, Энгельс, Южно-Сахалинск, Якутск, Ялта, Ярославль

Активатор клева FishHungry голодная рыба отзывы

Активатор клева FishHungry голодная рыба отзывы

Приготовить активатор клева, Приманка для сома летом, Какой цвет силиконовых приманок предпочитает щука, Топ лучших силиконовых приманок на судака, Супер приманка для рыбы Fish Hungry, Активатор роста волос фолликапил купить в москва, Ловля окуня на джиг приманки, Приманки на окуня весной, Приманка для леща на фидер, Золотой шелк активатор волос купить, Состав активаторов клева.


Активатор клева на карпа с феромонами самок, Dry blooder разоблачения com
Приманка для рыбы мандула
Ива 2 активатор воды купить
Fish Hungry купить в Ярославле
Fish Hungry купить в Калининграде



Активатор клева рыбы Fishhungry – отзывы. Рекомендуют 0%. Эффективность. Здравствуйте уважаемые рыбаки. В нашем деле всякое бывает, хочется много рыбы наловить, особенно когда возвращаешься домой с десятком карасей в ладошку. Попался мне как-то под руку сайт, а на нем, ну не поверите, все твердят. Читать весь отзыв Отзыв рекомендуют:147 6. Действительно ли активатор клева Fish Hungry работает? Скажу честно, я не удержался и заказал себе попробовать. Реальные отзывы рыбаков. Сейчас наверно каждый рыболов задается вопросом: действительно ли активатор клева Fish Hungry работает или это все рекламные уловки, чтобы обмануть и продать, как можно больше? Скажу честно, я не удержался и заказал себе попробовать. Не так уж и дорого, бывает тратишь намного больше на всякие прикормки и аттрактанты, да еще и домой без рыбы приезжаешь. Лохотрон с активатором клёва Fish Hungry – Голодная рыба. Схема агрессивного маркетинга пустышки. Почему не стоит покупать этот ложный аттрактант. Активатор клёва Fish Hungry – развод или правда. На сайтах, где рекламируется приманка, расписывается, что активатор клева голодная рыба является аттрактантом, который был создан для выкорма рыбы в хозяйствах, занимающихся искусственным разведением. На сайте продавца размещены различные заманухи – якобы правдивые отзывы, фото, видео, рекомендации специалистов, условия скидок и распродаж. Вы – особенный, и именно вам сейчас положены особые условия продажи. Разберемся подробнее во всех нюансах обмана. Активатор FishHungry пробовал несколько раз Полный развод, с этим активатором рыба вообще не ловилась ,пробовали добавить в прикормку и окунали блесна , живца ,нет поклевки Дорогие рыбаки не верьте громкой рекламе 0. Про активаторы клева с феромонами скажу так – развод рыболовов начинали еще в 90х годах. Можно воздействовать на вкусовые и обонятельные рецепторы мирной рыбы ( сарога, язь, карась, елец. т.д), но это вкусовые добавки к насадке и прикорму. При чем тут феромоны, выделяемые рыбой?. Полный развод.Брал в этом году. написал отзыв на ихнем сайте.Сразу удалили.Нелукайтесь и говорите людям.Брал по акции 399гр сейчас акция 299 гр.40лет рыбацого стажу.Всем удачи. 0. Евгений. Активатор клева Fish Hungry для летней и зимней рыбалки должен привлекать рыбу даже с больших расстояний и обеспечивать клёв вызывая аппетит у рыбы. Главный принцип действия средства заключается в обостренном чувстве голода, возникающем под воздействием синтезированных феромонов и концентрированных эфирных масел. Одной упаковки товара должно хватить на пять применений. Чтобы увеличить картинку (фото) — нажмите на неё. Посмотрите видео, обзор или отзыв. Но так ли все обстоит на самом деле? Читайте отзывы о Фиш Хангри и комментарии реальных покупателей! Подробный обзор активатора клева Fishhungry голодная рыба отзывы и видео. Ссылка на официальный сайт производителя где можно купить оригинальную приманку 100%. Активатор клева Fish Hungry развод или нет. Где купить оригинал? Реальные отзывы Fishhungry. Принцип действия. Главная задача аттрактанта – привлечение добычи к месту рыбалки. Мол действует на рыбу молниеносно и она дуреет, начинает клевать как бешененая. Отзывы пожалуйста! По сути только не засирая ветку. 103 1804. пока лучший активатор клева это английский на основе феромонов. просто капни на крючок но сильно воняяет и не нужно откырывть в помещении- воняет тухлой креветкой. одно ампулы хватает на сезон чем больше рыбатам плавает тем она голоднее- добавлен активатор клева как в пепси и чипсы. 6. B288318. 24 марта 2019 06:39. 24 марта 2019 06:39. Отсюда вопрос- а чего же в соседней теме лохи друзья Припая без рыбы остались? Китаец. 24 марта 2019 04:27. Реальные отзывы и видео о нашумевшем активаторе клева FishHungry (голодная рыба). Расскажем всю правду и приведем доказательства очередной утки. Что такое Fishhungry? Активатор клева ФишХангри активно рекламируется на рыболовных сайтах. Производители утверждают, революционная разработка вызывает у рыбы зверский аппетит и заставляет ее с удвоенной и даже утроенной силой искать корм. Но так ли это на самом деле? Как работает аттрактант? В состав Fishhungry входят биологически активные вещества — феромоны. Они обладают уникальной способностью влиять на поведение, обмен веществ, эмоциональное и физиологическое состояние живых организмов.

Приманка для рыбы мандула Активатор клева FishHungry голодная рыба отзывы

Активатор клева на карпа с феромонами самок
Dry blooder разоблачения com
Приманка для рыбы мандула
Ива 2 активатор воды купить
Fish Hungry купить в Ярославле
Fish Hungry купить в Калининграде
Лучшая приманка на карася весной
Силиконовые приманки на сома


Купить приманки для ловли щуки
Приманка для рыбы 7

Активатор клева FishHungry голодная рыба отзывы Ива 2 активатор воды купить

Лучшая приманка на карася весной
Силиконовые приманки на сома
Купить приманки для ловли щуки
Приманка для рыбы 7
Фиш хангри купить
Активатор сжигания жира lipromix липосакция купить

Где в Рубцовске купить Fish Hungry, Имедин активатор загара купить, Приманка на щуку 10 лучших, Где в Оренбурге купить Fish Hungry, Силикон приманки на судака форум 2019, Приманка для рыбы 6 букв сканворд, Какая приманка нужна для карася, Ап 1 активатор воды купить в спб, Приманки на щуку летом на спиннинг ультралайт, Виды силиконовых приманок на щуку, Активатор клева спец конопля отзывы. Являюсь владельцем магазина рыболовных снастей и принадлежностей для рыбалки. Как только появилась новинка Fish Hungry, стал изучать, что к чему. Хочу отметить, что производитель внушает доверие: итальянская марка уже давно зарекомендовала себя на рынке товаров рыболовства. Состав абсолютно безопасен и безвреден, но просто удивительно эффективен! Упаковка удобная и экономичная. Применять прикорм сможет даже неопытный рыболов, а результаты рыбалки удивят не только вас, но и ваших близких. Проверено мной и моими постоянными покупателями. Купить активатор в самаре, Активаторы клева купить интернет магазине, Приманка на карася своими руками, Приманка для рыбы цена, Ловля карася приманки видео, Приманка для щуки на спиннинг, Лучшие приманки на щуку в мае, Fish Hungry купить в Вологде, Fish Hungry купить в Нефтекамске, Как сделать активатор клева в домашних условиях, Где в Кемерово купить Fish Hungry.


Активатор клева голодная рыба отзывы

Активатор клева голодная рыба отзывы

Крупные приманки на щуку которые работают, Какую приманку использовать для ловли щуки, Приманка для ловли карася на поплавочную удочку, Где в Нижнем Тагиле купить Fish Hungry, Активатор воды мелеста купить, Akfix активатор купить, Браконьеры выловили рыбу на запрещенную приманку, Какая самая уловистая приманка на карася, Мягкие приманки на судака рейтинг, Названия приманок на щуку, Активатор двери купить в спб.


Приманка для рыбы какую использовать, Светящаяся приманка для рыбы
Купить активатор в минске
Какие приманки для ловли судака
Лучшие цвета силиконовых приманок на щуку
Где в Бийске купить Fish Hungry



Активатор клева рыбы Fishhungry – отзывы. Рекомендуют 0%. Эффективность. Здравствуйте уважаемые рыбаки. В нашем деле всякое бывает, хочется много рыбы наловить, особенно когда возвращаешься домой с десятком карасей в ладошку. Попался мне как-то под руку сайт, а на нем, ну не поверите, все твердят. Читать весь отзыв Отзыв рекомендуют:147 6. Действительно ли активатор клева Fish Hungry работает? Скажу честно, я не удержался и заказал себе попробовать. Реальные отзывы рыбаков. Сейчас наверно каждый рыболов задается вопросом: действительно ли активатор клева Fish Hungry работает или это все рекламные уловки, чтобы обмануть и продать, как можно больше? Скажу честно, я не удержался и заказал себе попробовать. Не так уж и дорого, бывает тратишь намного больше на всякие прикормки и аттрактанты, да еще и домой без рыбы приезжаешь. Понятно конечно, что главное это не рыба, а сам процесс рыбалки, отдых на природе, но все же намного приятней, когда этот отдых сопровождается неимоверным клевом! Про активаторы клева с феромонами скажу так – развод рыболовов начинали еще в 90х годах. Можно воздействовать на вкусовые и обонятельные рецепторы мирной рыбы ( сарога, язь, карась, елец.т.д), но это вкусовые добавки к насадке и прикорму. При чем тут феромоны, выделяемые рыбой?. Что-то сомнения взяли, столько рекламы и все отзывы подставные. Вот про ультрабайт слышал давно, но нигде не мог его найти. 2 недели назад заходил на этот форум и увидел ссылку на магазин. 7 декабря 2015. Пользовался активатором Голодная рыба – полный развод. В пакетиках расфасовано несколько грамм анисового масла по цене черной икры. В аптеке это масло стоит копейки. Лохотрон с активатором клёва Fish Hungry – Голодная рыба. Схема агрессивного маркетинга пустышки. Почему не стоит покупать этот ложный аттрактант. На сайтах, где рекламируется приманка, расписывается, что активатор клева голодная рыба является аттрактантом, который был создан для выкорма рыбы в хозяйствах, занимающихся искусственным разведением. Якобы, он заставляет даже хищную рыбу питаться растительным комбикормом. Настоящие отзывы можно найти, покопавшись в глубинах рыболовных сайтов, у людей, клюнувших на эти происки маркетинга. И эти отзывы всегда негативные. Фиш Хангри – лишь одна из рекламируемых пустышек. Активатор клева Fish Hungry для летней и зимней рыбалки должен привлекать рыбу даже с больших расстояний и обеспечивать клёв вызывая аппетит у рыбы. Главный принцип действия средства заключается в обостренном чувстве голода, возникающем под воздействием синтезированных феромонов и концентрированных эфирных масел. Одной упаковки товара должно хватить на пять применений. Чтобы увеличить картинку (фото) — нажмите на неё. Посмотрите видео, обзор или отзыв. Но так ли все обстоит на самом деле? Читайте отзывы о Фиш Хангри и комментарии реальных покупателей! Подробный обзор активатора клева Fishhungry голодная рыба отзывы и видео. Ссылка на официальный сайт производителя где можно купить оригинальную приманку 100%. Активатор клева Fish Hungry развод или нет. Где купить оригинал? Реальные отзывы Fishhungry. Принцип действия. Главная задача аттрактанта – привлечение добычи к месту рыбалки. Что такое активатор клёва Fish hungry, как его использовать. Развод это или нет: реальные отзывы рыбаков и где его можно купить. Любая рыба: голодная или сытая, мирная или хищная, морская или пресноводная, большая или маленькая, все без исключения при нахождении в области распространения активатора Fish Hungry подвергаются его воздействию. Инструкция по применению. Чтобы довольствоваться хорошим уловом, важно знать, как правильно применять средство. Способ применения активатора клева Fish Hungry зависит от вида рыбы, поэтому его можно использовать разнообразными способами. На каждой упаковке находится подробная инструкция по приготовлению. Активатор клева FishHungry. Страница отзывов. Александр КержаковОбновлено: 17.03.2019. В закладки ↑. 02.10.2015 / 23 Отзывы / Рубрика: приманки, насадки, прикормка / Автор: Администратор. Сейчас наверно каждый рыболов задается вопросом: Действительно ли активатор клева FishHungry работает? Или это все рекламные уловки, чтобы обмануть и продать, как можно больше ? Скажу честно, я не удержался и заказал себе попробовать. Также производитель уверяет, что FishHungry работает не только на белую рыбу, но и на хищника. Вот это уже интересно!!! В вконтакте в группе не так давно кто-то уже упоминал про ловлю спиннингом с использованием активатора клева — говоря, что клев как из пулемета. Мол действует на рыбу молниеносно и она дуреет, начинает клевать как бешененая. Отзывы пожалуйста! По сути только не засирая ветку. 103 1804. пока лучший активатор клева это английский на основе феромонов. просто капни на крючок но сильно воняяет и не нужно откырывть в помещении- воняет тухлой креветкой. одно ампулы хватает на сезон чем больше рыбатам плавает тем она голоднее- добавлен активатор клева как в пепси и чипсы. 6. B288318. 24 марта 2019 06:39. 24 марта 2019 06:39. Отсюда вопрос- а чего же в соседней теме лохи друзья Припая без рыбы остались? Китаец. 24 марта 2019 04:27.

Купить активатор в минске Активатор клева голодная рыба отзывы

Приманка для рыбы какую использовать
Светящаяся приманка для рыбы
Купить активатор в минске
Какие приманки для ловли судака
Лучшие цвета силиконовых приманок на щуку
Где в Бийске купить Fish Hungry
Dry blooder активатор отзывы
Топ приманок на щуку 2019


Какой активатор клева лучше
Искусственная приманка для рыбы 8

Активатор клева голодная рыба отзывы Какие приманки для ловли судака

Dry blooder активатор отзывы
Топ приманок на щуку 2019
Какой активатор клева лучше
Искусственная приманка для рыбы 8
Какая приманка лучше на карпа
Dry blooder купить красноярск vesa 200

Применение активатора клёва простое, оно не требует сложных действий, его обыкновенным способом добавляют в прикормку. Состав смесей, которые вы используете для прикорма рыбы не нужно менять. Если вы привыкли варить каши из пшеницы или крупы, и уверены в том, что для рыбы именно эта пища интересна, то продолжайте их готовить. Если вы брали с собой проваренные картофельные очистки и другие кулинарные отходы, то для приготовления прикормки с приманкой годятся и они. То есть, вам не нужно менять своих привычек, все ваши предпочтения останутся такими же, как были. Можно использовать многокомпонентные каши, самодельные составы, покупные смеси — разницы нет. Любая из них с активатором в составе будет привлекать рыбу и рыбалка будет настоящей, когда замирает сердце от того, что вы чувствуете на крючке увесистую рыбину. Приманка для рыбы своими руками рецепты, Топ 10 приманок на окуня, Щука ловля джиг приманки, Лучшие приманки на окуня видео, Приманка для карася из манки с чесноком, Приманка для карпа, Активатор замка ваз купить, Какие приманки лучше для ловли щуки, Приманка из гороха и манки на карася, Приманка для рыб Fish Hungry, Приманка для рыбы фиш хангри. Самая лучшая приманка на щуку, Приманка для рыбы сканворд 6, Активатор клева на научной основе для карпа, Активатор ап 1 купить, Электронная приманка для рыбы супер клев отзывы, Приманка на судака мандула, Звуковая приманка для рыбы скачать, Приманки на окуня в рыбацкой барахолке, Вд 40 как приманка для рыбы отзывы, Универсальная приманка для ловли рыбы, Приманка для рыб фишмагнит отзывы.


Активатор клева fishhungry развод или нет отзывы

Активатор клева fishhungry развод или нет отзывы

Поисковые запросы:
Ловля карася на поплавок 2018, купить Активатор клева fishhungry развод или нет отзывы, Ловля карпа в высокой траве.

Ловля карася на рис, Ловля карася в оренбурге, Как правильно твичить при ловле щуки, Секрет ловли крупного карася, Ловля карася на торфяных карьерах

Секрет ловли крупного карася Следовательно, активатор клева Fishhungry – развод для наивных любителей легкой ловли. Fishhungry: развод или нет. Никогда всякой химией не пользовался. otvet.mail.ru/answer/1783465726 ЧИТАЙ Тоже приобретал парочку активаторов, так и не пользовался так как нет надобности просто Без. Обзор активатора клева FishHungry — развод или нет? В сети распространено много различных отзывов об активаторе клёва FishHungry, включая отрицательные. Активатор FishHungry пробовал несколько раз Если клёва нет, или он очень вялый, рыбку не заставишь клевать активней хвалёным атрактантом. В данном видео я сделал настоящий отзыв о таком товаре как активатор клева fishhungry или попросту по русски фиш хангри. Развод нашего брата. Сейчас с применениям этого прибора можно провести эксперимент и посмотреть, работает активатор или нет. попробуем активатор клева fishhungry. Fishhungry: активатор клева отзывы. День добрый, хочу рассказать об активаторе клева Fishhungry и о Но больше вестись на такой развод не буду. и ответить на самый желанный вопрос потенциального покупателя: Активатор клева fishhungry развод или нет, давайте вместе с вами попробуем это выяснить. Активатор клева рыбы Fishhungry отзывы. Сортировать отзывы по: полезности по дате. Ерунда, сон рябой кобылы. Активатор клева FishHungry – описание и отзывы. продукта, я не могу с уверенностью утверждать о том развод это или реально работающая вещь. Fishhungry развод или нет, какие отзывы? Насколько экологически безопасен активатор клёва FISH HUNGRY. Ловля карася на торфяных карьерах Ловля карася на удочку action showtopic Ловля щуки в казахстане

Снасть для ловли карася thread
Виды оснасток для ловли карпа
Ловля щуки в красногорске на плотине платно
Ловля карася на поплавок 2018
Ловля карпа в высокой траве
Ловля карася на рис
Ловля карася в оренбурге
Как правильно твичить при ловле щуки

Поехал с другом на рыбалку. Друг – не рыболов, но захотел выбраться на реку со мной. Хотелось впечатлить его, хотелось, чтобы ему понравилась рыбалка и он остался доволен. Я вспомнил рекламу FishHungry и решил купить его, чтобы попробовать. Рыбалка удалась на славу, оба отловились на отлично, а друг теперь считает меня рыболовным гуру, думает, что я могу обеспечить хороший клев как по заказу. Фиш Хангри можно использовать как летом, так и зимой. Это является одной из особенностей продукта, которые делают его максимально универсальным, позволяя применять в самых разных условиях. В то же время хорошо известно, что поведение рыбы в разные времена года значительно отличается, поэтому ароматизаторы и аттрактанты также имеют разный эффект. Вывод достаточно прост – если покупать Фиш Хангри у проверенных официальных продавцов, вы убережете себя от подделок и получите удовольствие от отличной рыбалки, которую обеспечит этот активатор клева. Вперед фишхангрить! . Монтаж резинки своими руками . Крючки №10 оптимальный размер для ловли на карася, согласно международной классификации. Резинка для рыбалки — виды и особенности изготовления своими руками. При ловле карася на резинку можно с уверенностью сказать, что успех будет. Продолжаются ограничения на лов рыбы. Перед майскими праздниками мы побывали на рыбалке на искусственном пруду. А нашим гидом стал опытный рыболов Алексей Зайко. Все выпуски программы О Рыбалке Всерьез: playlist?listPLNplhnAJTaYc5746L0MWLFmTrIqwIEl7Z Телепрограмма О РЫБАЛКЕ ВСЕРЬЕЗ (Украина, г. Днепропетровск) выходит в телеэфир с июня 2004 года. Это научнопопулярный, развлекательный и познавательный проект, повествующий о рыболовах и рыбалке, о взаимоотношениях человека и подводных обитателей. Основная идея телепрограммы подробный рассказ о разнообразных способах и методах ловли пресноводных и морских рыб, обо всех аспектах любительского и спортивного рыболовства в Украине и странах зарубежья, ознакомление зрителей с новостями рыболовного мира. Выпуски телепрограммы О РЫБАЛКЕ ВСЕРЬЕЗ адресованы любителям рыбалки от 6 до 90 лет и старше. В простейшем варианте резинка для ловли карася выглядит следующим образом и сделать ее достаточно быстро и несложно. палку или же бросать груз с руки. Как сделать резинку для ловли чехони своими руками 42:23 Victor Pol 4 215 Зрелищные поклёвки крупного карася | Ловля карася. Эту снасть можно собрать и своими руками. В завершении видео, в котором рассказываются некоторые тонкости ловли карася на резинку. Представляем Вашему вниманию видео на тему: как сделать резинку для ловли карася своими руками. Донка на карася – особенности изготовления своими руками. При этом опытные рыбаки советуют для ловли карася использовать плетёную нить, диаметр которой. Как сделать резинку для ловли карасей своими руками? К счастью, это совсем не сложно. Начинать лучше всего с грузила. Как сделать резинку для рыбалки с берега своими руками, техника ловли рыбы. Карась любит все, и в качестве наживки можно использовать хлеб, мамалыгу. Изготовление резинки для рыбалки своими руками. По совету опытных рыбаков количество поводков для ловли карася, не должно превышать 10 штук.

Активатор клева fishhungry развод или нет отзывы

С изобретением активаторов клева в практике рыбной ловли произошел новый качественный сдвиг. Одним из наиболее известных в этой области продуктов на сегодняшний день является FishHungry – итальянский активатор нового поколения. Уникальной эту приманку делает ее двойное действие: приманивая всю окружающую рыбу к одному месту, активатор возбуждает у нее сильный аппетит. Ловля карпа на поплавочную удочку местами более эффективна, Сладкую кукурузу Bonduelle считают лучшей из всех представленных на рынке для ловли карпа. Снасть для ловли карпа на поплавочную удочку. Для ловли карпа я использую пятиметровую маховую удочку со средним строем, оснащённую кольцами. Простейшая в изготовлении снасть для ловли карпа на корочку хлеба представляет собой довольно прочную палку с толстой леской или шнуром, к концу. Супер УЛОВИСТАЯ СНАСТЬ, оснастка для ловли карася и карпа на прикормку. Корейская ЛОВУШКА для ловли КАРПА, КАРАСЯ и другой мирной рыбы. Супер УЛОВИСТАЯ ПРУЖИНА, универсальная. Спасибо за Like и за Подписку на мой канал LeonidTimo Подписаться на канал: goo.gl/hNTm01 Мой blog leonidtimo.blogspot.com.ar/ Мой facebook goo.gl/mti53P Мой instagram goo.gl/uytNDw Мой twitter twitter.com/Leonid_Timo Группа в Контакте Argentina LeonidTimo leonidtimo Мой google goo. gl/vpSXL7. Для ловли карпов весом 12 кг можно Когда найдено перспективное место для ловли, необходимо сделать заброс снасти, отмерить глубину, отметить на леске. Подготовка снастей для ловли карпа на бойлы. Монтаж фидера для поимки карпа. Поплавочная удочка для ловли карпа. Рыболовные снасти для результативной ловли карпа на удочку. Приступаем к подготовке снастей. Удочки с разными снастями для ловли карася и карпа на подледный лов. Отменить подписку на канал Виктор Коробкин. Современные материалы, такие как стекловолокно, композит, углеволокно тоже успели себя хорошо зарекомендовать для снасти на карпа Поэтому ловля карпа —. В связи с этим если рыбалка намечается на водоемах вблизи населенных пунктов, следует выяснить, с какими снастями там Для ловли карпа на крупные. Снасти для ловли карпа, какие бывают? Приобрести снасть на рынке либо в специализированном магазине вряд ли получится, ее нужно будет изготовить. Активатор клева fishhungry развод или нет отзывы. Ловля карася на удочку action showtopic. Отзывы, инструкция по применению, состав и свойства. фиш хангри как пользоваться. фиш хангри отзывы рыбаков. фиш хангри купить в киеве. фиш хангри отрицательные отзывы. Фиш хангри как отличить подделку. В одной упаковке 5 ампул по 5 мл. Чтобы заказать активатор клева. отзывы рыбаков о фиш хангри. Максимальная мощность: 1,8 (2,5) кВт (л магазин активфиш для охотников, туристов и людей. Всего лишь примените 1 ампулу в прикормку, опустите в воду и проголодавшаяся рыба начнёт бросаться на то что Вы ей дали. Опасайтесь подделок. С приманкой FishHungry Вы поймаете намного больше чем можете себе представить! Опасайтесь подделок. Просто употребите 1 ампулу в прикормку, окуните в воду и голодная рыба начнёт бросаться на то что Вы ей предложите. Опасайтесь подделок. Просто употребите 1 ампулу в прикормку, окуните в воду и С приманкой FishHungry Вы поймаете больше чем можете себе представить! Опасайтесь подделок. Просто примените 1 ампулу в прикормку, окуните в воду и С приманкой FishHungry Вы поймаете больше чем могли себе представить! Опасайтесь подделок. Фиш Хангри совершенно новый продукт в рыболовном мире, но уже сейчас ему ставят высокие Активатор Клева Fish Hungry Оригинал 2:52. Активатор клева фиш хангри приманка из америки из чего состоит инструкция как отличить подделку прикормка купить с доставкой адреса магазинов Москва.

активатор клева отзывы рыбаков fishhungry голодная рыба

активатор клева отзывы рыбаков fishhungry голодная рыба

Ключевые слова:
фото приманки для рыб, купить активатор клева отзывы рыбаков fishhungry голодная рыба, новая прикормка для рыбы.

активатор клева отзывы рыбаков fishhungry голодная рыба


виды приманок для рыбалки, как приготовить прикормку для белой рыбы, крупа для прикормки рыбы, тасманский дьявол приманка на рыбу, приманка для рыбы из манки

мегамикс активатор клева

тасманский дьявол приманка на рыбу Реальные отзывы рыбаков о голодной рыбе. А со стороны берега набросали вдоль сети перловки, замешанной с активатором клева FishHungry. Никогда всякой химией не пользовался. otvet.mail.ru answer 1783465726 ЧИТАЙ Тоже приобретал парочку активаторов, так и не пользовался так как нет надобности просто Без. А как быть начинающим рыбакам, которые хотят уже с первой Стоимость упаковки такого средства, как активатор клева Fishhungry ( Голодная рыба ), отзывы. В данном видео я сделал настоящий отзыв о таком товаре как активатор клева fishhungry или попросту по Ловля карася на Fishhungry Активатор клева рыбы. Активатор клева рыбы Fishhungry отзывы. Мой друг так сказать рыбак любитель и снасти у него такие себе примитивные. Активатор клёва FishHungry (голодная рыба). но судя по отзывам уважаемых рыбаков ТОООЧНО НЕ ФИШХАНГРИ. Реальные отзывы рыбаков о FishHungry. Где можно купить Голодную рыбу и ее цена? Для какой рыбы предназначается активатор клева. Приманки и прикормки для рыбалки Активатор клева FishHungry – описание и отзывы. Ну купил я активатор клева Голодной рыбы в магазине оригинал, как я. Fishhungry: активатор клева отзывы. Купил приманку Голодная рыба в местном магазине для туристов. Обзор активатора клева Fishhungry (приманка, атрактат и прикормка). Одно из лучших средств для повышения клева и увеличения улова. Мы расскажем вам о составе, ингредиентах, отзывах реальных рыбаков. А я в самый первый раз испытал этот восторг, и больше без активатора голодная рыба ловить не Поэтому для наших рыбаков FishHungry активатор является. приманка для рыбы из манки рыбалка рыболовные приманки рыбалка приманка для рыбы

электро приманка рыбы
мегамикс активатор клева
приманка для рыбы супер клев отзывы цена
фото приманки для рыб
новая прикормка для рыбы
виды приманок для рыбалки
как приготовить прикормку для белой рыбы
крупа для прикормки рыбы

Активный клев рыбы при любых погодных условиях и в любом водоеме обеспечивается воздействием на инстинкты рыбы на физиологическом уровне. Растворяясь в воде активатор выделяет феромоны, и рыба на инстинктивном уровне начинает активно поглощать их источник. Разработанные научнопроизводственной лабораторией ЛТД ФишингБай в 2015 году специфические биовещества, входящие в состав активатора клева Dynamite Effect, воздействуя на мозг рыбы вызывают сильное возбуждение реакций стадности, кормления и самосохранения. Чтобы добиться максимального эффекта, не стоит препарат выливать просто в воду, его необходимо добавлять в прикормку. В течение 30 минут проявляется эффект от использования средства. Препарат не наносит вреда ни рыбе, ни окружающей среде, он просто стимулирует ее аппетит. C активатором клева FishHungry (фишьхангри, голодная рыба) больше никогда не допустите даже мысли о том, что ваша рыбалка может не состояться. Голодная рыба FishHungry активатор клева купить фиш хангри прикормка эффективная Активатор Клева Fish Hungry Оригинал 2:52 Алексей. Так что же представляет собой активатор клева Fishhungry ( Голодная рыба ) – высокоэффективный продукт работы ученых или уловка для выуживания денег. Вы главное ищите оригинал, подделок очень много. А со стороны берега набросали вдоль сети перловки, замешанной с активатором клева FishHungry. Приманки и прикормки для рыбалки Активатор клева FishHungry – описание и Ну купил я активатор клева Голодной рыбы в магазине оригинал, как я. Оригинальный активатор клева Fishhungry, что в переводе означает голодная рыба. Используется как на хищника, так и на мирную рыбу. Многие современные заядлые рыбаки для того, чтобы получить действительно большой улов, используют такое средство, как активатор клева Fishhungry. Но, остановилась именно на нашумевшем активаторе клева FishHungry, который является уникальным по своей сути. При правильном подходе, соблюдению инструкции по применению, активатор клева FishHungry работает в точности так, как обещают производители. Активатор клева Fishhungry – ваш билет на самую удачную рыбалку, будь она любительской или спортивной.

активатор клева отзывы рыбаков fishhungry голодная рыба

приманка для рыбы супер клев отзывы цена

Благодаря сотрудничеству исследователей получилось сделать истинно эффективное средство, которое способно обеспечить огромный улов. Комбинация феромонов и альбумина (это и есть сухая кровь) позволили получить комплекс веществ, усиливающих действие друг друга. Искусственная приманка для рыбы, разновидность блесны 8 букв сканворд. Искусственная приманка для рыбы, разновидность блесны. Искусственная приманка для рыбы, 8 букв, сканворд. Искусственная приманка для рыбы, 8 букв. Первая буква — М, вторая буква — О, третья буква — Р. Поиск по определению приманка для рыбы, поиск по маске омк, помощник кроссвордиста, разгадывание сканвордов и кроссвордов онлайн, словарь кроссвордиста. искусственная приманка для рыбы — 8 (восемь) букв. Искусственная приманка для рыбы, разновидность блесны. Реакционное учение об улучшении биологической природы человека. Искусственная приманка для рыбы, разновидность блесны. Искусственная приманка для рыбы, 8 букв, 4 буква М, сканворд. Если Вы не знаете слово из кроссворда или сканворда, то наш сайт поможет Вам найти самые. Искусственная приманка для рыбы каплеобразной формы, обычно отливаемая из свинца. Искусственная приманка для рыбы, разновидность блесны. Найти синоним к слову мормышка. Искусственная приманка для рыбы состоит из 8 букв. Искусственная приманка для рыбы. Искусственная приманка для рыбы. 1я буква М; 2я буква О; 3я буква Р; 4я буква М; 5я буква Ы; 6я буква Ш; 7я буква К; 8я буква. активатор клева отзывы рыбаков fishhungry голодная рыба. рыбалка рыболовные приманки. Отзывы, инструкция по применению, состав и свойства. Новый активатор клёва FishHungry в Новочебоксарске вкорне изменил отношение к рыбалке многих мужчин оказалось, что ловить рыбу с активатором клёва. В своем видео о fishhungry (фиш хангри), я разобрал каждую деталь каждое фото и тех людей, которые продают данный активатор клева, который они так же. Следовательно, активатор клева Fishhungry – развод для наивных любителей легкой ловли. Тут как нельзя кстати и выражение: Без труда не выловишь. Для разных рыб используются различные по составу активаторы клева, первым будет рассмотрен процесс приготовления средства, который предназначен для. Активатор клева Fishhungry – ваш билет на самую удачную рыбалку, будь она любительской или спортивной. Самый лучший активатор клева продается в специальных металлизированных, герметичных пакетах, которые позволяют сохранить свойства веществ. Последний раз приобретали электронный активатор клёва, как пояснил продавец, что воздействие осуществляется за счёт вибраций, вроде как импульсы. Разработанные научнопроизводственной лабораторией ЛТД ФишингБай в 2018 году специфические биовещества, входящие в состав активатора клева Mega Mix. Вы можете купить эффективный и проверенный нами и многими рыболовами активатор клева по приемлемым ценам в нашем магазине. Многие профессионалы и спортсмены рекомендуют использовать активаторы клёва. Активаторы (аттрактанты) – это добавки к полноценному корму, которые.

Fish Hungry отзывы

Fish Hungry отзывы

Какие приманки на какую рыбу, Fish Hungry купить в Абакане, Активатор клева форум, Купить активатор Fish Hungry, Fish Hungry купить в Королёве, Купить клевые носки, Fish Hungry отзывы, Самара купить салфетка 3м активатор адгезии, Какую приманку любит карп, Приманка бокоплав на судака, Топ силиконовых приманок на щуку.


Искусственная приманка на сома, Активаторы сим купить
Геркулес приманка для рыбы
Джиг приманки весной на щуку
Сайт фиш хангри
Активатор клева сухая кровь отзывы



Активатор клева рыбы Fishhungry – отзывы. Рекомендуют 0%. Эффективность. Еще в прошлом году мне подарили упаковку активатора клева Fishhungry. Полиэтиленовая упаковка в которой было 5 отдельных стикеров с добавкой была довольно качественно упакована. На первой же рыбалке я распечатал один стик и растворил его. Активатор клева Fish Hungry для летней и зимней рыбалки должен привлекать рыбу даже с больших расстояний и обеспечивать клёв вызывая аппетит у рыбы. Главный принцип действия средства заключается в обостренном чувстве голода, возникающем под воздействием синтезированных феромонов и концентрированных эфирных масел. Одной упаковки товара должно хватить на пять применений. Чтобы увеличить картинку (фото) — нажмите на неё. Посмотрите видео, обзор или отзыв. Лохотрон с активатором клёва Fish Hungry – Голодная рыба. Схема агрессивного маркетинга пустышки. Почему не стоит покупать этот ложный аттрактант. Разбор лохотрона Активатор клева Fishhungry голодная рыба — не ведитесь на развод. Поднятый в интернете ажиотаж про активатор клева fishhungry постепенно уменьшается. Действительно ли активатор клева Fish Hungry работает? Скажу честно, я не удержался и заказал себе попробовать. Реальные отзывы рыбаков. Сейчас наверно каждый рыболов задается вопросом: действительно ли активатор клева Fish Hungry работает или это все рекламные уловки, чтобы обмануть и продать, как можно больше? Скажу честно, я не удержался и заказал себе попробовать. Активатор клёва Фиш Хангри (Fish Hungry) – прекрасный способ приумножить улов на рыбалке! Этот активатор для прикормки универсален, он привлекает как хищную рыбу, так и остальные виды мирных рыб. Купить и затем применять активатор клёва Фиш Хангри можно при любой погоде и температуре, а значит, он предназначен как для летней, так и для подледной рыбалки. Фиш Хангри может одинаково хорошо работать в любом регионе, в любом водоеме – озере либо реке. Активатор FishHungry пробовал несколько раз Полный развод, с этим активатором рыба вообще не ловилась ,пробовали добавить в прикормку и окунали блесна , живца ,нет поклевки Дорогие рыбаки не верьте громкой рекламе Мы очень рады, что Fish Hungry вам понравился, рады стараться для вас! Продукт действительно замечательный, обращайтесь к нам еще. Мы всегда с удовольствием оформим ваш заказ! Преимущества и недостатки популярного в 2015 году активаторе клева итальянского производства FishHungry. На странице найдете отзывы рыболовов. Активатор клева FishHungry. Страница отзывов. Александр КержаковОбновлено: 17.03.2019. В закладки ↑. 02.10.2015 / 23 Отзывы / Рубрика: приманки, насадки, прикормка / Автор: Администратор. Сейчас наверно каждый рыболов задается вопросом: Действительно ли активатор клева FishHungry работает?

Геркулес приманка для рыбы Fish Hungry отзывы

Искусственная приманка на сома
Активаторы сим купить
Геркулес приманка для рыбы
Джиг приманки весной на щуку
Сайт фиш хангри
Активатор клева сухая кровь отзывы
Лучшие силиконовые приманки на окуня
Где в Магнитогорске купить Fish Hungry


Приманка для большой рыбы
Искусственная приманка для ловли рыбы 6

Fish Hungry отзывы Джиг приманки весной на щуку

Лучшие силиконовые приманки на окуня
Где в Магнитогорске купить Fish Hungry
Приманка для большой рыбы
Искусственная приманка для ловли рыбы 6
Где в Якутске купить Fish Hungry
Электронная приманка для рыбы отзывы

Как и все появляющиеся на рынке новшества, активатор Fish Hungry вызвал неоднозначные мнения как экспертов, так и рыболовов-любителей. Спустя непродолжительное время с момента появления средства на рынке, интернет-пространство запестрило оценкой новинки. Многие утверждали, что это не более чем очередная уловка для доверчивых покупателей и заядлых рыбаков, а некоторые стали отчаянными приверженцами новинки. Основным аргументом со стороны последних стало то, что стоимость средства не так уж и высока, чтобы отказаться от возможности попробовать его и прийти к своему мнению, основанному исключительно на собственном опыте. Звук для приманки рыбы, Приманки на щуку цена, Fish Hungry купить в Белово, Активатор клева FishHungry купить в минске, Троллинг на озерах на крупную щуку приманки, Активатор клева Fish Hungry отзывы, Приманки на судака летом с берега, Где в Хасавюрте купить Fish Hungry, Приманка на красноперку, Активаторы клева в минске, Клев купить. Основная роль в активаторе клева нового поколения отводится искусственным феромонам. Именно эти вещества призваны воздействовать на поведение объектов ловли, вызывая у них чувство голода и собирая их в локальном месте. Продукт включает в себя натуральные ароматизаторы (масло аниса, конопля, чеснок), действующие на обоняние и возбуждающие аппетит. Также в смеси присутствует универсальный корм, подходящий как для морских, так и речных обитателей.


активатор клева отзывы видео

активатор клева отзывы видео

Тэги:
замесить прикормку для рыбы, где купить активатор клева отзывы видео, oxygen активатор клева.

активатор клева отзывы видео


летние прикормки для рыб в сибири, купить активатор клева голодная рыба в екатеринбурге, megamix активатор клева купить в украине, прикормка для рыбы купить оптом, как сварить гороховую приманку для рыбалки

Активатор клева Сыктывкар

прикормка для рыбы купить оптом Активатор клева FishHungry – описание и отзывы. Уж было хотел заказать но к моей удачи наткнулся на ваше видео,огромное вам спасибо за раскрытие явного. Кидалово 100% Развод на деньги и не чего больше !!! клев будет как у белых камней, бери, потом нам расскажешь ! otvet. mail.ru question 182868507 Возможно он и работает. В данном видео я сделал настоящий отзыв о таком товаре как активатор клева fishhungry или попросту по русски фиш хангри. Активатор клева рыбы Fishhungry отзывы. Сортировать отзывы по: полезности по дате. Ерунда, сон рябой кобылы. Второй рассказывает про свой опыт в видеоотзыве: Активатор клева Fish Hungry (Фиш Хангри) — развод. Активатор клева fishhungry отзывы видео купить в Самаре. Активатор клева фиш хунгри отзывы купить в Московской области. Активатор клева fishhungry отзывы видео. Активатор клёва FishHungry (голодная рыба) в нашем магазине: goo.gl fQ0hp6 ОБЕСПЕЧИВАЕТ ДВОЙНОЙ ЭФФЕКТ. Но, остановилась именно на нашумевшем активаторе клева FishHungry, который является уникальным по своей сути. Был ли полезен отзыв. Таким образом, активатор клева Fishhungry, отзывы о котором, правда, противоречивые, заставляет жителей водоемов приплывать с дальних расстояний. Видео обзор Активатор Клёва FishHungry. Отзыв: Активатор Клёва FishHungry Жирный улов обеспечен. Активатор клева фиш хангри отзывы видео приколы смотреть онлайн, скачать видео mp4, webm, xflv, 3gp. как сварить гороховую приманку для рыбалки съедобная приманка для рыбалки резиновая приманка для рыбы

электронная приманка для рыбы своими руками
Активатор клева Сыктывкар
Активатор клева Артём
замесить прикормку для рыбы
oxygen активатор клева
летние прикормки для рыб в сибири
купить активатор клева голодная рыба в екатеринбурге
megamix активатор клева купить в украине

Взрывной эффект на несколько часов. Проверено на нескольких водоемах с разной рыбой. Мирной и хищной. В любой сезон эффективна. Испытана несколько раз для подледного лова. При ловле хищника наживка обмакивается в растворе Динамита с водой. Разводил один пакет на поллитра воды и выдерживал наживку несколько секунд. Работает отменно! Проверено на спиннинг. Щука как обезумела Продукт состоит из пяти металлизированных пакетов, размером 50*70 мм, в каждом из них содержится 5 мл активатора. Они запакованы в фирменную водонепроницаемую упаковку из ПЭ. Металлизированный герметичный пакет позволяет сохранить свойства препарата в первозданном виде. Продукт производится в жидком виде. Одной упаковки на 5-20 раз использования. Активатор заслуженно признан мощнейшим стимулятором улова во всем мире. Активатор клева Dry Blooder – это новый и эффективный активатор, в разработке которого принимали участие европейские ученые и рыболовы со всех стран СНГ. Рыбаки давали советы о предпочтениях рыбы различных видов, а ученые пытались синтезировать вещества, позволяющие заставить рыбу активизироваться. . Супер приманка, тесто для ловли карася, карпа и другой мирной рыбы. Отменить подписку на канал Leonid Timo. Double Fish супер приманка, приманка для ловли рыбы, супер клев. Double Fish супер приманка, приманка для ловли рыбы, супер клев. Самое главное качество Голодной рыбки это его значительная результативность при ловле больших образцов. Приманка для рыбы супер клев Hungry Fish. Червь – навозник (самое лакомство)любимая приманка для ловли карася, хлеб (лучше чёрный) это основное. отличают клев карася от клева любой другой рыбы. Для супер приманки на судака, так же добавлен феромон Описываемая супер приманка просто помещается в предполагаемое место ловли определенного вида рыб. Звук, свет, вибрация и электромагнитный сигнал электронная приманка для рыбы Супер Подходит для зимней и летней рыбалки, для ловли в любых водоемах. Средство Голодная рыба приманка супер клёв она усредняет все эти показатели делая любой день самым лучшим денем, лучшее время для ловли, например. Приманка для ловли рыбы Клёв. Данная электронная приманка для рыбы предназначена, для лова различной рыбы и, для различных водоёмов. Супер клёв электронная приманка для рыбы: отзывы. Например, при ловле донной рыбы приманка может использоваться в качестве основного или. Электронная приманка для рыбы фишмагнит 2 — отзывы. Но учитывая прошлые проколы (в арсенале есть суперножеточка, которая нихрена не точит; вещь.

активатор клева отзывы видео

Активатор клева Артём

Для хищной рыбы активатором обрабатывают естественные или искусственные приманки, после чего ловят рыбу в стандартном режиме. Допускается использование продукта напрямую с живой наживкой. Для чего растворяют пакетик-ампулу в любой воде и на 1-2 секунды опускают туда наживку, после чего ее можно насаживать на крючок. Детальная инструкция присутствует на упаковке препарата. Теперь вы знаете, как сделать прикормку для рыбы своими руками, вооружены 10.07.2018 Ловля щуки в июле: Где ловить щуку, приманки для ловли щуки в июле. Звуковая приманка для рыб своими руками. Лучшая приманка для карася своими руками. Приманка для ловли леща. Как сделать приманку для рыб. Изделия, сделанные своими руками, всегда будут оригинальными и смогут подчеркнуть индивидуальность владельца или владелицы. Как сделать силиконовые приманки на щуку лучшая приманка для рыбы своими руками приманки для ловли. Силиконовые приманки своими руками. Как сделать силиконовые приманки на щуку своими руками. Лучшая приманка для рыбы своими руками. Лучшие силиконовые приманки для ловли на щуку. Как сделать силиконовые приманки в домашних условиях. Как сделать силиконовые приманки в гипсовой форме. Лучшие силиконовые приманки на щуку и судака. Хорошие силиконовые приманки на щуку в домашних условиях. Супер силиконовые приманки на щуку своими руками. Самая лучшая приманка для рыбы своими руками. Силиконовые приманки для ловли хищника. Уловистые силиконовые приманки для ловли щуки. Рыболовные приманки для рыбалки своими руками. Уловистые приманки для рыбалки. Лучшие приманки на судака для рыбы своими руками. Простое изготовление приманок для рыбы своими руками. Силиконовые приманки для спиннинга своими руками. Как сделать формы для силиконовых приманок своими руками. Изготовление силиконовых приманок своими руками в домашних условиях. Литье силиконовых приманок в домашних условиях. Как сделать силиконовые приманки своими руками. Самые уловистые приманки на судака своими руками. Отливка силиконовых приманок своими руками в домашних условиях. Гипсовые формы для литья силиконовых приманок своими руками в домашних условиях. Как отлить силиконовые приманки своими руками. Изготовление приманок для щуки своими руками. Как отлить формы для силиконовых приманок. Интересное изготовление силиконовых приманок. Легкое литье силиконовых приманок. Как залить силиконовые приманки своими руками. Супер отливка силиконовых приманок в формах своими руками. Рыбалка. Самоделки для рыбалки своими руками Идейный Homemade fishing tackle secrets ИДЕИ Александр Идейный Рыбалка Не забудь подписаться – channel UCWZfv87uAgW3i8Si5yvag7A Не забудь про палец вверх! Не забудь оставить свое мнение в комментариях! Я в VK vk.com idejnyj Группа VK vk.com samodelkidljarybalki Я в Facebook: facebook.com profile.php?id=100009714975891 Google+ plus.google.com u 1 b 100343921012035116185 100343921012035116185 posts?pageId=100343921012035116185 Я в Одноклассниках ok.ru profile 565418295361 Группа Одноклассники ok.ru group 52972258787393 Я в Instagram instagram.com idejnyj Я в Tumblr alexanderidejnyj.tumblr.com Email: idejnyj gmail.com Ссылка на это видео youtu.be JDMunJM1OMU Друзья спасибо вам большое за внимание! Friends thank you very much for your attention! Поддержите копейкой качество проекта ! Support penny quality of the project ! Web Money $ Z1498 9554 0537 P – R4141 0169 6875. При этом их оптимальное сочетание приводит к тому, что своими руками создается эффективная прикормка для рыбы. цвет приманки однозначно привлекает. Приготовление приманки для рыбы своими руками – поэтапная инструкция. Электронная приманка – схема и инструкция по изготовлению. Поэтому электронная приманка для рыб своими руками делается многими рыбаками, тем более что и затраты на нее достаточно малы по сравнению со. Если удалось приманить эту рыбу, улов будет значительным, и естественно положительные впечатления от Прикормка для приманки карася своими руками. Как показывает моя практика, при правильно сделанной приманке без рыбы не уйдешь. Прикормка для уклейки своими руками. Изготовление супер приманки для рыбы своими руками в домашних условиях. Лучшие приманки своими руками для рыбалки. Электронная приманка для рыб. Изюминка в том, что для разных видов рыб свои частоты и что там в водоёме плавает поблизости (радиус действия максимум. активатор клева отзывы видео. съедобная приманка для рыбалки. Отзывы, инструкция по применению, состав и свойства. Сначала необходимо сварить 1 ст. перловки до легкого разваривания, затем добавить 2 ст. пшена, 4 упаковки ванильного сахара и немного подсолнечного масла. Прикормка для рыбы своими руками. Рассольник Грибной плов) Отварить перловку почти до готовности. Лук порезать полукольцами, морковку потереть на терке. Шампиньоны мелко порезать или натереть на терке. Обжарить. Если пшено сварено правильно то оно отвечает следующим требованиям: зернышки легко отделяются друг от друга; вся масса имеет вид рассыпчатой крупы. Прикормка для рыбы слишком легкая, изза чего ее сносит течение. Не уверен, что нужны комментарии к этому видеоролику 😉 Несмотря на тему на форуме и давно написанную статью, увидеть процесс своими глазами всетаки, наверное, лучше. В качестве базового рецепта процитирую абзац из статьи: Подписывайтесь на канал salapinru goo.gl 0RYxP5 Плейлист Развлекательное видео goo.gl JG2bTt Плейлист Обучающее рыболовное видео goo.gl buXaUe Плейлист Полнометражное видео goo. gl ybsMKG Для ловли на большой реке, в местах с отсутствием сильного рыболовного пресса, у меня припасен собственный рецепт бюджетной прикормки, привлекательный для крупной рыбы. Прикормку подготавливаю вечером накануне рыбалки. Беру 1 2 части перловки и варю на слабом огне до тех пор, пока крупа не начнет слегка развариваться по краям. После этого всыпаю туда же одну часть пшена. Добавляю немного нерафинированного подсолнечного масла и пакетик ванильного сахара. Как только пшено начнет развариваться, снимаю кастрюлю с огня и сливаю воду. В получившуюся кашу добавляю две части ячневой крупы и столько же кукурузной. Иногда бывает полезно добавить одну или две части любой готовой прикормки известных производителей, предназначенной для ловли в реке или для крупной рыбы. Всю прикормку тщательно перемешиваю. Для не очень сильного течения вполне хватает клейкости сваренной каши. Если ожидается более сильное течение, заливаю кипятком одну часть геркулеса и добавляю порциями, тщательно перемешивая. Также геркулес можно добавить с утра, непосредственно перед ловлей. Смотря на этот рецепт с учетом опыта прожитых с тех пор лет, не вижу какихто радикальных изменений, что, видимо, характеризует его с хорошей стороны. Что касается отклонений от рецепта: в видео вы увидите вместо ванильного сахара ванилин, зато и пакетик гораздо меньше, всего 1,5 грамма. Сухой крупы будет добавлено меньше, ровно потому, что вместо обычной кукурузной крупы у меня под рукой оказалась смесь из самой разной фракции, включая настолько мелкую, что можно сказать мука. Конечно, такая, по сути дела, пыль очень быстро забирает воду и поэтому пропорция чуть меньше. А в целом, существенных изменений или отклонений от основного рецепта, разработанного годы назад, нет. Приятного просмотра! salapin.ru video1346.html. Кашу сварить, добавить 1–2 столовые ложки растительного масла, можно 3–5 капель анисовых, укутать на ночь. Если крупу пересыпать, то каша после остывания станет твердой и малопривлекательной для рыбы. Правильно сваренная каша для рыбалки хорошо насаживается и крепко держится на крючке. Перед приготовлением пищи для рыбы необходимо определиться, для каких целей она будет вариться – для ужения или прикормки. Каши для прикормки. Берешь кастрюлю на 3 кг. Кидаешь 3 стакана пшенки в кастрюлю и заливаешь водой. Кашу сварить, добавить 1–2 столовые ложки растительного масла, можно 3–5 капель анисовых, укутать на ночь. Рецепт прикормки для глубоководных рыб при ловле в стоячей воде: молотые сухари 4 части; толокно 2; молота жмых 1; молота глина 1; мотыль мелкий или рубленые черви 5; опарыш 2. Плотва хорошо берет на пшенную кашу, сваренную вкрутую, хорошо напитанную, как тесто. Наглядные уроки ловли леща, карася, карпа, на пенопласт. Суперснасть ! Вне конкуренции. Как приготовить прикормку для рыб. Собираясь на рыбалку, мало взять с собой хорошую удочку. Знание нужного и рыбного места также не решит всей вашей проблемы. Овсяная каша с успехом обеспечит такой эффект. Как сварить пшено для прикормки рыбы? Широкую популярность среди рыболовов получило пшено или пшенная каша. Ее применяют как прикормку, для ловли различных видов и семейств рыб. Если каша подгорит — то она будет иметь неприятный вкус. В воде ячменная каша будет как прикорм, а горох создаст муть. Универсальная прикормка для рыбы в домашних условиях Учитывая то, что качественная профессиональная прикормка для рыбной ловли стоит достаточно дорого, многие рыболовы.

Двунаправленная сеть для контроля аппетита у личинок рыбок данио

Основные версии:

Хотя эта статья представляет собой интересную историю, обоснование и подходы к экспериментам иногда трудно понять и требуют более подробной информации.

Мы пересмотрели текст, сделав упор на ясность и при необходимости добавив больше деталей. Мы также приложили дополнительный документ (Conceptual_Circuit_Model.pdf), объясняющий нашу общую модель.

Кроме того, они постулируют наличие взаимно тормозящего контура CH, LH (подраздел «Взаимно противоположные гипоталамические сети контролируют аппетит рыбок данио»), но показывают только коррелятивные данные и не проверяют эту гипотезу экспериментально.

Это правда, что ранее мы не проводили целевое возмущение для проверки конкретно взаимно тормозящей схемы. Таким образом, мы попытались решить этот вопрос, используя целенаправленную оптогенетическую активацию cH и одновременную визуализацию кальция, и представили результаты на новом рисунке 5.В частности, мы показываем, что оптогенетическая активация cH с использованием Tg(y333:Gal4;UAS:ReaChR-RFP) вызывает устойчивое ингибирование lLH, но не mLH, в отличие от стимуляции близлежащей контрольной области.

Авторы используют общие термины, такие как «голод», «пищевая депривация», «сытость», «пищевое ожидание», которые могут быть неточными или даже неправильными. В своем базовом экспериментальном плане они постоянно кормят личинок с 5-го по 7-й день, а затем сравнивают реакцию личинок, которым давали избыток парамеции, с личинками, которых лишали пищи всего на 2 часа, а затем снова кормили.Неясно, представляют ли эти состояния различные состояния голода и/или когнитивной реакции на пищу (ожидание), как утверждают авторы, в частности, учитывая присутствие питательных веществ желтка на этих стадиях. Это требует уточнения и уточнения используемых терминов.

Мы дали в тексте формальное определение голода и сытости и попытались ограничить его использование в основном введением и обсуждением. Мы также хотели бы отметить, что ранее мы опубликовали работу (Jordi et al., 2015, 2018), связанные с регуляцией аппетита у рыбок данио, в которых используется аналогичная экспериментальная схема. Кроме того, мы анализируем поведение на 7-8 dpf, стадии, на которой питательные вещества желтка в значительной степени истощаются (Gut et al., 2013).

Здесь мы также определяем термины:

Голод — это внутреннее состояние, определяемое тремя условиями:

1) Состояние дефицита питательных веществ/энергии, которое обычно является следствием лишения пищи или голодания.

2) Состояние, которое может способствовать поиску пищи, а также повышенному потреблению пищи.

3) Состояние, которое отражается и коррелирует с паттерном модуляторной активности нейронов.

Ненасытное питание — это подсостояние голода, при котором пища присутствует и поглощается, но дефицит питательных веществ/энергии все еще высок.

Сытость считается противоположностью голода и определяется соответственно:

1) Состояние наличия достаточных уровней питательных веществ/энергии или уровней, превышающих базовый гомеостатический уровень.

2) Состояние, которое поведенчески проявляется в более медленном/меньшем потреблении пищи по сравнению с состоянием голода из-за равнодушия к еде или ее активного избегания.

3) Состояние, которое отражается внутренним модулирующим состоянием нейронов, которое может быть антагонистическим и противоположным состоянию голода.

Следует отметить, что ни одно из этих определений не требует, чтобы рыба испытывала чувство голода/или «желание» поесть так же, как люди, и мы согласны с рецензентами в том, что возникающие в результате изменения в потреблении пищи/поведенческих результатах могут быть связаны с модуляцией чувствительность к пищевым сигналам и/или вероятности успешного захвата добычи без задействования дополнительных механизмов.

Предвкушение еды: Приносим извинения за путаницу. Мы использовали слово «ожидание» просто для описания состояния нейронов, которое предшествует будущему поведению и предсказывает его. Таким образом, поскольку как естественная (т. е. при пищевой депривации), так и искусственная (т. е. оптогенетическая) активация ЦГ происходит перед последующим ненасытным кормлением, мы назвали ее «ожиданием».

Мы понимаем, что «ожидание» может быть легко истолковано как когнитивное ожидание будущей пищи и/или подразумевающее подготовительное поведение, ни одно из которых, как мы не утверждаем, делает рыбка данио.Таким образом, мы удалили его и заменили более четкой терминологией (например, «прайминг» или «сенсибилизация»), как мы это сделали в нашем обсуждении предполагаемой роли ХГ в контроле аппетита (пожалуйста, также обратитесь к дополнительному документу: Conceptual_Circuit_Model. pdf для более подробной информации).

Утверждение, что серотонинергическая популяция СН связана с ожидаемым ненасытным питанием, неубедительно. В случае pERK авторы представляют один пример того, что подмножество нейронов CH локализуется совместно с 5-HT, однако они также показывают, что другое подмножество является дофаминергическим.Без использования этого маркера (5-HT) во всех образцах ICA нельзя быть уверенным, что активные/подавленные нейроны действительно являются серотонинергическими.

Теперь мы дали понять, что имеем в виду cH (а не серотонинергическую cH) в экспериментах pERK с низким разрешением (MAP-картирование) и анализе ICA. Мы также хотели бы подчеркнуть, что эти грубые эксперименты с pERK служат в первую очередь для сужения областей интереса и сосредоточения нашего внимания на последующем, более детальном рассечение цепи с комбинацией визуализации кальция, оптогенетической активации и химической абляции.

Использование GCaMP, экспрессированного в CH (116A:Gal4), для измерения активности (рис. 2) лучше, однако авторы никогда не показывают колокализации между 116A:Gal4;UAS:GCaMP и 5-HT. Это важно, учитывая изменчивость экспрессии между разными линиями UAS, показанную авторами. Следовательно, вывод авторов о том, что «серотонинергическая активность CH сообщает о степени голодания и предвосхищает ненасытность будущего охотничьего и пищевого поведения», не имеет достаточной поддержки.

Теперь мы также продемонстрировали, что большинство нейронов, помеченных нашими линиями Gal4, являются серотонинергическими. В частности, мы количественно определили перекрытие Tg(116A:Gal4) нейронов с окрашиванием 5-HT, которое составляет 88,9 ± 0,8%, а линии Tg(y333:Gal4;UAS:ReaChR-RFP) – 57,4 ± 0,8%. 2,1%. Таким образом, мы уверены, что по крайней мере подмножество серотонинергических нейронов cH модулируется пищевой депривацией и пищевыми сигналами (т. е. рисунок 2 — рисунок 3, рисунок 2 — рисунок 4 и рисунок 2 — рисунок 5, рисунок 3).В то же время мы прямо указали в тексте, что не исключаем роль дополнительных нейромодуляторов, в частности дофамина.

В подразделе «Клеточное рассечение нейронной активности гипоталамуса выявляет серотонинергическую популяцию, которая предвосхищает ненасытное питание» авторы сравнивают и противопоставляют активность CH и LH при различных парадигмах питания. Однако данные на рисунке 1f показывают активность CH, представленную как «нормализованная интенсивность pERK», а активность mLH и ILH представлена ​​​​как «количество клеток».В тексте авторы заявляют, что «количество активных клеток CH было резко уменьшено», и цитируют 1f, который не показывает данные о подсчете клеток для CH. Это ошибка? Если нет веской причины, уровни активности CH, mLH и ILH должны быть количественно определены одинаково, при этом «нормализованная интенсивность pERK» предположительно лучше, чем бинарная количественная оценка «вкл / выкл» «количества клеток». Та же проблема с рисунком 3B.

В ЛГ (в отличие от ХГ) активированные клетки рассеяны, оставляя четкие единицы (т.е. концентрированные области с более высокой флуоресценцией), которые можно идентифицировать с помощью автоматического определения порога (см. новый рисунок 1 — дополнение к рисунку 4). Таким образом, для LH мы использовали количество клеток, а не среднюю флуоресценцию, поскольку она обеспечивает информацию об активности с более высоким разрешением по сравнению с усреднением флуоресценции по всей области и менее подвержена изменчивости окрашивания. Однако мы согласны с экспертами в том, что разные показатели могут сбивать с толку, и что повышенная активность также происходит в нейропиле.Таким образом, мы также проанализировали наши данные с точки зрения абсолютной флуоресценции и представляем читателям оба показателя. Обратите внимание, что флуоресценция, как правило, имеет большую изменчивость, чем количество клеток. Мы также изменили текст, чтобы различать количество клеток и общую флуоресценцию.

На рисунке 2 авторы интерпретируют дифференциальную активность GCaMP mLH, lLh и CH как связанную с чувством голода. Однако данные показывают, что только mLH реагирует исключительно на пищу, в то время как две другие области реагируют на другие сенсорные стимулы, такие как поток воды. На это ссылаются авторы (подраздел «Активность нейронов в каудальном и латеральном гипоталамусе антикоррелирована в течение коротких

дней»).

шкалы времени в ответ на сенсорные сигналы пищи»), но, тем не менее, настаивают на интерпретации данных, как если бы они соответствовали конкретно кормлению/голоду, а не «общей» сенсорной обработке.

Мы, конечно же, не хотим заявлять и не верим в то, что контроль питания/аппетита — единственная роль cH и lLH (или даже mLH).Мы прямо заявили об этом в обсуждении, чтобы прояснить наши интерпретации.

Рисунок 3: Я не понимаю цели сравнения воздействия артемии и парамеции. Авторы заявляют, что «артемии являются естественной добычей, на которую охотятся личинки рыб, но которые слишком велики, чтобы их можно было съесть». Во-первых, артемии являются морскими животными и, следовательно, не являются естественным источником пищи для личинок пресноводных рыбок данио. Во-вторых, хотя артемия используется в качестве источника пищи для молоди (3 недели) и взрослых рыб, авторы не показали, что введение артемии вызывает пищевое/охотничье поведение у личинок данио, в отличие от других реакций, не связанных с пищей. Таким образом, утверждение о том, что реакция mLH на артемию представляет собой начальную сенсорную реакцию на пищевой сигнал, неубедительно. В связи с этой фигурой авторы снова используют разные параметры для измерения активности нейронов, то есть нормализованную активность pERK для CH и количество клеток активированных нейронов для LH.

Мы убрали из предложения слово «натуральный». Поскольку молодь и взрослые рыбы охотно охотятся и поедают артемию, мы считаем, что тот факт, что они не являются естественной добычей, не является слишком большим препятствием для нашей интерпретации.Теперь мы также предоставляем видеозаписи, показывающие охоту (развороты и погони) за артемией личинками рыбок данио, несмотря на то, что они слишком велики, чтобы их можно было съесть.

Привлекательность использования артемии заключается в том, что личинки рыб с готовностью преследуют и охотятся на них, но не могут их проглотить, потому что они слишком большие. Таким образом, это позволяет четко продемонстрировать, что весь сенсорный опыт, связанный с охотой (включая реафферентный опыт самой охоты), недостаточен для обеспечения высокой активности lLH и mLH и для подавления cH. По-видимому, это переключение вызывается только актом проглатывания/глотания. Мы более четко описали это обоснование в тексте.

Мы также проанализировали данные pERK, используя одни и те же параметры (т.е. среднюю флуоресценцию) как для cH, так и для LH.

Авторы используют генетическую абляцию с использованием UAS:nsfb-mCherry под одним промотором CH (116A:Gal4) и оптогенную активацию с использованием UAS:ReaChR под управлением другого промотора (y333:Gal4), поэтому они не могут знать, являются ли удаленные нейроны те же нейроны CH, что и клетки, активируемые светом.Это различие имеет решающее значение, поскольку именно оно лежит в основе проведения этого двойного эксперимента (оптогенетическая активация и хемогенетическая абляция).

Мы разделяем озабоченность рецензента по поводу использования двух трансгенных линий. Было предпринято несколько безуспешных попыток надежно экспрессировать варианты родопсина UAS-канала с помощью линии Tg (116A: Gal4) . В конце концов, мы использовали трансгенную линию Tg(y333:Gal4) для оптогенетики, которую мы теперь количественно оценили, чтобы показать значимость (57.4 ± 2,1%) перекрываются с 5-НТ в хГ, и мы также проверяем, что эта линия имеет относительно специфичную экспрессию в хГ и экспрессии ПВО (рис. 5 — дополнение к рисунку 1).

Таким образом, мы можем заключить, что удаленные нейроны, вероятно, имеют значительное перекрытие с нейронами, активированными светом. Однако мы также явно обсуждаем это предостережение в тексте.

Утверждение о том, что они специфически удаляют или активируют серотонинергические нейроны, нуждается в дополнительной поддержке, поскольку nsfb или ReaChR нацелены только на небольшое подмножество 5-HT нейронов, как показано на рис. 1 — дополнение к рисунку 4.

Мы смягчили наши заявления о том, что мы специфически удаляем/активируем серотонинергические нейроны, однако мы отмечаем, что линия Tg(116A:Gal4) примерно на 90 % серотонинергична и имеет минимальное перекрытие с дофаминергическими нейронами (рис. 2). дополнение 2).

Драйвер y333:Gal4 плохо охарактеризован. Поскольку оптогенная стимуляция пространственно не ограничена ЦГ, авторы должны показать, что ReaChR не экспрессируется в других областях мозга.

Мы показали на рисунке 5 — дополнение к рисунку 1, используя изображение всего препарата, что экспрессия Tg (y333: ReaChR-RFP) весьма специфична для cH. Однако, по-видимому, также имеется маркировка некоторых нейронов обонятельных луковиц, а также некоторая рассеянная маркировка нейронов в других частях мозга. Мы отметили эти возможные предостережения в тексте и в разделе «Обсуждение».

Как показывают авторы на Рисунке 1 — дополнении к рисунку 4, драйвер CH 116A:Gal4 экспрессируется в других областях гипоталамуса (например,грамм. PVO) и, следовательно, удаление других клеток может повлиять на потребление пищи.

Рецензенты правы в том, что линия Tg(116A:Gal4) маркирует нейроны как в cH, так и в PVO. Однако, учитывая, что экспрессия Tg(UAS:nfsb-mCherry) особенно слаба по сравнению с экспрессией Tg(UAS:GFP) в PVO (мы оцениваем 6-8 клеток в aPVO, 2-4 клетки в pPVO, и 30-40 клеток в cH), маловероятно, что будет существенная абляция ЛВО (см. рис. 6 — дополнение к рисунку 2).

Для Tg(y333:Gal4;UAS:ReaChR-RFP) оптогенетических экспериментов (рис. 6) стимуляция PVO во время поведения свободного плавания неизбежна, что мы обсуждали в тексте. Однако в наших экспериментах по оптогенетике + визуализации кальция (рис. 5) мы специально нацелились на cH и показали, что его активации достаточно для подавления активности LH.

Хотя, конечно, возможно, что, если существует правильная связь цепи, PVO также может быть активирован косвенно.В целом, мы не исключаем роли серотонинергических нейронов PVO в питании, так как многие медиально расположенные нейроны, помимо cH, активируются во время пищевой депривации. Опять же, мы подняли эту возможность в тексте.

Авторы утверждают, что активность ЦГ вызывает ингибирование ЛГ (подраздел «Функциональная диссекция серотонинергических нейронов ХГ при аппетите»), чтобы интерпретировать их неожиданный результат, что активация ЦГ в присутствии пищи (в отличие от до введения пищи) приводит к уменьшению потребления пищи. Чтобы доказать это, авторы должны показать, что оптогенетическая стимуляция нейронов CH приведет к снижению активности LH с использованием измерений 76A: GCaMP.

Снижение потребления пищи после активации цГ не является неожиданным, исходя из нашего понимания паттернов активности цГ и ЛГ (дополнительные сведения см. в Conceptual_Circuit_Model.pdf). Теперь мы подтвердили с помощью оптогенетики, что активация cH действительно снижает активность lLH (рис. 5).

Какие доказательства на рис. 2 свидетельствуют о том, что линия 76A:Gal4 экспрессируется в тех же нейронах ILH и mLH, которые помечены pERK на рис. 1?

Теперь мы использовали окрашивание pERK для измерения активности после предоставления пищевых стимулов лишенным пищи Tg(76A:Gal4;UAS-GCaMP6s) трансгенным животным.Насколько мы можем судить, линия Tg(76A:Gal4) , по-видимому, полностью маркирует все нейроны ЛГ, а все pERK-положительные клетки, индуцированные пищей, по-видимому, дважды метятся Tg(76A:Gal4;UAS: GCaMP6s) ( Рисунок 2 — дополнение к рисунку 3).

Рисунок 1G. Метки осей: «ILH» для оси Y и «mLH» для оси X. Что это значит? Каковы единицы на этих осях? Является ли «Интенсивность» количественной флуоресценцией кишечника, количеством кормлений или чем-то еще? Какой момент времени после добавления корма показан на этих графиках? Существует ли статистический анализ, подтверждающий идею о том, что количество ЛГ-клеток при приеме пищи увеличивается в зависимости от времени голодания? Почему аналогичный анализ не был проведен для популяции CH? В тексте (подраздел «Клеточное рассечение нейронной активности гипоталамуса выявляет серотонинергическую популяцию, которая ожидает ненасытного кормления») авторы цитируют рисунок 1G как свидетельство того, что «активность как CH, так и LH модулируется продолжительностью голодания», хотя нет данных для CH. показаны на рисунке 1G.

Приносим извинения за неясность. На основном рисунке (новый рисунок 2) мы теперь показываем более полный график (содержащий независимый набор данных), показывающий статистически значимые изменения активности как cH, так и LH в зависимости от времени лишения пищи.

Кроме того, мы добавили средние измерения флуоресценции долей cH и LH и статистическую количественную оценку в этот исходный набор данных (первоначально рисунок 1G), который мы теперь переместили на новый рисунок 2 — дополнение к рисунку 1.Для уточнения: оси относятся к количеству активных (т.е. pERK-положительных клеток) клеток; мы отметили это соответствующим образом, а также измерили среднюю флуоресценцию. Интенсивность относится к интенсивности флуоресценции кишечника, то есть приблизительно соответствует потреблению пищи. Показан момент времени через 15 минут после добавления пищи — вся эта информация теперь описана в условных обозначениях.

Почему на рисунке 1H не был проведен такой же анализ изображений в реальном времени для LH? Позже авторы (рис. 2) одновременно выполняют визуализацию кальция как для CH, так и для LH, так что это должно быть просто.

Первоначально эксперименты с cH проводились до того, как мы узнали о существовании линии LH. В настоящее время, как предполагает рецензент, мы провели одновременный мониторинг cH и LH в ходе голодания с использованием трансгенных линий 116A и 76A, представленных в новых рисунках 2 — приложение к рисунку 4 и рис. 2 — дополнение к рисунку 5.

Вкратце, мы подтвердили, что подмножество нейронов cH (а также средняя активность cH) увеличивается в ходе голодания, что согласуется с нашими результатами pERK.Однако в то время как из наших данных pERK мы обнаружили, что количество активных клеток в mLH и lLH (но не среднее значение флуоресценции pERK) уменьшается после лишения пищи (рис. 2), наши результаты визуализации кальция показывают большие подмножества вокселей LH, которые увеличиваются. фоновой флуоресценции в течение периода пищевой депривации.

Изменения активности ЛГ могут отражать реакции на фиксацию головы. В качестве альтернативы мы предполагаем, что в ходе пищевой депривации ЛГ сенсибилизируется ХГ и/или другими сигналами, связанными с голодом, что может объяснить последующее усиленное реагирование на пищу и пищевые сигналы. Примечательно, что в отличие от «количества активных клеток», средняя флуоресценция ЛГ явно не снижается в ходе голодания, оставляя открытой возможность подпорогового повышения активности клеток или нейропиля. Мы обсудили обе возможности в тексте. Наконец, всплески кальция lLH все еще в среднем сопровождались снижением флуоресценции cH, что указывает на то, что эти локусы все еще сохраняют антикоррелированную связь с пищевой депривацией.

Теперь мы переместили рисунок 1H на рисунок 2 — дополнение к рисунку 3.

При описании рисунка 1H авторы заявляют: «Чтобы наблюдать взаимные отношения между популяциями CH и LH в реальном времени, мы использовали визуализацию кальция для измерения реакции серотонинергических нейронов CH на голодание». Окончание вступительной части «Чтобы наблюдать взаимные отношения между популяциями CH и LH в режиме реального времени…» должно быть «… мы использовали визуализацию кальция для одновременного измерения реакции серотонинергических нейронов CH и LH на голодание».

Мы благодарим рецензента за его предложение и вносим соответствующие изменения.

Авторы заявляют в подразделе «Картирование активности всего мозга областей, регулирующих аппетит», что аналог ЛГ млекопитающих участвует в контроле аппетита, но является ли это хорошим сравнением, если рыбка данио «ЛГ» не экспрессирует нейропептиды, которые думали, что он регулирует питание ЛГ млекопитающих (т.е. гипокретин, мч и т.д.)? т. е. следует ли дать рыбке данио «LH» другое имя, поскольку она, по-видимому, содержит другие нейроны и, следовательно, вероятно, имеет другую функцию, чем «LH» млекопитающих? Экспрессируют ли глутаматергические и ГАМКергические нейроны, обнаруженные в ЛГ мышей, гипокретин, mch и т. д.?нейропептиды?

Мы и другие исследователи предполагаем, что ЛГ рыб гомологичен ЛГ млекопитающих из-за большого анатомического и функционального сходства, определяемого стимуляцией, абляцией, а позднее также экспериментами по визуализации (Demski, 1973; Muto et al. , 2017; Roberts and Savage, 1978). Однако мы согласны с тем, что его известный нейромодулирующий фенотип явно не совпадает с фенотипом млекопитающих, поскольку было показано, что другие типы нейронов в ЛГ млекопитающих (например, ГАМКергические нейроны, которые не являются ни MCH, ни орексин-позитивными) участвуют в обеих реакциях на пищу. и пищевое поведение (Jennings et al., 2015), мы считаем, что могут существовать некоторые уникальные и консервативные функции, связанные с питанием, приписываемые ЛГ, которые не зависят от MCH и орексина. Интересно, что в недавнем исследовании (Mikelsen et al., 2019) были выявлены дополнительные нейромодуляторы/пептиды, коэкспрессирующиеся с ЛГ-ГАМКергическими и глутаматергическими нейронами у мышей и объединяющиеся в дополнительные субпопуляции, которые могут лечь в основу будущих исследований. В целом, мы склонны придерживаться одной и той же терминологии, но постарались прояснить в нашем тексте различия между ЛГ рыб и млекопитающих.

На основании данных, представленных на рис. 3, активность CH, по-видимому, регулируется потреблением пищи, в отличие от сенсорных сигналов, генерируемых присутствием пищи, подобно ILH, в то время как активность mLH, по-видимому, индуцируется только сенсорными сигналами (хотя для меньшей степени, чем сенсорные сигналы и потребление пищи одновременно). В подразделе «Активность нейронов cH и LH по-разному модулируется сенсорными сигналами пищи и приемом пищи» авторы утверждают, что это соответствует «сильной антикорреляции CH с активностью lLH (по сравнению с активностью mLH, рисунок 2F)».Однако рисунки 2D и 2D свидетельствуют об обратном, то есть о том, что cH сильно антикоррелирует с mLH и имеет смешанное корреляционно-антикорреляционное взаимодействие с ILH. Пожалуйста, объясни.

Обратите внимание, что результаты могут показаться запутанными. Это можно объяснить тем фактом, что, хотя между cH и lLH меньше антикоррелированных вокселей, величина антикорреляции (т. Напротив, mLH имеет много, но менее сильно антикоррелированных вокселей с cH. Мы пересмотрели текст, чтобы включить это объяснение.

Рисунок 4A предполагает, что активация cH у сытых животных (которые предположительно имеют средние уровни активности CH, см. рис. 1I) до подачи пищи увеличивает последующее потребление пищи, имитируя высокие уровни активности cH во время голода. Та же манипуляция с голодными рыбами не дает эффекта, поскольку, по-видимому, их уровни активности CH уже высоки (см. снова рис. 1I). Рисунок 4B более сложный. Авторы приводят в действие нейроны CH во время кормления животных, лишенных пищи, и видят снижение количества кормления.Это нелогично; мы могли бы ожидать, что высокие уровни активности CH будут вызывать чувство голода и, следовательно, увеличивать количество пищи. Чтобы объяснить это, авторы предполагают, что эта манипуляция увеличивает активность CH с низких уровней, наблюдаемых во время кормления (снова см. рис. 1I), до средних уровней, наблюдаемых во время сытости, но не до самых высоких уровней, наблюдаемых во время голода. Это разумная гипотеза (хотя ее можно было бы изложить более четко, так как это ключевой момент в рукописи и четко не объяснен).Для проверки этой гипотезы авторы должны активировать нейроны CH во время кормления сытой рыбы. Эти животные предположительно имеют средние уровни активности cH (см. рис. 1I) и, таким образом, оптогенетическая активация должна доводить активность CH до высоких уровней (как подразумевается для эксперимента на рис. 4A). В этом случае они должны увидеть усиленное кормление. Удивительно, что авторы еще не провели этот эксперимент, поскольку это сделало бы рисунок 4B симметричным рисунку 4A.

Снижение потребления пищи в результате активации ХГ не было для нас неожиданным результатом (см. Conceptual_Circuit_Model.pdf для подробного объяснения). В присутствии пищи активность cH повышается с увеличением чувства сытости, что антикоррелирует с активностью LH, поэтому мы ожидали, что повышение активности cH будет связано с более низкой активностью LH и уменьшением потребления пищи.

Таким образом, мы предсказали, что активация cH во время кормления у откормленной рыбы по-прежнему, вероятно, будет снижать потребление пищи, хотя степень индуцированного cH «примирования» схемы LH также может влиять на результаты. Как было предложено рецензентом, мы провели этот эксперимент.Несмотря на то, что у нас относительно небольшой размер выборки из-за нынешних трудностей в разведении наших трансгенных рыб, результаты показывают тенденцию к подавлению кормления и не подтверждают идею о том, что стимуляция cH у кормящихся рыб может увеличить потребление пищи. Это, наряду с экспериментами по оптогенетической визуализации, подтверждает нашу модель, согласно которой резкий эффект стимуляции ХГ заключается в снижении потребления пищи, вероятно, за счет подавления ЛЛ, тогда как стимуляция ХГ в отсутствие пищи «запускает» или «сенсибилизирует» схемы ЛГ к усилить последующую подкормку.

Рисунок 4A,B: Стимуляция нейронов CH во время кормления приводит к снижению флуоресценции кишечника. Может ли это быть связано с другими причинами, кроме специфического подавления кормления? Например, сниженная двигательная активность, сниженная способность видеть добычу и/или нарушенная способность выполнять определенные шаги в последовательности захвата добычи? Анализ последовательности поимки добычи, описанный ранее несколькими лабораториями данио, укрепит интерпретацию этого результата. Судя по тексту в методах, похоже, что данные, необходимые для этого анализа, возможно, уже собраны.

Это очень хорошая идея; однако мы, к сожалению, не проводили экспериментов, в которых мы отслеживаем поведение во время активации cH во время кормления, поскольку это технически сложно сделать при высокой пропускной способности по сравнению с измерением флуоресценции кишечника. В этих конкретных экспериментах светодиод размещается прямо над тарелкой, что исключает анализ видео, хотя мы надеемся использовать более сложную установку в будущих экспериментах.

Рисунок 4. В этом эксперименте отсутствует контроль возможности того, что трансгенные животные ReaChR изменили питание даже в отсутствие оранжевого света.Также было бы полезно показать, что стимуляция нейронов CH на самом деле достигается с помощью, например, GCaMP, pERK или cfos. Пожалуйста, также укажите генотип ReaChR-контрольных животных (т. е. контрольные содержат только трансген Gal4 или UAS или ни один из них?).

Теперь мы включили в рисунок 6 (дополнение к рисунку 1) некоторые доказательства с использованием окрашивания pERK, что наши оптогенетические манипуляции для поведения свободного плавания достаточны для активации ReaChR-позитивных клеток, особенно тех, у которых самая сильная экспрессия.Мы также показали с помощью визуализации кальция, что активация ReaChR действительно приводит к ожидаемому увеличению флуоресценции GCaMP, хотя для этого используется другая установка (рис. 5).

Контроли для экспериментов с ReaChR не имеют видимой экспрессии Tg(y333:Gal4;UAS:ReaChR-RFP) и, таким образом, представляют собой смесь братьев и сестер, экспрессирующих только Tg(y333:Gal4), Tg(UAS:ReaChR-RFP) ) или ни один из этих трансгенов, каждый с вероятностью одна треть. Мы прямо указали это также и для Tg(116A:Gal4) в тексте.

Учитывая, что в зависимости от времени световой стимуляции (до или во время еды) Tg(y333:Gal4;UAS:ReaChR-RFP) рыб либо увеличивают, либо уменьшают потребление пищи, маловероятно, что трансген сам по себе влияет на поведение в систематический способ. У нас были проблемы с получением достаточного количества ReaChR-позитивных эмбрионов для проведения этих и других запрошенных экспериментов, и поэтому мы не смогли вовремя выполнить этот конкретный контроль. Тем не менее, мы выполнили контроль трансгена только для эксперимента по абляции (см. ниже).

Рисунок 4C: Должны быть показаны данные, показывающие эффективность абляции (т. е. степень и специфичность потери клеток у животных, получавших MTZ), особенно потому, что 2,5 мМ MTZ недостаточно для индукции надежной абляции для большинства линий Gal4. Как и на рисунке 4A, B, в этом эксперименте отсутствует контроль над возможностью того, что трансген влияет на поведение в отсутствие MTZ.

Мы можем абсолютно подтвердить, что этот протокол (который мы также использовали для других трансгенных линий) достаточен для абляции большинства нейронов cH (см. рисунок 6 — рисунок 2).У нас также есть данные, показывающие, что сам по себе трансген не влияет на поведение в отсутствие MTZ. (Рисунок 6—дополнение 2 к рисунку).

Реакция активности мозга на присутствие парамеций может быть зрительно-опосредованной охотничьей реакцией, которую можно имитировать с помощью анимированных парамеций или других сенсорных реакций, таких как обонятельно-опосредованная двигательная реакция. И то, и другое может увеличить шансы на успешную поимку добычи, что приведет к увеличению потребления пищи.

Мы согласны с тем, что повышенный «аппетит», который мы наблюдаем, может быть связан с повышенной чувствительностью к пищевым сигналам, что увеличивает вероятность поимки добычи, а не с «мотивацией к еде» или фактическим ощущением голода, которое мы, люди, испытываем. Тем не менее, эта озабоченность затрагивает более философские вопросы о том, «каково это быть рыбой», и мы считаем, что такое объяснение улучшения кормления по-прежнему будет подпадать под наши рабочие определения «голода» и «сытости». Теперь мы сделали это более явным в тексте.

[Примечание редактора: ответы автора на повторный обзор следуют.]

В целом, мы считаем, что вопросы, поднятые рецензентом 2, в некоторых случаях полезны, а в других – необоснованны. Критика в основном касается представления и ясности и может быть легко устранена простыми исправлениями; они не являются разумными основаниями для отказа, и мы отвечаем на различные опасения, приведенные ниже.

Рецензент №2:

Мне очень трудно было прочитать и понять эту исправленную рукопись. Это особенно разочаровывает, потому что многие критические замечания по поводу первой версии рукописи были связаны с отсутствием ясности и деталей, и, во всяком случае, исправленная версия хуже. Я благодарю авторов за добавление важных новых экспериментов. Однако большинство этих экспериментов плохо описаны, содержат ошибки и часто не поддаются оценке. В целом отсутствует строгость и количественная оценка ключевых показателей, в том числе показателей, которые были запрошены рецензентами, с только общими заявлениями о наблюдениях и в некоторых случаях с неправильными сравнениями.

Основные версии:

1) В тексте, когда авторы приводят дополнительный рисунок, чаще всего не указывается, о какой именно панели идет речь. Это может показаться тривиальной проблемой, но в конечном итоге это затрудняет просмотр/чтение статьи. Эта проблема особенно актуальна для рисунка 2 — приложение к рисунку 4 и рисунка 2 — дополнение к рисунку 5. Эти рисунки быстро упоминаются и вообще не поясняются в основном тексте или подписях к рисункам. Другие дополнительные панели (например,грамм. Рисунок 2 — дополнение к рисунку 1А и 1С) показывают данные, которые, кажется, не освещены в тексте. Пожалуйста, в основном тексте дайте ссылку на каждую панель каждого рисунка, подробно объясните эксперименты и опишите, что они показывают.

Теперь мы сделали четкие ссылки на дополнительные панели рисунков, когда цитируются дополнительные рисунки, и постарались правильно представить всю дополнительную работу в основном тексте. Однако с согласия редакции мы не ссылаемся и не объясняем каждую панель каждого дополнительного рисунка в основном тексте, поскольку это не было бы нормой.Мы добавили в текст ссылки на все основные панели рисунков и предприняли согласованные усилия, чтобы повысить ясность описаний в подписях к рисункам. Что касается рисунка 2 (дополнение 4 к рисунку) и рисунка 2 (дополнение к рисунку 5), эти рисунки были значительно упрощены (сведены к одному рисунку: рисунок 3 — дополнение к рисунку 3), и их интерпретация является предметом параграфа в подразделе «Хвостовой и латеральный ответы гипоталамуса на сенсорные сигналы пищи антикоррелированы в течение коротких промежутков времени» и подробно описаны в подписи к рисунку.

Как правило, теперь мы прилагаем явные усилия, чтобы представить связное повествование, в котором каждая фигура и дополнительная фигура мотивированы и интегрированы в вопрос, который, как мы надеемся, имеет гораздо больше смысла.

2) Рисунок 1 — дополнение к рисунку 3: Нецелесообразно генерировать данные ICA, используя рыбу из других методов кормления, которые не описаны в этой рукописи. Хотя их включение может быть необходимо для достижения статистически значимых результатов, это большой черный ящик данных, которые не могут быть оценены рецензентами или читателями.Эти неописанные данные должны быть либо добавлены в рукопись, либо анализ ICA должен быть удален.

Мы согласны с тем, что источник всех данных изображения в анализе независимых компонентов (ICA; рисунок 1 — дополнение к рисунку 3) должен быть полностью описан, и что рыба, подвергающаяся дополнительным манипуляциям, которые могут изменить результаты, не должна быть включена. Теперь мы использовали более строгие критерии и сократили набор данных до n = 300 рыб, которые либо были лишены пищи (2 часа), либо получали пищу в условиях лишения пищи или кормления, строго в соответствии с условиями эксперимента.Антикорреляция между активностью нейронов cH и LH на самом деле сильнее с этим более ограниченным набором данных, чем раньше. Кроме того, в легенду рис. 1 — приложение к рис. 3, а также в раздел «Материалы и методы» добавлено четкое и подробное описание анализа и данных.

3) Рисунок 2. Данные, представленные на этом рисунке, позволяют предположить, что 30-минутного голодания достаточно, чтобы вызвать сдвиг активности ILH (при количественной оценке по количеству активных клеток), но не в cH (при количественной оценке по нормализованной интенсивности pERK) .Однако, когда активность ILH количественно оценивается по нормализованной интенсивности pERK, 30-минутного голодания недостаточно, чтобы вызвать изменение активности. В своем ответе на обзоры авторы отметили, что нормализованная интенсивность pERK менее точна, чем подсчет активных клеток; возможно, если бы активность cH поддавалась количественному измерению посредством подсчета клеток, 30 минут было бы достаточно, чтобы вызвать изменение и в этой популяции. Несмотря на это, авторам не следует сравнивать временные рамки изменения активности cH и LH при использовании различных показателей для количественной оценки активности каждой группы (как они это делают в подразделе «Состояние насыщения влияет на чувствительность популяций cH и LH к пище», подраздел « Взаимно противоположные гипоталамические сети контролируют аппетит рыбок данио» и рисунок 2D).

В оригинальной рукописи мы использовали разные показатели для количественной оценки интенсивности окрашивания фосфо-ERK в каудальном (cH), медиально-латеральном (mLH) и латеральном (lLH) гипоталамусе, поскольку эти области имеют очень разные модели распределения фосфо-ERK-положительных клеток. Меченые клетки в cH сильно сгруппированы, и все же они хорошо рассеяны в mLH и lLH. Анализ отдельных клеток с использованием порогового алгоритма (рис. 1 — дополнение к рисунку 4) возможен в mLH и lLH, но не может быть автоматизирован для cH.Такие несовершенства инструментов количественной оценки неизбежны. Поэтому в первой редакции мы реализовали предложение рецензента также использовать одни и те же показатели для сравнений в этих областях (рис. 1G и рис. 2B). Как отмечает рецензент, и это неудивительно, «подсчет активных клеток» в некоторых ситуациях выявляет более тонкие изменения активности ЛГ, чем средний показатель флуоресценции ROI. Например, в отношении особого замечания рецензента, касающегося изменения активности cH и lLH; поскольку изменения активности cH широко распространены в плотной pERK-положительной популяции, их легко обнаружить как различия в средней флуоресценции ROI.Однако, поскольку активные (выше порога) нейроны редки в mLH и lLH постоянно питающихся животных, изменение средней флуоресценции ROI из-за их отсутствия через 30 минут лишения пищи незначительно. Однако разница явно значительна в количестве активных клеток.

4) Подраздел «Состояние насыщения влияет на чувствительность популяций кГ и ЛГ к пище»: Текст здесь не подтверждается представленными данными. Идея о том, что реакция cH на отсутствие пищи, которая, как утверждают авторы, возникает после реакции LH, каким-то образом необходима для реакции LH, не имеет смысла.

Мы согласны с рецензентом и удалили это заявление.

5) Рисунок 2—дополнение к рисунку 1А: Каковы условия кормления для этих графиков? Какое сообщение они предназначены для передачи, особенно потому, что корреляции относительно слабы (особенно для cH).

Рисунок 2 — приложение к рисунку 1a включает данные по всем периодам голодания (30 минут, 2 часа, 4 часа), которые были описаны в рисунке 2 — дополнение к рисунку 1B. Теперь это разъясняется в легенде.График показывает, что существует слабая корреляция между снижением маркировки cH pERK и повышенным потреблением пищи, тогда как существует более значительная корреляция между приемом пищи и активностью mLH/lLH (средняя и правая панели, рисунок 2 — приложение к рисунку 1A). Подразумеваемый вывод состоит в том, что, поскольку в присутствии пищи активность cH pERK положительно коррелирует с насыщением, прием пищи (и флуоресценция кишечника) должен показывать отрицательную корреляцию: чем ниже активность cH, тем больше рыба ест, тем выше флуоресценция кишечника. , но эта связь может быть не идеальной из-за биологической и экспериментальной изменчивости.

6) Рисунок 2 — дополнение к рисунку 2А проблематично. Верхнее и правое изображения имеют разный масштаб, и два изображения pERK выглядят очень по-разному. Кажется, что Th3-положительных клеток намного меньше, чем на других изображениях, предоставленных авторами (например, панель e того же рисунка). Должен быть предоставлен полный z-стек области cH.

Как упоминалось рецензентом, в старой версии рисунка 2 — приложение к рисунку 2a отображались одноплоскостные изображения перекрытия между окрашиванием антител 5-HT и pERK и окрашиванием антител Th3:GCaMP5 и pERK.Как было указано масштабными линейками, эти изображения были при разном увеличении.

Мы заменили эти отдельные примеры более полным анализом, в котором окрашивание как pERK, так и 5-HT проводили на фоне Th3:GCaMP5 (n = 4 рыбы). Следовательно, на одних и тех же изображениях было получено перекрытие экспрессии pERK с дофаминергическими и серотонинергическими популяциями. Новые данные представлены на рисунке 1 — дополнение к рисунку 5, включая полную z-серию pERK с окрашиванием 5-HT (видео 2) или с Th3:GCaMP5 (видео 3), в соответствии с запросом.Результаты подтверждают наше утверждение о том, что большинство pERK-позитивных нейронов у рыб, лишенных пищи, являются серотонинергическими, тогда как дофаминергические нейроны составляют незначительную долю.

7) Рисунок 2 — дополнение к рисунку 3D: «В соответствии с нашими результатами pERK начальная кальций-опосредованная средняя флуоресценция и частота возбуждения подмножества нейронов cH масштабируются в зависимости от продолжительности голодания до визуализации (рисунок 2 — дополнение к рисунку 3D). )». Есть две проблемы с этим утверждением. Во-первых, эти данные показывают только абсолютную флуоресценцию (или среднюю флуоресценцию?), а не частоту возбуждения.Во-вторых, что это за «подмножество нейронов cH»? Сколько клеток подвергается количественному анализу? Где они? Это небольшое меньшинство клеток или общая черта большинства нейронов cH? Должны быть указаны соответствующие ячейки.

Эта путаница возникла из-за ошибки в тексте; он должен был ссылаться на рисунок 2 — дополнение к рисунку 4 и рисунок 2 — дополнение к рисунку 5 вместо рисунка 2 — дополнение к рисунку 3D. Мы также понимаем, что термин «частота всплесков» не должен был использоваться без уточнения, поскольку флуоресценция GCaMP просто коррелирует со всплесками напряжения.Изображенные «пики» представляют собой пики интенсивности флуоресценции GCaMP — теперь в тексте мы называем их пиками флуоресценции кальция/Ca 2+ . Ниже мы более подробно рассмотрим вопрос анализа абсолютной флуоресценции в экспериментах по визуализации в реальном времени.

8) Рисунок 2 — приложение к рисунку 4 и Рисунок 2 — дополнение к рисунку 5: Данные, показанные на этих рисунках, почти не описываются и не поясняются, что делает их совершенно непонятными для этого рецензента. Насколько я могу понять эти данные, существует несколько противоречий между тем, что показано на разных панелях, с данными pERK, и тем, что кратко указано в тексте. Возможно, это очевидно для поклонников, но вряд ли для большинства читателей. Есть также несколько очевидных проблем. Во-первых, на Рисунке 2—дополнение к рисунку 4, панели A и B показывают синюю линию в нижней строке графика — чему это соответствует? Что означают разные числа – количество нейронов? Авторы подразумевают противоположные паттерны активности для lLH и cH на основании рисунка 2 — дополнения к рисунку 4A и B (хотя они не антикоррелированы, а просто сдвинуты друг относительно друга), и эта взаимосвязь не очевидна в данных, показанных на рисунке 2 — дополнение к рисунку 5.Эти цифры просто не могут быть оценены в настоящее время.

Приносим свои извинения за неясность текста и представления данных на Рисунке 2 — приложение к рисунку 4 и Рисунке 2 — дополнение к рисунку 5. Мы согласны с рецензентом и теперь пересмотрели эти рисунки, чтобы упростить представление данных и уточнили их анализ и интерпретацию в тексте (см. ниже наши комментарии в ответе на пункт 10).

Для упрощения двух дополнительных рисунков они теперь сокращены до рисунка 3 — приложение к рисунку 3.Мы также улучшили описание всех панелей в подписях к рисункам. Упомянутая синяя линия была окрашена неправильно; он должен быть зеленым (с указанием mLH df/f). Мы сожалеем о путанице.

Что касается того, являются ли средние кривые кальция антикоррелированными, а не смещенными относительно друг друга, а также постоянством этой взаимосвязи, мы согласны с тем, что трудно сделать вывод из представленных средних значений, инициированных кальцием. Теперь это указано в легенде. Однако мы считаем, что гораздо более убедительные данные в отношении отрицательной корреляции между cH и lLH/mLH представлены на рис. 3F.Мы изменили текст в разделе «Результаты», чтобы привести его в соответствие с этой линией рассуждений.

9) В связи с последним пунктом, подраздел «Состояние насыщения влияет на чувствительность популяций cH и LH к пище»: «Хотя некоторые воксели mLH и lLH показали прогнозируемое снижение базовой флуоресценции и скорости возбуждения, многие другие продемонстрировали значительное усиление базовая активность». Кажется (рис. 2 — дополнение к рисунку 4B), что большинство нейронов ЛГ (особенно в ILH) демонстрируют повышенную активность во время депривации пищи с помощью визуализации в реальном времени, что противоположно результатам pERK, показанным на рис. 1 и рис. 2, и схеме. показано на рисунке 2D.Если я неправильно понимаю рис. 2 — дополнение к рис. 4 (что вполне возможно), это серьезная проблема, на которую не обращают внимания. Должны ли авторы сосредоточиться на результатах GCaMP, а не на pERK, «учитывая непрямой характер картирования активности у постфиксированных животных»?

Мы согласны с этим и в настоящее время значительно переработали и упростили эти два дополнительных рисунка (Рисунок 2 — дополнение к рисунку 4 и Рисунок 2 — дополнение к рисунку 5) и оптимизировали их объяснение в тексте. Мы удалили из рисунков ненужный анализ и агрегировали данные по рыбе, что позволило объединить их в один рисунок, который теперь отображается как рисунок 3 — дополнение к рисунку 3.

Как отметил рецензент, в течение 2-часового периода лишения пищи наблюдается длительное увеличение исходной кальциевой флуоресценции области lLH. Исходные колебания флуоресценции кальциевого репортера могут быть значительным искажающим фактором при долговременной визуализации кальция в реальном времени и могут возникать из-за иммобилизации животного или эффектов облучения интенсивным ИК-лазерным светом. Однако измерения частоты пиков кальция и амплитуды пиков могут быть выполнены независимо от таких изменений исходного уровня, чему способствует вычитание исходного уровня (удаление тренда).В пересмотренный рисунок 3 — дополнение к рисунку 3 мы включили как необработанные данные (рисунок 3 — дополнение к рисунку 3Ai), так и базовые данные без тренда для ясности (рисунок 3 — дополнение к рисунку 3Aii). Вместо того, чтобы сосредотачиваться на долгосрочных изменениях исходного уровня, мы используем визуализацию кальция только в реальном времени, чтобы наблюдать за острыми и быстрыми изменениями флуоресценции репортеров кальция, такими как частота и амплитуда спайков. Здесь, независимо от исходного изменения флуоресценции lLH, наблюдается явное различие в активности областей cH, mLH и lLH у животных, лишенных пищи, по сравнению с животными, представленными вживую с добычей (рис. 3), которые мы количественно оцениваем. и описать в тексте.В этом отношении наши данные pERK и визуализации кальция не противоречат друг другу.

Что касается надежности измерений активности на основе pERK, эти измерения всегда выполняются со ссылкой на контрольные образцы в том же наборе данных, что позволяет нормализовать базовую активность. Кроме того, активность на основе pERK измеряется в полностью неинвазивных, не привязанных и полностью естественных условиях, в которых фиксированный образец всегда сообщает об активности, которая происходит в течение примерно 15 минут до умерщвления (Randlett et al., 2015).

10) Рисунок 4: Текст, описывающий этот рисунок, гласит: «Воздействие этого пищевого сигнала в отсутствие приема внутрь вызывало небольшое увеличение нервной активности lLH и большее увеличение активности mLH (рис. 4A, B). Индуцированное артемией гипоталамическое однако активность была меньше, чем у потребляемой добычи (рис. 4A/B)». Это утверждение точно описывает данные. Однако следующее предложение: «Эти наблюдения предполагают, что мЛГ в первую очередь реагирует на сенсорные сигналы и/или индуцированное охотничье поведение, тогда как индукция активности мЛГ в значительной степени зависит от потребления» не является подходящей интерпретацией данных.Я бы пришел к выводу, что и lLH, и mLH реагируют как на парамецию, так и на артемию, что обе популяции менее чувствительны к артемии и что ILH менее реагирует, чем mLH, на оба стимула, а не что одна популяция реагирует в основном на сенсорные сигналы, а другая популяция реагирует на потребление. Можно утверждать, что увеличение количества клеток в ЛГ в ответ на артемию очень мало, однако указывается на статистически значимое различие. Метрика «количество активных клеток» также кажется ошибочной, потому что площадь mLH намного больше, чем площадь lLH, и поэтому эти значения необходимо нормализовать, чтобы сделать какие-либо значимые сравнения между клеточными популяциями. Мне кажется, что нормализация, скорее всего, устранит любую разницу в количестве активных клеток между lLH и mLH. Неясно, является ли метрика «нормализованная интенсивность pERK» аналогичными недостатками, т. е. измеряет ли она общую флуоресценцию в интересующей области (на которую может повлиять размер области) или это значение нормализовано в соответствии с площадью исследуемой области. измерения (непонятно, при чем здесь «нормализованный» – нормированный на tERK, на общую площадь, на контрольное значение)?

Автор обзора считает, что активность mLH и lLH в равной степени индуцируется воздействием артемии, что указывает на то, что обе области одинаково, хотя и умеренно активны, в ответ на сенсорные сигналы пищи в отсутствие приема пищи.Мы провели дополнительную количественную оценку, чтобы решить проблемы рецензентов, в частности, не мешают ли различия в размерах mLH и lLH нашей интерпретации.

Во-первых, отметим, что, поскольку интенсивность флуоресценции pERK уже усреднена по ROI, размер ROI уже учтен.

В случае подсчета активных клеток мы провели два дополнительных анализа:

1) Количественная активность, индуцированная артемией, по сравнению с активностью, индуцированной парамецией. Таким образом, активность каждой доли «нормируется» до ее максимальной активности (т. е. активности, индуцированной парамециями).Используя этот метод, мы показываем, что действительно lLH еще слабее активируется пищевыми сенсорными сигналами, чем mLH. Эта количественная оценка описана в тексте и на рисунке 4.

2) «Число активных клеток» нормализовано по размеру ROI, как того требует рецензент. Результаты представлены ниже. Примечательно, что эффект такой нормализации существенно не меняет результаты.

В совокупности мы теперь более уверены в нашей интерпретации, основанной на метрике количества активных клеток, что lLH, вероятно, более чувствителен к завершающим сигналам.Однако, отметив, что изменения общей флуоресценции между mLH и lLH гораздо более схожи, чем для количества активных клеток, мы изменили нашу интерпретацию в тексте, чтобы принять во внимание комментарии рецензента.

Наконец, что касается запроса о «нормализации», он был связан с контрольным значением, поэтому все контрольные значения имеют среднее значение 1. Это также относится к другим показателям, связанным с pERK. Мы разъяснили этот момент в легенде.

11) Рисунок 5E: Как авторы объясняют увеличение флуоресценции mLH GCaMP в ответ на стимуляцию контрольной области, которая не помечена ReaChR?

Рецензент по понятным причинам озадачен тем фактом, что освещение с длиной волны 633 нм в контрольной области (преоптическая область, PO) вызывает усиление флуоресценции GCaMP в mLH (рис. 5E).Мы обнаружили, что такое освещение ПО запускает активность mLH даже в отсутствие экспрессии ReaChR. Вероятно, это связано с тем, что преоптическая область является мультисенсорной областью, которая реагирует на зрительный ввод (Wee et al., 2019) из-за экспрессии многих невизуальных светочувствительных опсинов в этой области (Fernandes et al., 2012). Следовательно, нас не удивляет, что свет сам по себе может влиять на активность областей гипоталамуса в дополнение к специфической модуляции активности lLH, индуцированной ReaChR. Все это теперь подробно обсуждается в тексте.

12) Рисунок 5 — дополнение к рисунку 1: Как отмечают авторы, линия y333:Gal4 гораздо менее специфична для 5-НТ нейронов, чем линия 116A:Gal4. Важно определить, являются ли ~ 40% клеток, экспрессирующих y333:Gal4, которые являются 5-HT-отрицательными, Th3-положительными, как это было сделано для линии 116A:Gal4, поскольку это обеспечит значительный дофаминергический вклад в этот эксперимент.

Теперь мы выполнили запрошенную количественную оценку и показываем, что 23.9 ± 2,2% (до 30%) клеток y333:Gal4;UAS:ReaChR-RFP являются дофаминергическими. Эти данные отображаются и количественно оцениваются в новом рисунке 5 — дополнении к рисунку 2. Учитывая, что 5-HT метит ~60% клеток, меченных y333, и что мы наблюдали клетки в cH, в которых отсутствует маркировка 5-HT и DA ( рисунок 1 — дополнение к рисунку 5), остальные клетки, вероятно, объясняются неполным мечением 5-НТ и дофаминовых нейронов или могут включать гистаминергические нейроны, которые образуют минорную подгруппу cH (Chen et al. , 2016).

13) Рисунок 6 — дополнение к рисунку 1: Это еще один пример неподтвержденных данных, которые следует количественно оценить.

Рецензент запрашивает количественную оценку окрашивания pERK, показанного в данных изображения на рисунке 6 — дополнение к рисунку 1. Теперь мы представляем изображения более высокого качества (n = 3 рыбы) и количественно оцениваем данные в соответствии с запросом. Наши результаты подтверждают, что наша оптогенетическая поведенческая установка очень эффективна в активации ReaChR-позитивных клеток.

14) Рисунок 6 — дополнение к рисунку 2: Количественное определение абляции клеток cH отсутствует. Вместо этого отображается только одно образцовое изображение. Поэтому невозможно сделать какие-либо выводы о том, была ли абляция успешной и в какой степени.Таким образом, утверждение авторов в опровержении, что «мы можем абсолютно подтвердить, что этот протокол (который мы также использовали для других трансгенных линий) достаточен для абляции большинства нейронов cH (см. рис. 6 — дополнение к рисунку 2)», никоим образом не соответствует действительности. подтверждается предоставленными данными.

Мы согласны с тем, что лучше всего проводить количественную оценку абляции, и сделали это. Клетки, которые экспрессируют конструкцию UAS-nfsb:mCherry под контролем 116A-Gal4, видны как mCherry-положительные клетки. При инкубации таких рыб с препаратом МТЗ, вызывающим абляцию, 6.1+/- 0,66 клеток cH на рыбу были mCherry-положительными (n = 54 рыбы). Когда MTZ был исключен, 31 +/- 1,5 клетки были mCherry-положительными (n = 3 рыбы). Таким образом, уменьшение в результате абляции составило ~80%. Остальные mCherry-положительные клетки обычно были тусклыми и деформированными/деформированными, что указывало на повреждение, которое могло нарушать функцию. Эта информация теперь включена в раздел «Материалы и методы».

15) Авторы предполагают, что «оптогенетическая стимуляция активности cH подавляет активность lLH и тем самым вызывает снижение скорости питания. (подраздел «Функциональная диссекция серотонинергических нейронов хГ в пищевом поведении»). Они свидетельствуют о том, что активация хГ ингибирует пищевое поведение (хотя это необходимо пояснить; см. доказательства того, что снижение активности ILH снижает потребление пищи? Если нет, это утверждение следует удалить

Рецензент спрашивает, есть ли доказательства того, что для пищевого поведения требуется активность lLH. Фактически это было исследовано Muto et al., 2017, которые удалили нейроны ЛГ и наблюдали снижение пищевого поведения (рис. 1F, Muto et al., 2017). Ранее это упоминалось в разделе «Обсуждение», но теперь мы повторили это прямо под упомянутым утверждением.

16) Несмотря на предостережения, упомянутые авторами, использование разных линий Gal4 с разными паттернами экспрессии (которые остаются слабо охарактеризованными, несмотря на запросы рецензентов о более подробной информации) для генетической абляции и оптогенетической активации не позволяет авторам делать твердые выводы из этих экспериментов. На самом деле не имеет смысла, что линия Gal4 будет достаточно сильной, чтобы вызвать абляцию клеток (тем более, что авторы используют необычно низкую концентрацию mtz), но не оптогенетическую стимуляцию. Тот факт, что линия Gal4 не дает ожидаемого фенотипа (для которого данные не показаны), не означает, что можно просто заменить другую линию Gal4, дающую ожидаемый результат.

Рецензент высказывает мнение, что использованные в этом исследовании линии Gal4 были «слабо охарактеризованы».Важно отметить, что вопреки заявлениям рецензента, причина, по которой линию 116A:Gal4 нельзя было использовать в оптогенетических экспериментах, заключается в том, что она не смогла управлять экспрессией трансгена UAS:ReaChR-RFP, а также многих других существующих UAS-управляемых вариантов канального родопсина. (УАС:ChR2-YFP, УАС:ChRWR-GFP, УАС:ChR2:mCherry). Это было отмечено из-за невозможности наблюдать флуоресцентную метку в 116A:Gal4; UAS-Channelrhodpsin животных, даже после того, как было выполнено пост-hoc окрашивание для усиления сигнала. В результате не удалось провести оптогенетические эксперименты с линией 116A:Gal4. Мы также обнаружили, что экспрессия UAS:nfsb-mCherry является относительно слабой по сравнению с экспрессией UAS:GFP, управляемой 116A:Gal4. В целом утверждение рецензента о том, что мы заменили другую линию Gal4, потому что мы не наблюдали «ожидаемый фенотип», необоснованно. Наши решения относительно выбора линий Gal4 были полностью основаны на тестах экспрессии трансгена.

https://doi.org/10.7554/eLife.43775.042

границ | Удивительное поведение электрических угрей

Введение

Можно сказать, что электрические угри не нуждаются в представлении. Большинство людей слышали о них и знают об их необычной способности генерировать мощные электрические разряды для нападения и защиты. Но многих читателей, вероятно, удивит, что электрические угри сыграли ключевую роль в раннем развитии физиологии, а их анатомия вдохновила Вольта на разработку батареи, которую он назвал искусственным электрическим органом, подобным органу электрического угря. (Фингер и Пикколино, 2011).В 1700-х годах, когда наше понимание электричества было в зачаточном состоянии, а лейденская банка была основным устройством для электрических экспериментов, вопрос о том, могут ли животные производить электричество, был первостепенным. Сильно электрические рыбы были хорошо известны, но как производились их таинственные выбросы, и была ли это та же самая «сила», создаваемая лейденской банкой, было предметом интенсивных споров.

В начале 1770-х доказательств в пользу электричества животных было дразнящим, но неубедительным.Исследователи, работавшие с сильноэлектрической торпедой, установили, что излучение торпеды передается по проводникам, а изоляторы, такие как дерево или воск, — нет (Wu, 1984). И рыбаки, и ученые-философы того времени оценивали субъективный «шок» от торпеды и лейденской банки как один и тот же (Piccolino, Bresadola, 2002). Более того, если бы группа людей образовала кольцо, взявшись за руки, каждый почувствовал бы удар торпеды, как это произошло с лейденской банкой. Электрические рыбы потерпели неудачу в одной ключевой области — они не могли (пока еще) произвести важнейшую «искру», которая характеризовала электрическую силу.

Войдите в электрического угря. Поскольку пиковый электрический потенциал торпеды (50 вольт) намного ниже, чем у угря (400–600 вольт), было очень трудно получить от первого искру, пересекающую зазор. В 1775 году Джон Уолш экспериментировал с угрями и неоднократно демонстрировал искру своим коллегам и посетителям (Piccolino and Bresadola, 2002). Это был поворотный момент в истории науки, с которого началась физиология животных.

Но эксперименты Джона Уолша ни в коем случае не положили конец одержимости научного сообщества электрическими угрями.Другие пошли по его стопам, в том числе Александр фон Гумбольдт и Майкл Фарадей. Гумбольдт сообщил много подробностей о том, как и когда удары током передавались от угрей к людям (фон Гумбольдт, 1806), но, безусловно, его самая известная связь с угрями заключалась в нетрадиционном способе, которым он (предположительно) получал образцы. Путешествуя по Южной Америке, Гумбольдт стремился найти угрей, но поначалу мог получить только отравленных животных, которые были бесполезны для изучения. В конце концов ему удалось нанять рыбаков, которые сказали ему, что будут «рыбачить с лошадьми.Как гласит история (фон Гумбольдт, 1807 г.), рыбаки загнали около 30 лошадей и мулов в бассейн с угрями, и завязалась зрелищная битва. Рыбаки сдерживали лошадей в бассейне, а угри атаковали. Две лошади погибли в течение 5 минут, а другим удалось спастись и рухнуть на землю рядом с прудом. Гумбольдт думал, что все оставшиеся лошади будут убиты, но прежде чем это могло произойти, угри были истощены. По-видимому, в этом и заключалась цель учений, поскольку рыбаки смогли благополучно собрать пять экземпляров для Гумбольдта.Не все поверили его истории, но теперь она подтверждается недавними открытиями, которые будут рассмотрены здесь.

Значительно более поздние попытки Фарадея заняться исследованиями угрей включали тщательное исследование многих параллелей между электрическими явлениями и разрядами угрей. Его результаты, полученные, возможно, от выдающегося электрика того времени, укрепили веру в электричество животных. Он также опубликовал несколько пророческих наблюдений за поведением угрей с интерпретациями, которые, как и в случае отчетов Гумбольдта, подтверждаются недавними исследованиями (Фарадей, 1838 г.).

Несмотря на многовековой научный интерес к электрическим угрям, у этого вида еще есть чему поучиться. Ниже приводится краткое изложение недавней работы автора по изучению поведения электрического угря и воздействия его электрического разряда органов (EOD) на находящихся рядом животных. Это исследование началось просто как фотопроект, но превратилось в многолетнее научное исследование.

Новый взгляд на функцию EOD

У электрических угрей есть две формы EOD

Электрические угри представляют собой информативный пример сильно электрических рыб, потому что они уникальным образом испускают два разных типа EOD (Coates et al., 1940; Буллок, 1969 год; Бауэр, 1979). Каждый из них имеет одинаковую форму, состоящий из монофазного импульса длительностью примерно 1 мс, но один из них намного сильнее другого. На рис. 1 показаны эти два разных выхода на одной трассе поведения угря, записанной с электродов в аквариуме. Низковольтный выход у покоящегося угря происходит с низкой скоростью, но может излучаться с частотой 10–20 Гц, когда угорь возбужден и охотится (Bauer, 1979). ЭОП высокого напряжения намного сильнее и излучается с частотой до 500 Гц. Считалось, что эти два разных EOD представляют собой сохранившиеся примеры двух разных функций: разряды низкого напряжения, используемые для активной электрорецепции (и, возможно, связи), и разряды высокого напряжения, используемые в качестве оружия.Как читатель увидит ниже, недавние исследования показали, что в этой истории есть нечто большее.

Рисунок 1 . Разряд электрического органа (ЭОР) и его влияние на жертву. (A) Запись, показывающая два разных EOD электрического угря. Каждый из них представляет собой монофазный положительный импульс длительностью примерно 1 мс. Выход низкого напряжения (стрелка) происходит с низкой скоростью. Выход высокого напряжения (стрелка) намного сильнее и происходит с гораздо большей частотой залпами до 500 Гц во время хищнического удара.Для обороны также используются высоковольтные залпы. (B) Приближающийся угорь вызывает у золотой рыбки реакцию побега C-start, но золотая рыбка обездвижена залпом высоковольтных импульсов (красные кадры) и захвачена в течение 200 мс. (C) Аналогичная встреча, во время которой рыба не была обездвижена и, таким образом, быстро опередила угря. На последнем кадре (крайний справа) это расстояние между угрем и рыбой увеличилось, а скорость добычи больше, чем скорость угря (из Catania, 2015a, воспроизведено с разрешения).

Механизм, посредством которого электрические угри генерируют либо слабую, либо сильную ЭОП, был определен довольно подробно (Bennett, 1968, 1970). Учитывая аналогичную форму двух выходов, возможно, неудивительно, что слабый EOD излучается простой активацией подмножества электроцитов угря (электроциты угря разделены между тремя различными электрическими органами, которые здесь называются электрическими органами угря). для простоты). Удивительно, но потенциал действия посылается на каждый электроцит в теле угря, когда испускается слабый EOD.Но для большинства электроцитов возбуждающие постсинаптические потенциалы являются подпороговыми и не приводят к возникновению потенциала действия электроцитов. Таким образом, слабый EOD является результатом подмножества низкопороговых электроцитов, которые могут быть активированы одним потенциалом действия двигательного нейрона. Высоковольтный EOD испускается просто путем отправки очень высокой скорости потенциалов действия на все те же электроциты. Это, в свою очередь, приводит к временной суммации в высокопороговых электроцитах, так что каждый электроцит в теле угря активируется.Благодаря этому простому механизму генерации EOD двух разных сил каждому высоковольтному залпу (обязательно) непосредственно предшествует одиночный низковольтный, слабый EOD (Bauer, 1979).

Высоковольтные устройства обезвреживания угря временно обездвиживают добычу

Недавние высокоскоростные видеозаписи охоты на электрических угрей выявили необычную реакцию хищной рыбы, наэлектризованной залпами высокого напряжения (Catania, 2014). В течение 3–4 мс после первого EOD в залпе все произвольные движения жертвы прекращались, и рыба плавала «как статуэтка» с неподвижными плавниками и телом на протяжении всего залпа (вскоре после этого рыба неизменно попадала в руки угря).Даже когда рыба находилась в состоянии быстрого побега и сгибалась в форме буквы С, высокое напряжение замораживало все последующие движения тела. Это было удивительно, потому что легко представить себе электрические импульсы высокого напряжения, вызывающие некоторую форму движения, а не неподвижность. Когда удар угря не попал в рыбу и высоковольтный залп был прекращен, большинство рыб немедленно возобновили бегство. Таким образом, добычу обычно не убивали и не калечили.

Потенциальным объяснением этого эффекта была индукция мышечного сокращения с помощью EOD, по аналогии с TASER правоохранительных органов. Эта возможность была исследована с использованием препарата из цельной рыбы, погруженного в аквариум с угрем, но разделенного электропроницаемым агарозным барьером (Kalmijn, 1971). Рисунок 2 иллюстрирует препарат, который был использован. Сначала рыбу анестезировали и вырезали сердцевину, чтобы разрушить мозг, а отверстие запечатывали цианоакрилатом. Этот препарат с мышцами, которые оставались жизнеспособными на протяжении всего эксперимента, затем прикрепляли к датчику силы, расположенному над водой. Высоковольтные залпы легко и многократно вызывались у ближайшего угря, просто кормя его дождевыми червями в соседней камере.

Рисунок 2 . Парадигма и результаты измерения мышечного напряжения добычи, вызванного угрем. (A) Для измерения напряжения мышц добычи рыбу с сердцевиной прикрепляли к датчику силы, а угря (за барьером из агара) кормили дождевыми червями (которых он поражал залпами высокого напряжения). (B) Начало напряжения рыбы (зеленый цвет) происходило примерно через 3 мс и в целом было похоже на максимальное напряжение всего тела рыбы, которое можно было вызвать путем прямой стимуляции (оранжевый след) с помощью стимулятора SD9 Grass. (C) Для сравнения реакции двух разных рыб в различных условиях (см. Catania, 2014) два датчика силы были помещены рядом. (D) Парадигма двойной рыбы неожиданно показала, что длинные интервалы между импульсами угря приводят к почти идентичным образцам (зеленые и синие следы) отдельных подергиваний у двух соседних рыб. (E) Общая реакция напряжения у двух рыб также была сходной в более сжатом временном масштабе (синяя и зеленая кривые, разные случаи из « D »). (F) Расширенная временная шкала показывает заметное влияние дуплетов угря — близко расположенных EOD (стрелки) на соответствующее напряжение рыбы. Это говорит о том, что дублеты обладают таким же сильным вызывающим напряжение эффектом у рыб, как и другие экспериментальные препараты (из Catania, 2015a, воспроизведено с разрешения).

Результаты этого эксперимента показали, что угри вызывают массивные сокращения мышц всего тела (рис. 2). Сравнивая сокращения, вызванные угрями, с сокращениями, вызванными прямой стимуляцией стимулятором Grass SD9, было показано, что угри вызывают сильное напряжение всего тела, подобное тому, которое вызывает стимулятор с проводами, непосредственно подключенными к телу рыбы.Предположительно, статный вид добычи во время залпа угря является результатом одновременного сокращения одинаково мощных мышц туловища с обеих сторон рыбы. Важность этой способности становится очевидной, если сравнить успешно ускользающую рыбу со следом рыбы, обездвиженной угрем во время атаки (рис. 1В, С). Обычно очевидно, что активная рыба ускользнула бы (см. также Catania, 2014, 2015a). Это не означает, что нападение угря происходит медленно, скорее убегающая рыба происходит быстро.

Угри вызывают мышечное напряжение, дистанционно активируя двигательные нейроны жертвы

Открытие того, что электрические залпы высокого напряжения вызывают мощные сокращения мышц всего тела у ближайшей жертвы, сразу же подняло дополнительный вопрос: каков был механизм активации мышц? Двумя наиболее вероятными вариантами были либо прямая деполяризация мышц жертвы, либо, альтернативно, активация связанных двигательных нейронов. Этот вопрос был решен с использованием двух препаратов рыбы, расположенных бок о бок, прикрепленных к датчикам силы, так что один служил контролем, а другой можно было фармакологически манипулировать (рис. 2).Когда одному препарату вводили инъекцию кураре для блокирования нервно-мышечного синапса, а другому вводили имитацию, мышечные сокращения в ответ на залпы угря устранялись в первом случае, но не во втором (Catania, 2014). Это продемонстрировало, что залпы высокого напряжения не вызывали прямой деполяризации мышц жертвы. Затем эксперимент был расширен путем протыкания спинного мозга рыбы (двойное прокалывание). Не было никакой разницы в латентном периоде или величине напряжения у рыб с двумя сердцевинами по сравнению с рыбами с мозговой сердцевиной, что указывает на то, что спинной мозг не необходим для реакции мышц рыб.Эти эксперименты показали, что электрические угри обездвиживают добычу, дистанционно активируя периферические ветви двигательных нейронов.

Как это часто бывает, описанные выше эксперименты также выявили непредвиденные детали механизма. Электрических угрей, используемых для активации приготовления рыбы, неоднократно кормили дождевыми червями, чтобы вызвать много залпов высокого напряжения. Со временем некоторые угри, по-видимому, стали утомляться, поскольку скорость их высоковольтной ЭОД замедлилась, а межимпульсный интервал стал непостоянным.В этих случаях на следах натяжения в близлежащих препаратах подопытных рыб возникали отдельные подергивания. Более того, при приготовлении рыбы бок о бок подергивания были почти идентичными (рис. 2E, F). Эти результаты показали, что каждый высоковольтный EOD от электрического угря обычно приводит к возникновению потенциала действия в двигательных нейронах ближайшей жертвы. Высокие частоты EOD приводят к слитому мышечному напряжению, тогда как более низкие частоты выявляют отдельные подергивания, как это наблюдалось бы в лаборатории мышечной физиологии.

Последствия этих результатов поразительны. В конечном счете, двигательные нейроны электрического угря активируют мышцы соседнего животного по принципу «один к одному». Усиливая «сигнал» от собственного двигательного нейрона, электроциты угря обеспечивают механизм дистанционного управления другим животным. В некотором смысле, высоковольтный разряд угря можно рассматривать как потенциал действия, распространяющийся по воде и предназначенный для активации двигательных нейронов любого находящегося поблизости животного.

Удивительно, но в ретроспективе эти результаты могли быть предсказаны на основе аналогичного механизма, лежащего в основе функции TASER правоохранительных органов, или механизма более часто используемых парадигм чрескожной электрической стимуляции нервов (TENS), используемых для терапии мышц человека (Sweeney, 2009). ).

Этот механизм вывода добычи из строя предполагает, что новое понимание может быть получено при рассмотрении залпа угря с точки зрения двигательных нейронов добычи. Например, на рис. 3 показан средний межимпульсный интервал для высоковольтных залпов трех разных электрических угрей. В каждом случае достоверно (статистически) более короткий межимпульсный интервал обнаруживался для первых двух разрядов в залпе. Как оказалось, многочисленные исследования нервно-мышечных систем показали, что скорость мышечного сокращения может быть максимизирована за счет включения двух близко расположенных потенциалов действия в начале цепочки двигательных нейронов.Их называют дублетами (Celichowski, Grottel, 1998; Cheng et al., 2013; Pedersen et al., 2013). Более детальное исследование оптимальной последовательности двигательных нейронов для максимального мышечного напряжения (Zajac and Young, 1980a, b) выявило паттерн потенциалов действия, который по форме подобен первой части залпа электрического угря. Это повышает вероятность того, что залпы угрей были специально выбраны, чтобы наиболее эффективно вызывать быстрые и мощные мышечные сокращения у находящихся поблизости животных и, следовательно, наиболее быстро обездвиживать животных, которые в противном случае могли бы убежать.

Рисунок 3 . Средние межимпульсные интервалы для электрических угрей разного размера. Самые длинные межимпульсные интервалы (красные) соответствовали самому маленькому угрю (50 см), интервалы средней длины – среднему угрю (около 75 см), а самые короткие интервалы (синие) – самому крупному угрю (115 см). Для каждого образца первый межимпульсный интервал был самым коротким. Бары — стандартная ошибка. Дополнительные статистические данные см. в Catania (2014) (из Catania, 2015a, воспроизведено с разрешения).

В качестве альтернативы, поскольку электроциты угря происходят из мышц и иннервируются моторными нейронами, выход моторных нейронов угря (и, следовательно, его EOD) может быть ограничен способом, сходным с таковым для широкого круга нервно-мышечных систем. Иными словами, сходство между началом EOD угря и оптимальной последовательностью двигательных нейронов, обнаруженной для максимальной активации мышц, может отражать ограничение обеих систем при пиковой выходной мощности. И все же это кажется маловероятным, учитывая невероятную вариативность формы и скорости EOD, проявляемую разнообразием электрических рыб.Кроме того, у электрических угрей есть еще один способ дистанционного управления добычей, который также, по-видимому, использует оптимальную стратегию.

Угри испускают высоковольтные дублеты, чтобы вызвать движение затаившейся добычи

В 1979 г. были посмертно опубликованы результаты проведенного Бауэром исследования охотничьего поведения электрического угря и EOD (Bauer, 1979). Он сообщил, что: «Введение добычи в аквариум возбуждает угря, заставляя его плавать вокруг, но часто останавливаясь в определенном углу аквариума.Во время этих остановок излучаются два высоковольтных импульса с интервалом около 2 мс». Он сообщил, что такое поведение типично для охоты на угрей.

Наблюдения Бауэра приобрели новое значение в свете описанных выше механизмов, с помощью которых угри активируют двигательные нейроны у ближайшей жертвы при каждом высоковольтном разряде (Catania, 2014). Это особенно верно, учитывая, что дублеты в начале серии потенциалов действия двигательных нейронов особенно эффективны и вызывают мощные мышечные сокращения.Все угри, использованные в недавних исследованиях (описанных здесь), испускали дублеты во время охоты, и это было частым поведением во время описанных выше экспериментов по напряжению мышц рыб. Как и следовало ожидать, дублеты приводили к массовым подергиваниям всего тела в ближайших препаратах рыбы (рис. 4А). В некоторых случаях, выпустив дублет, угорь пытался прорваться через тонкий агарозный барьер (укрепленный нейлоновой сеткой), чтобы добраться до рыбы.

Рисунок 4 .Использование дублетов в хищническом поведении угря. (A) Пример изолированного дублета (красный), вызывающего сильное напряжение (синий) у соседней рыбы с сердцевиной, прикрепленной к датчику силы. (B) Схема выхода дуплета с последующим движением добычи (подергиванием) и затем полным высоковольтным залпом. (C) Схема парадигмы, используемой для исследования использования дублетов во время охоты. Рыба с сердцевиной была заключена в пластиковый пакет и подключена к травяному стимулятору SD9, который мог вызывать подергивания, когда угорь испускал дублет. (D) Дублет сопровождался полным залпом (и хищническим ударом), если подергивание немедленно запускалось через стимулятор (верхняя кривая), но при отсутствии подергивания добычи атак не вызывалось (не показано). В отсутствие дублетов полные залпы и удары могли быть вызваны случайно сгенерированными подергиваниями рыбы (внизу). (E) Схематическое изображение использования дублетов для обнаружения добычи при обычной охоте (из Catania, 2015a, воспроизведено с разрешения).

Контекст, во время которого испускались дублеты, и предварительные наблюдения за поведением позволили предположить, что дублеты могут функционировать, вызывая движения добычи, которые обнаруживаются невромастами угря (механорецепторами). Электрические угри чрезвычайно чувствительны к движениям воды и часто отвечают высоковольтным залпом и ударом. Кроме того, угри, охотящиеся на живую добычу в сложных условиях (или когда жертва находилась под агарозным барьером), иногда испускали дублет, в результате чего добыча дергалась, за которой (через 20–40 мс) следовал полный столбняк угря, вызывающий высоковольтное возбуждение. залп и всасывающая подача удара (рис. 4В).

Чтобы определить, используют ли угри дублеты для обнаружения индуцированных движений добычи, требовалась парадигма, в которой реакция жертвы находилась под контролем экспериментатора. Это было достигнуто с использованием варианта приготовления рыбы без сердцевины (рис. 4C, D). В этом случае к рыбе подключали стимулятор, а препарат запечатывали в полиэтиленовый пакет таким образом, чтобы рыбный препарат был электрически изолирован от угря. Затем стимулятор управлялся с помощью блока сбора данных, который отслеживал EOD угря, так что подергивание рыбы могло запускаться в ответ на дублет (или не запускаться, по усмотрению исследователя).

Первым вопросом, который необходимо решить, была латентность реакции угря на подергивание рыбы. Если бы угри реагировали на подергивание рыбы в своем естественном охотничьем поведении, то время их реакции должно было бы находиться в диапазоне 20–40 мс. На самом деле так оно и оказалось. При приближении угрей к рыбному препарату и включении исследователем стимулятора угри реагировали на подергивание высоковольтным залпом и ударяли в сторону препарата с задержкой 20–40 мс.

Когда угри испустили дуплеты рядом с рыбным препаратом, но не вызвали подергивания рыбы, атака не была выявлена. Более того, угри никогда не давали дублетов, за которыми следовал полный залп, при отсутствии подергиваний рыбы. Тем не менее, ключевой эксперимент заключался в том, чтобы настроить блок сбора данных так, чтобы он немедленно вызывал подергивание рыбы, когда угорь издавал дуплет. Когда это было устроено, было воссоздано естественное поведение охоты на дублетов (рис. 4). Угри дали дуплет, рыба дернулась (в результате срабатывания ЭОД стимулятора) и затем угри атаковали полным залпом и ударили в сторону рыбной заготовки.Ряд контрольных экспериментов подтвердил, что угри не реагировали на визуальные сигналы от движущейся рыбы или электрические импульсы от проводов стимулятора (Catania, 2014).

Замечательный вывод из этих экспериментов состоит в том, что у угрей есть два режима дистанционного управления добычей. При обнаружении ближайшей рыбы полный залп высоковольтных импульсов вызывает быстрые и мощные сокращения мышц, препятствующие побегу. Когда добыча спрятана или ее личность неизвестна, угри могут вызывать непроизвольные подергивания, указывая на свое приблизительное местонахождение (рис. 4Е).По сути дублет позволяет угре задать вопрос находящемуся рядом предмету: жив ли ты? У жертвы нет выбора, кроме как ответить.

Ранее предполагалось, что и сильноэлектрические сомы (Belbenoit et al., 1979), и сильноэлектрические торпеды также могут использовать такую ​​стратегию охоты (Belbenoit and Bauer, 1972). Первое предположение было сделано из записей охоты на сома в дикой природе, во время которой некоторым залпам предшествовали короткие предварительные залпы. Удивительно, однако, что Майкл Фарадей (используя только свои руки) сделал вывод о способности электрического угря обнаруживать и атаковать вызванное EOD движение в 1838 году.Его описание настолько дальновидно, что кажется невероятным, особенно учитывая ограничения его снаряжения. Я цитирую его комментарии полностью здесь: « Gymnotus кажется разумным, когда он ударил током животное, осознав это, вероятно, благодаря получаемым им механическим импульсам, вызванным спазмами, в которые его бросает » ( Фарадей, 1838 г. ).

Активная электрорецепция от Electric Eels

Как описано выше, у электрических угрей есть EOD как низкого, так и высокого напряжения.Несомненно, первое наблюдение активной электрорецепции относится к экспериментам Уолша на электрических угрях в 1770-х годах (см. Wu, 1984). Уолш заметил, что, когда два провода были помещены в воду с электрическим угрем и вытянуты на некоторое расстояние от контейнера, угорь смог определить, когда два провода были соединены. Угорь ответил залпом высокого напряжения.

В то время никто не знал о низком напряжении EOD, которое постоянно излучается, когда угри исследуют свое окружение (что почти наверняка было основой способности угря).Объяснение не было доступно до тех пор, пока Лиссманн (1958) не показал, что слабоэлектрические рыбы используют низковольтные ЭОП для активной электрорецепции. Вскоре после открытия Лиссмана Хагивара и др. (1965) исследовали физиологические свойства электрорецепторов угря и пришли к выводу, что низковольтная ЭОД фактически использовалась для активной электрорецепции (см. также Кейнс и Мартинс-Феррейра, 1953).

Открытие Лиссманом активной электрорецепции дало недостающее функциональное промежуточное звено, необходимое для объяснения эволюции сильноэлектрических видов.Таким образом, для электрических угрей было легко представить себе эволюционную траекторию. Их предки предположительно использовали электрический орган для навигации, и он постепенно увеличивался, чтобы обеспечить электрическое оружие (как отмечалось ранее, электроциты угря фактически разделены между тремя отдельными органами). Сохранение низковольтной ЭОП для активной электролокации, казалось, хорошо вписывалось в такую ​​функциональную раздвоенность: низковольтная для электролокации и высоковольтная для нападения и обороны. По мнению автора (до 2015 г.), нерешенным вопросом было то, как чувствительные электрорецепторы угря справились с залпами высокого напряжения, при этом предполагалось, что электрическое чувство полностью отключалось во время высоковольтного EOD.Последние данные показывают, что это не так.

Использование высокого напряжения для активной электрорецепции

Напомним, электрические угри не хватали электрически изолированную добычу в ходе экспериментов по охоте на дублет, описанных выше. Вместо этого забастовки были прерваны без окончательного «укуса». Это было очевидно, потому что электрические угри дышат воздухом и задерживают воздух во рту между вдохами. В результате их всасывающее питание сопровождается внезапным выбросом воздуха из жаберной крышки.Это было случайностью, так как во время экспериментов более очевидным было отсутствие конечного компонента удара. Перед описанием следующих экспериментов важно еще раз подчеркнуть, что хищнические удары электрического угря происходят в сочетании с высоковольтным залпом; во время удара отсутствуют низковольтные ЭОП. Таким образом, свидетельство продолжающейся активной электрорецепции во время удара должно быть связано с высоковольтным EOD.

В качестве предварительной проверки возможности использования электрическими угрями высоковольтного ЭОД для активной электрорецепции рядом с электрически изолированным препаратом рыбы помещали проводящий углеродный стержень (для интерпретации этого эксперимента важно отметить, что жертвы являются проводниками, таким образом, угольный стержень был «заменой» предмета добычи). Активировав стимулятор, рыбу заставили подергиваться, а затем угорь выпустил высоковольтный залп и ударил электрически изолированную рыбу, как описано ранее. Но на этот раз угорь изменил курс, перелетел через проводник, прорвал агарозный барьер и всосал в свои челюсти токопроводящий стержень (см. фильмы в Катании, 2015b). Эта резко отличающаяся реакция в присутствии проводника предполагает, что угри зависят от высоковольтного EOD, чтобы направлять свои удары во время нормального хищнического поведения.

Чтобы проверить эту возможность более строго, был придуман ряд дополнительных экспериментов. Первой была разработка парадигмы углеродного стержня. Был изготовлен аппарат, вмещающий семь различных стержней одинаковой формы и внешнего вида (рис. 5). Один стержень был углеродным проводником (имитация добычи), а остальные шесть стержней были пластиковыми диэлектриками. Затем рыбный препарат с сердцевиной (электрически изолированный в пластиковом пакете) помещали под угольные стержни, и весь аппарат покрывали тонким агарозным барьером, который не блокировал механосенсорные сигналы. В этих условиях подергивание рыбы может быть вызвано либо экспериментатором, запускающим стимулятор, либо блоком сбора данных, запускающим стимулятор в ответ на дублет. Электрические угри реагировали на подергивание рыбы залпом и ударом высокого напряжения. В каждом случае удар направлялся, часто окольным путем, в проводника, который затем подвергался яростной атаке с помощью всасывающего кормящего укуса (это быстрая серия событий, анализируемых в замедленном темпе из высокоскоростного видео).

Рисунок 5 . Парадигма, показывающая, что электрические угри находят проводников и атакуют их. (A) Запись и конфигурация стимулятора, которые вызывают подергивание зубчатой ​​рыбы и атаку угря в присутствии шести пластиковых стержней и одного проводника (стрелка). (B) Пластины из высокоскоростного видео (вверху) и в реальном времени (внизу) одного и того же испытания, иллюстрирующие окольный путь к проводнику. (C) Разряд низкого и высокого напряжения угря, отмеченный короткими и высокими галочками соответственно, иллюстрирующий исключительное использование высокого напряжения во время ударного движения. (D) Путь угря к проводнику (из Катании, 2015b, воспроизведено с разрешения).

Эти эксперименты, казалось, подтвердили, что электрические угри используют свой высоковольтный EOD для активной электрорецепции. Однако вывод несколько экстраординарен, и поэтому были проведены дополнительные эксперименты, чтобы предоставить максимально четкие доказательства (Catania, 2015b). Для этих дополнительных экспериментов небольшой (диаметром 2,5 см) угольный диск вставляли в больший (диаметром 16,5 см) диск, который механически приводили во вращение под агарозным барьером (рис. 6).Три непроводящих пластмассовых диска того же диаметра и внешнего вида также были вставлены в больший вращающийся диск в качестве контрольных стимулов. Устройство освещалось невидимым инфракрасным светом с длиной волны 940 нм, а инфракрасные диоды с длиной волны 940 нм (управляемые через блок сбора данных) были сконфигурированы для индикации каждого EOD низкого напряжения и каждого EOD высокого напряжения. Эта парадигма обеспечивала избыточный контроль зрения и предотвращала контакт и химические сигналы благодаря электрически проницаемому агарозному барьеру.Угри атаковали движущегося проводника (имитацию добычи) с помощью всасывающих ударов (после первоначальных атак угри получали вознаграждение после каждого удара, чтобы поддерживать поведение). Результаты этих и дополнительных экспериментов ясно показали, что электрические угри могут быстро отслеживать проводники, движущиеся по криволинейной траектории, используя свои высоковольтные ЭОП. Более того, угри могли отслеживать проводники с большей скоростью, чем ранее сообщалось об активной электрорецепции у других видов (Maciver et al., 2001).

Рисунок 6 . Отслеживание проводника угря в ИК-подсветке с длиной волны 940 нм. (A) Схема парадигмы и тарелок, показывающая поведение угря по следу и всасывающую подачу проводника. (B) Разряд низкого и высокого напряжения угря, отмеченный короткими и высокими галочками соответственно, иллюстрирующий исключительное использование высокого напряжения во время ударного движения. (C) След угря относительно движения проводника. На вставке показано отверстие в агаре (стрелка), которое было непосредственно над проводником в начале всасывания (из Catania, 2015b, воспроизведено с разрешения).

Детали отслеживания проводников показывают, что активная электрорецепция с использованием высокого напряжения является неотъемлемой частью забастовки. Оглядываясь назад, кажется очевидным, что для точного удара угря необходима некоторая форма сенсорной обратной связи. Хотя EOD высокого напряжения предотвращает движение мышц жертвы, оно не препятствует продолжению движения быстро движущейся рыбы в воде после того, как произвольное поведение было остановлено. Кроме того, взрывное движение головы угря по воде к добыче вызывает значительное дополнительное движение воды.В результате жертвы часто становятся быстро движущимися целями, даже после того, как их мышцы были неактивны. Наконец, маловероятно, что короткое, отдаленное движение воды, вызванное добычей, которое часто вызывает удар угря, дает необходимую информацию о местоположении для точной атаки. Активная электрорецепция во время удара решает для угря эти проблемы.

Пересмотр эволюционной траектории

Стоит вспомнить обсуждение Дарвином электрических рыб в разделе «Происхождение видов», посвященном трудностям теории (Darwin, 1873).Электрические рыбы считались проблемой отчасти потому, что не было очевидной пользы для маленьких электрических органов, занимавших промежуточное положение между мышцами и большими электрическими органами угрей и скатов. Использование последнего для нападения и защиты было очевидным, но преодолеть «функциональный разрыв» между сокращением мышц и высоковольтным оружием было проблематично. Открытие Лиссманном активной электрорецепции у слабоэлектрических рыб, казалось, разрешило эту часть эволюционной загадки (Lissmann, 1958).Но нынешние результаты показывают, что у угрей есть нечто большее. Активная электрорецепция с использованием высокого напряжения показывает, что в случае угрей электрический орган не просто перешел от сенсорной функции к оружию. Скорее всего, он добавил роль оружия, сохранив при этом свою сенсорную функцию.

Этапы этого эволюционного процесса, конечно же, утеряны для истории. Но интересно рассмотреть, помимо его роли оружия, возможность того, что высокое напряжение угря играет важную роль в половом отборе (ухаживании), территориальности или общении.Assunção и Schwassmann (1995) смогли идентифицировать гнезда размножающихся угрей и обнаружили, что они были построены самцами и впоследствии защищены. Хотя они не наблюдали возможного ухаживания или территориальности, это кажется интересной возможностью для изучения в будущем в контексте EOD.

Работа с трудной добычей

Дипольная атака

До сих пор хищническое поведение электрических угрей было описано и проиллюстрировано так, как это обычно происходит, когда угря кормят золотыми рыбками в аквариуме.Но электрические угри живут в Амазонке, где обитает большое разнообразие видов рыб и другой потенциальной добычи. На удивление мало известно о питании электрических угрей в их естественной среде обитания, но очевидно, что кормящиеся золотые рыбки не являются их самой сложной добычей. Более того, у молодых угрей электрические органы намного меньше и слабее, и им трудно справляться даже с мелкой рыбой.

В случаях, когда встречается трудная добыча, электрические угри идеально подходят для стратегии, которая увеличивает интенсивность их атаки.Это связано с тем, что, в отличие от сильно электрических скатов или сомов, электрический орган угря линейный и проходит через его длинное тонкое тело. Это означает, что положительные и отрицательные полюса (голова и хвост соответственно) широко разнесены в пространстве. Во время типичной атаки хищника электрический разряд угря образует (примерно) дипольное поле вокруг угря. Положительный полюс — это область вокруг головы угря, а отрицательный полюс — область вокруг хвоста (рис. 7А, В). Рыба возле головы угря испытывает влияние положительного полюса и почти не испытывает воздействия более удаленного отрицательного полюса вокруг хвоста.В самом деле, для рыбы, находящейся прямо перед угрем — когда тело угря прямое — влияние отрицательного полюса (хвоста) будет вычитаться из действия положительного полюса, уменьшая силу локального поля.

Рисунок 7 . Дипольное поле и дипольная атака. (A) Схематическое изображение дипольного поля, окружающего электрического угря, и его изменение в конфигурации (B) после того, как угорь сблизил два полюса. Линии обозначают линии электрического поля (на положительный пробный заряд будет действовать сила, касательная к линии в любой точке — в направлении отрицательного полюса). (C) Схематическое изображение электродов с неизолированным проводом (стрелки) на расстоянии примерно 1 см друг от друга. (D) Вид угря, крепко держащего препарат электрод-рыба. (E) Схема расположения электродов во время испытания. (F) Крупный угорь представлен с прожилками рыбы с электродами. После поимки экспериментатор вручную покачивал проволоку, чтобы имитировать борьбу добычи, а угорь извивался, чтобы произвести несколько разрядов. (G) Напряжения, записанные с электрода в разные моменты во время атаки угря. Черные галочки указывают на разряды в «развернутом состоянии». Все красные галочки были зафиксированы во время скручивания. Обратите внимание на резкое увеличение зарегистрированного напряжения и частоты разряда во время скручивания по сравнению с нескрученной конфигурацией (из Catania, 2015c, воспроизведено с разрешения).

Однако все резко изменилось бы, если бы угорь свернулся клубочком и приблизил хвост к добыче. В таком случае эффект хвоста (отрицательного полюса) будет аддитивным (поскольку жертва будет зажата между двумя полюсами) и сильным (поскольку отрицательный полюс будет рядом), а не вычитающим и слабым.Теоретический эффект такого закручивающегося движения должен был бы удвоить интенсивность электрического поля, испытываемого добычей, практически бесплатно для угря.

На самом деле, электрические угри обычно скручиваются при обращении с трудной добычей (Catania, 2015c). Молодые угри часто скручиваются при нападении на любую добычу, тогда как взрослые особи скручиваются, когда берутся за трудную, сопротивляющуюся добычу или когда они поймали рыбу, которую держат ненадежно и в противном случае могут убежать. Хотя базовая физика дипольных полей предсказывает эффект такого скручивания, был проведен ряд экспериментов для непосредственного измерения результирующего электрического поля и его воздействия на добычу (Catania, 2015c).

Измерение напряженности поля во время скручивания угря

Измерение меняющейся интенсивности электрического поля, испытываемого жертвой во время нападения угря, может показаться сложной задачей. Обычный метод мониторинга EOD электрических рыб с электродами, стационарными в аквариуме, не может предоставить данные о локальной напряженности поля внутри и вокруг добычи. Точно так же исследователь не может гоняться за охотничьим угрем с электродами в надежде получить полезные данные. Эта проблема была решена за счет агрессивной хищнической атаки угря.

Для измерения электрического поля внутри жертвы снова использовали рыбный препарат без сердцевины. Однако в этом случае рыба была насажена на изготовленный на заказ пластиковый держатель электрода (рис. 7С). Регистрирующие электроды представляли собой два витка тонкой медной проволоки, расположенные на расстоянии 1 см друг от друга на длинном выступе Т-образного электрододержателя. Тонкие изолированные провода от электродов вели к блоку сбора данных, который регистрировал электрический потенциал. В то же время изолированные провода представляли собой удобную рукоятку, очень похожую на леску, которой исследователь мог манипулировать.Наконец, верхняя часть Т-образного электрододержателя предохраняла угря от проглатывания препарата.

Когда этот препарат был введен голодному угрю, он подвергся нападению, всосался в рот угря и очень крепко сжался (рис. 7D, E). Это состояние, вероятно, имитирует естественные ситуации, когда рыба-жертва с защитными шипами была поймана, но ее трудно проглотить. Вибрируя электроды вручную, исследователь смог имитировать борьбу пробкового препарата рыбы-электрода, и это вызвало скручивание угря.

Препарат предоставил данные о многочисленных угрях, показывающие, что интенсивность электрического поля, испытываемого добычей, часто более чем удваивалась, когда угорь скручивался (рис. 7F, G). Напомним, что электрические угри не могут увеличивать величину своей общей выходной мощности во время высоковольтных залпов, напротив, каждый электроцит активен во время каждого высоковольтного ЭОД (см. выше). Следовательно, увеличение измеренной напряженности поля произошло в результате реконфигурации электрического поля. Электрическое поле, так сказать, концентрировалось через добычу, подобно фокусировке фиксированной мощности фонарика на меньшую площадь.

Может показаться удивительным, что во многих случаях напряженность поля внутри добычи более чем удваивалась, когда угорь скручивался. Вероятно, это произошло потому, что хвост, содержащий отрицательный полюс, можно поднести к добыче очень близко (фактически касаясь), в то время как положительный полюс электрического органа расположен на некотором расстоянии позади передней части головы угря (чтобы освободить место для внутренние органы угря). Следовательно, отрицательный полюс (с эффектом, который добавляется к положительному полюсу) может иметь больший эффект, основанный на близости, чем положительный полюс во время скручивания.

Какую пользу дает такое поведение угрю? Хотя он усиливает электрическое поле через добычу, у большого электрического угря, похоже, достаточно энергии только от положительного полюса. Так было, когда угрю предложили золотую рыбку. Но когда электрическому угрю предлагали крупных раков, первоначальная атака угря иногда терпела неудачу, и раки выполняли соответствующую реакцию побега (рис. 8). Очевидно, что некоторые жертвы более устойчивы к электричеству, чем другие. Керлинг обеспечивает механизм для электрификации добычи, которая как физически, так и электрически более резистивна.И все же, какова конечная функция скручивания угря? В ретроспективе ответ кажется очевидным.

Рисунок 8 . Кадр из видео, на котором угорь нападает на раков. Отметим, что, несмотря на сравнительно крупные размеры угря и способность вызывать столбняк у большинства рыб своим высоковольтным разрядом, реакция побега раков не была отменена. Соответствующая форма бокового бегства гиганта от атаки сзади указывает на то, что движение рака не было вызвано произвольной стимуляцией выделениями угря. Это говорит о том, что раки более устойчивы к электрическим разрядам (из Catania, 2015c, воспроизведено с разрешения).

Индукция непроизвольной усталости

Вспомним, что высоковольтные разряды электрических угрей активируют эфференты моторных нейронов и, следовательно, мышцы ближайшей добычи. В препарате из рыбы с сердцевиной это измерялось на основе напряжения всего тела рыбы. Раки дают другое представление об этом эффекте, потому что многие из их парных мышц асимметричны: мышцы, закрывающие клешни, более мощные, чем мышцы, открывающие их.В результате эффект повторяющихся высоковольтных залпов от угря, электризующих раков, был очевиден. В отличие от ситуации у рыб, где сокращение симметричных мышечных групп приводило к полной неподвижности, у речных раков можно было наблюдать раскрытие и смыкание клешней с повторяющимися высоковольтными залпами (см. видео в Catania, 2015c).

Это наблюдение указывает на результат, на который стоит обратить внимание в контексте поведения угря, скручивающегося в клубок. Высоковольтные EOD приводят к взаимной активации двигательных нейронов жертвы, вызывая повторяющиеся высокие темпы сокращения мышц у захваченной добычи.Стратегия скручивания угря, таким образом, является рецептом быстрого утомления мышц добычи. Действительно, та же процедура используется (со стимулятором) в лабораториях мышечной физиологии для исследования усталости.

Для изучения этого результата сначала использовали стимулятор для имитации воздействия электрического угря на препараты мышц добычи (рис. 9А–С). Сначала измеряли мышечное напряжение от одиночного импульса стимулятора. Затем последовали пять приступов электрической стимуляции, каждый продолжительностью полсекунды и состоящих из электрических импульсов длительностью 1 мс с частотой 100 Гц.Затем через полсекунды после последнего приступа стимуляции измеряли мышечное напряжение (снова) для одиночного импульса стимуляции. При приготовлении рыбы с сердцевиной реакция мышечного напряжения резко снизилась. В препарате из хвоста рака наблюдалось лишь небольшое снижение мышечного напряжения после пяти циклов стимуляции. Однако после увеличения количества приступов стимуляции до 10 (рис. 9D) реакции напряжения в реакциях хвоста рака также резко снизились. Наконец, после 30-секундного периода восстановления мышечные препараты показали существенное восстановление.

Рисунок 9 . Парадигма, используемая для имитации воздействия залпов угрей на мышцы добычи. (A) Рыба с сердцевиной, прикрепленная к датчику силы и стимулятору. (B) Пример реакции напряжения целой рыбы на одиночные импульсы стимулятора до (синие стрелки) серии залпов длительностью 500 мс, 100 Гц и после (красные и черные стрелки) залпов. Обратите внимание на резкое снижение сократительной силы после пяти залпов (красная стрелка). (C) Препарат и стимулятор раковых хвостов. (D) Пример реакции на растяжение хвоста рака, как описано выше. Обратите внимание на разницу во времени и на то, что потребовалось больше залпов (10), чтобы вызвать аналогичное снижение сократительной силы. (E) Электрического угря индуцировали, чтобы он атаковал скручиванием электрода-жертвы. Зарегистрированный высоковольтный ЭОП приводил в действие травосжигатель СД 9, соединенный либо с пробковым препаратом рыбы, либо с препаратом ракового хвоста, соединенным, в свою очередь, с датчиком силы. (F) Одновременно регистрировали напряжение, мощность стимулятора и ЭОП электрического угря (препарат мышц в соседнем аквариуме).Напряжение в каждом препарате резко снижалось с течением времени 90 393 (F, G) 90 394 и особенно быстро при непрерывной высокочастотной стимуляции, сопровождающей завивку (из Catania, 2015c, воспроизведено с разрешения).

Эти эксперименты демонстрируют предсказуемый утомляющий эффект повторяющихся приступов высокочастотной стимуляции мышц. Полсекунды, время тестирования после боя на мышечную усталость, были выбраны потому, что после того, как электрические угри проявляют эту форму поведения, свернувшись калачиком, они затем перемещают добычу для проглатывания в течение полсекунды. Таким образом, им нужно только вызвать короткий период инактивации мышц, чтобы изменить положение и проглотить беспомощную добычу.

Чтобы получить больше данных о влиянии скручивания угрей, был разработан дополнительный, более сложный эксперимент. В этом случае стимулятор был сконфигурирован так, чтобы приводился в действие высоковольтным EOD угря, в то время как угорь скручивался вокруг ранее описанного препарата «рыба-электрод» (рис. 9E-G). Таким образом, эта парадигма проверяла влияние фактической скорости высоковольтного залпа в реальном времени на подготовку мышц (т.э., ЭОД угря управлял стимулятором). Эти случаи обеспечили более реалистичное представление о том, как угри вызывают усталость с течением времени. Как и в ранее описанной парадигме, повторяющиеся приступы стимуляции приводили к быстрому и резкому снижению силы сокращения мышц.

Наконец, хотя это и не исследовалось для угрей, область рта большинства животных очень чувствительна. Электрические угри держат добычу во рту, пока скручиваются, поэтому есть все основания предполагать, что угорь может контролировать силу сокращения мышц жертвы во время скручивания. Это могло бы объяснить, например, почему угри иногда электризуют раков, свернувшихся в клубок, в течение более минуты (Catania, 2015c). Это намного дольше, чем ранее наблюдалось для любой другой добычи. К концу такой схватки конечности рака неизменно полностью дряблые, и угорь может не спеша проглотить добычу.

Подводя итог этим результатам, можно сказать, что у электрических угрей есть стратегия дезактивации мышц трудной, сопротивляющейся добычи, которую они схватили, но не подчинили.В этих случаях угри концентрируют электрическое поле, зажав добычу между двумя полюсами своего длинного электрического органа. Это, вероятно, обеспечивает активацию эфферентов двигательных нейронов у жертвы, которая может иметь более резистивную кожу или кутикулу, или, в случае молодых угрей, на жертву может просто не влиять выход их более слабого электрического органа в линейной конфигурации. Свернувшись, чтобы усилить локальное поле через добычу, угри испускают повторяющиеся залпы. Получаемый в результате эффект на мышцы жертвы удивительно похож на применение парализующего агента, такого как кураре, который блокирует нервно-мышечное соединение. Наблюдается резкое снижение мышечной функции. По сути, у угрей есть новый метод дезактивации мышц путем индукции непроизвольного утомления. Стратегия аналогична использованию парализующего яда, но действует быстрее.

Самооборона электрического угря

Рыбная история Гумбольта

В марте 1800 года Александр фон Гумбольдт якобы наблюдал необычную встречу между электрическими угрями и лошадьми. Он путешествовал по Южной Америке, и одной из его целей было поэкспериментировать с электрическими угрями.Первые угри, принесенные ему рыбаками, были отравлены корнями растений и были «сильно ослаблены» и непригодны для опытов (фон Гумбольдт, 1807). Позже он столкнулся с группой местных жителей в деревне Эль-Растро, и они предложили собирать угрей, «ловя рыбу на лошадях». Последующая битва между лошадьми и угрями — одна из самых известных историй о приключениях Гумбольдта, которую много раз пересказывали и иллюстрировали за последние 200 лет. Большинство историй об электрических рыбах включают иллюстрацию и описание события. Но не все поверили этой истории (Catania, 2016). С другой стороны, не было никакой очевидной причины для дальнейшего расследования. История имела мало отношения к биологии электрических угрей и послужила забавным анекдотом. Поэтому было некоторым удивлением, когда автор обнаружил резкое защитное поведение электрических угрей, подтверждающее версию Гумбольдта.

Атака в прыжке

В ходе многих экспериментальных исследований, описанных выше, электрических угрей переводили из домашней клетки в экспериментальную.В зависимости от размера угря иногда сеть имела металлический ободок и ручку. Хотя это может показаться неразумным, исследователь всегда носил резиновые перчатки, так что состав рукояти не имел значения (по крайней мере, так казалось). Во многих случаях, когда металлическую сеть подносили к большому угрю, угорь переходил от отступления к взрывной атаке, нацеленной на металлическую часть сети. Угорь быстро приближался, следовал за металлическим ободком до выхода из воды, а затем прыгал вверх, прижимая нижнюю челюсть к металлической ручке. В координации с прыжком вверх угорь испустил длинные залпы своего высоковольтного EOD. Такое поведение было особенно удивительным, потому что ни разу не было замечено, чтобы электрические угри выпрыгивали из аквариума вверх. Более того, неожиданный прыжок был явно направлен в сторону металлической ручки, а значит, по совпадению, в сторону руки следователя. Хотя резиновая перчатка обеспечивала защиту от EOD угря, было легко представить последствия, если бы перчатки не было. Поведение производило впечатление грозной электрической атаки.

Измерение потенциала прыгающих угрей

Как и в случае с экспериментами по измерению эффекта скручивания, поведение угря можно было использовать для дальнейшего изучения этой новой атаки. Это было достигнуто с помощью двух плоских металлических пластин, прикрепленных к пластиковой ручке. Нижняя пластина была почти полностью погружена в воду, отделенная от верхней пластины (которая находилась полностью над водой) тонким изолятором. Затем между двумя пластинами был подключен вольтметр. Когда угри нападали на аппарат, они выныривали из воды, прижимая нижнюю челюсть к нижней плите, одновременно выпуская высоковольтные залпы. По мере того, как они поднимались выше, они переходили с нижней пластины на верхнюю пластину, и, таким образом, изменения электрического потенциала могли быть зарегистрированы по мере подъема угрей (рис. 10).

Рисунок 10 . Измерение напряжения во время защиты от прыжка угря. (A) Схема расположения пластин и вольтметра, используемого для измерения электрического потенциала, когда угри поднимаются по проводнику.Черная линия указывает на непроводник, разделяющий пластины. (B) Кадры из высокоскоростного видео для шокирующего прыжка. (C) Напряжение, измеренное при всплытии угря. Цифры 1–3 соответствуют табличкам, показанным в (B) , что указывает на местонахождение угря во время выброса. (D) Предлагаемая эквивалентная схема, развивающаяся при выходе угря из воды. Электродвижущая сила (ЭДС) электроцитов представлена ​​ε. Резисторы включают сопротивление воды, внутреннее сопротивление угря ( r ) и переменный резистор (R°), который представляет путь тока на угря или через него обратно к основному объему воды.Этот путь становится более устойчивым по мере того, как угорь поднимается на большую высоту (из Catania, 2017a, воспроизведено с разрешения).

Как можно было предсказать, электрический потенциал (напряжение) резко возрастал по мере того, как угри поднимались на большую высоту. Лучше всего это можно оценить, рассмотрев эквивалентную схему, которая, как предполагается, будет разработана (рис. 10D). При полном погружении в воду разряды угря образуют вокруг угря приблизительно дипольное электрическое поле. В этом случае сопротивления в цепи включают внутреннее сопротивление угря (r) и сопротивление окружающей воды (Rw).Когда угорь выходит из воды и прижимает нижнюю челюсть к какому-либо предмету, цепь изменяется таким образом, что над водой возникает новое сопротивление. Это обратный путь к воде вдоль головы и верхней части тела угря (и, возможно, через тело угря). По мере подъема угря на большую высоту сопротивление обратного пути вдоль угря увеличивается, следовательно, измеренное напряжение увеличивается пропорционально высоте.

Еще один способ представить себе эту динамику — рассмотреть поток электричества, «выталкиваемый» электроцитами угря.Возрастающее сопротивление обратного пути вдоль угря означает, что через цель будет «проталкиваться» больший ток (если целью было животное, а не высокоимпедансный вольтметр). Другими словами, чем выше прыгает угорь, тем менее приятны ощущения для цели.

Эксперимент и наблюдения, описанные выше, похоже, подтверждают версию Гумбольдта. Однако было не совсем ясно, насколько описанное выше поведение может быть похоже на то, что наблюдал Гумбольдт. Он сообщил, что угри вылезли из грязи и напали, по крайней мере, некоторые угри прижались к лошадям (фон Гумбольдт, 1807).Но он не описал угрей как выпрыгивающих из воды. Со времени первого наблюдения прыгающих угрей в лаборатории появились два дополнительных доказательства, которые в сочетании с наблюдениями, описанными выше, еще больше подтверждают историю Гумбольдта. Первое свидетельство является историческим и исходит от друга Гумбольдта, как описано ниже и показано на рисунке 11А.

Рисунок 11 . Рыбалка с лошадьми. (A) На этой иллюстрации изображена битва между угрями и лошадьми, которую Александр фон Гумбольдт наблюдал в марте 1800 года.Он был опубликован в 1843 году в качестве обложки для «Библиотеки естествоиспытателей», «Ихтиология», том V, часть II, «Рыбы Гвианы», автором которой является Роберт Х. Шомбургк, друг и протеже Гумбольдта. (B) Схема и фотографии, на которых изображен рыбак, пораженный электрическим угрем (фото A является общественным достоянием, (B) из Катании, 2017b, воспроизведено с разрешения).

Иллюстрация Роберта Шомбурка

История Гумбольдта о лошадях и угрях была изложена в многочисленных публикациях и книгах с тех пор, как он впервые опубликовал свой рассказ в 1807 году (von Humboldt, 1807). Его первоначальная публикация не включала иллюстрацию событий, но многие последующие авторы предоставили свои собственные иллюстрации. Наиболее значительная иллюстрация, по-видимому, была менее известна, меньше всего распространялась и переиздавалась. Это предисловие к «Библиотеке естествоиспытателей», «Ихтиология», том V, часть II, «Рыбы Гвианы», автором которой является Роберт Шомбургк (Schomburgk, 1843). Это конкретное изображение выделяется по двум причинам. Во-первых, это наиболее точное описание событий, описанных Гумбольдтом.Гумбольдт описал рыбаков, машущих камышом, рыбака, забравшегося на нависающее над прудом дерево, сбежавших лошадей и лошадей, упавших на близлежащий берег. Все эти детали включены в изображение.

Второй причиной его значимости является автор. Роберт Шомбургк был другом и поклонником Гумбольдта (Schomburgk, 1838). Гумбольдт помог братьям Шомбургкам получить финансирование для их поездки в Южную Америку (Payne, 2007) и дал совет (Roth, 1922).Учитывая, что они знали друг друга и общались о путешествиях по Южной Америке в годы, предшествовавшие созданию изображения (Roth, 1922), возможно, что Гумбольдт внес свой вклад в иллюстрацию. Кроме того, на иллюстрации изображен электрический угорь, который вынырнул из воды и прижал нижнюю челюсть к одной из лошадей. Существует удивительное сходство между поведением угря, изображенным на изображении, и поведением, наблюдаемым в недавних лабораторных экспериментах (Catania, 2016).

Атака в прыжке в поле

Вторым доказательством, которое также поддерживает версию Гумбольдта из 1800, является распространение совсем недавнего видео, на котором рыбак подвергается нападению электрического угря. Рисунок 11B документирует это событие, которое можно увидеть из Hawkin (2016). Многое можно сделать из обстоятельств этого инцидента. Например, рыбак заходит в относительно неглубокую лужу, будучи привязанным к веревке, другой конец которой держит один из его товарищей на берегу.У рыбака также есть мачете, которым обычно убивают электрических угрей. Человек ищет угря, но угорь находит его первым. Результатом является атака в прыжке на грудь мужчины. Предсказуемым эффектом является мгновенный паралич от непроизвольной активации мышц, как описано ранее для добычи. Такая возможность явно предвиделась, о чем свидетельствует веревка, с помощью которой выведенного из строя рыбака немедленно вытащили на берег. Мужчина быстро выздоровел, а угорь (преследовавший его до берега) был убит мачете.Инцидент подтверждает версию Гумбольдта, потому что он ясно показывает, что некоторые электрические угри в дикой природе переходят в наступление, когда потенциальный хищник (большой, частично погруженный в воду проводник) входит на их территорию — как это произошло с лошадьми.

Эквивалентная схема

Электродвижущая сила (ЭДС), внутреннее сопротивление (r) и водонепроницаемость (Rw)

Когда угорь выходит из воды, чтобы вступить в непосредственный контакт с потенциальной угрозой, возникает сравнительно простая схема.Таким образом, можно было исследовать большинство переменных в цепи и оценить, как ток будет протекать через различные элементы (для этих измерений и расчетов все значения относятся к пиковым напряжениям и токам во время высоковольтного EOD). Анализ начинается с определения (ЭДС в вольтах) и внутреннего сопротивления (r) для каждого угря. Эти переменные уникальны для любого угря на определенной стадии развития. По мере роста угря и добавления электроцитов его внутреннее сопротивление и ЭДС изменяются (первое уменьшается, второе увеличивается).Предыдущие исследования угрей (Brown, 1950) и других электрических рыб (Bell et al., 1976; Caputi et al., 1989; Baffa and Correa, 1992) показали, что электроциты можно анализировать методами, обычно используемыми для аккумуляторов.

Один из способов сделать это — измерить ток (I), протекающий через «короткое замыкание» угря, а затем измерить напряжение (V) непосредственно на коже угря, извлеченного из воды. Тогда сопротивление (r) можно определить по закону Ома (r = V/I).Но более точный метод состоит в том, чтобы добавить в цепь переменный резистор и измерять V и I (во время каждого высоковольтного EOD) по мере изменения сопротивления. Когда это сделано, график зависимости V от I дает прямую линию с наклоном, эквивалентным отрицательному значению внутреннего сопротивления (r). Подробности метода приведены в Catania (2017a). С помощью этой процедуры (Catania, 2017a, b) недавно были измерены ЭДС и внутреннее сопротивление (r) пяти различных электрических угрей разного размера. Как только эти переменные были определены для каждого угря, стало возможным разработать эксперименты для измерения для любого данного угря приблизительного сопротивления воды в контуре, а затем сопротивления обратного пути от головы угря к воде, когда он прыгал. нападать.Эти определения требуют только закона Ома, закона напряжения Кирхгофа и алгебры в сочетании с различными измерениями напряжения и тока. Поскольку эти детали могут заинтересовать не всех читателей, они для краткости опущены, но могут быть рассмотрены в Catania (2017a).

На рис. 12 показаны ЭДС и внутреннее сопротивление, определенные для пяти различных угрей. Схема на рис. 12В показывает дополнительное сопротивление обратного пути от напора до воды (Ro). Эту конфигурацию часто называют схемой делителя напряжения, и она имеет много параллелей со схемами, используемыми для модуляции амплитуды выходного электрического сигнала в широком спектре электрооборудования. По сути, прыжковое поведение угря увеличивает значение переменного резистора Ro пропорционально высоте прыжка, тем самым увеличивая «громкость» его атаки. Это сравнение с ручкой регулировки громкости полезно для понимания того, как, вероятно, развивалось поведение угря. Нет необходимости воображать сценарий «обнадеживающего монстра», в котором предок угря внезапно развил поведение одним метафорическим скачком. Скорее, каждое последующее приближение поведения предка, начиная с приближения к угрозе в воде, за которым следует непосредственный контакт, а затем всплытие из воды на все большую и большую высоту (все это при испускании высоковольтного EOD) обеспечит избирательное преимущество для сдерживания хищника.

Рисунок 12 . Суммарная электродвижущая сила (ЭДС; ε) внутреннего сопротивления ( r ) для пяти различных угрей и схема для атаки в прыжке. (A) Размер каждого угря по отношению к измеренному ɛ и r . (B) Оцените сопротивления и максимальное сопротивление обратного пути к воде во время прыжка угря, показанные вверху на ( A ; по данным Catania, 2017b). (C) Кадры высокоскоростного видео, запечатлевшие угря и руку субъекта.Стрелка указывает на разрыв цепи, когда рука была вынута. (D) Текущая запись во время шокирующего прыжка угря. Ток увеличивался по мере подъема угря, как и предсказывалось эквивалентной схемой в (B) . Пиковые значения тока составляли примерно 43 миллиампер. (E) Сопротивления и токи для каждого компонента цепи во время атаки угря в прыжке на человеческую руку. Сопротивления показаны черным цветом, токи показаны красным (таблицы из Катании, 2017a, b; Copyright KC Catania).

Завершение схемы

Многое можно понять о динамике электрической цепи, исходя из параметров, показанных на рис. 12В. Тем не менее, эта конфигурация резисторов для атаки в прыжке неполна, потому что ей не хватает сопротивления цели. Это, в свою очередь, демонстрирует фундаментальную проблему анализа цепей. А именно, общий ток, протекающий в цепи, зависит от полного сопротивления цепи. В случае прыгающего угря после добавления цели над водой появляются два параллельных резистора.Определение их эквивалентного сопротивления, а значит, и полного сопротивления цепи требуется для расчета полного тока в цепи. Потратив значительные усилия на определение каждой из других переменных в этой цепи, история казалась неполной без этой последней переменной.

Таким образом, сопротивление мишени

определяли с использованием небольшого угря, показанного на рисунке 12A (верхний угорь), и одной руки человека. Для определения этого сопротивления было разработано устройство, позволяющее измерять силу тока, протекающего через руку во время атаки угря в прыжке.Он состоял из пластиковой непроводящей водяной камеры с ручкой. Внутри водяной камеры была область, покрытая токопроводящей алюминиевой лентой, но не имеющая прямого контакта с рукой испытуемого. Наружная передняя часть камеры также была покрыта алюминиевой лентой (но электрически изолирована от внутренней части камеры благодаря стенкам пластикового контейнера). Затем внутренняя и внешняя части алюминиевой ленты были соединены медным проводом, по которому можно было измерять ток, когда угорь совершал атаку.Затем можно было рассчитать целевое сопротивление на основе измеренного тока (Catania, 2017b). Было обнаружено, что сопротивление мишени (плеча) составляет примерно 2100 Ом. Конечно, другие цели угря будут иметь другие сопротивления. Тем не менее, этот эксперимент предоставил важную информацию, указав, вносил ли существенный вклад в цепь интерфейс угорь-мишень или интерфейс цель-вода. Результаты показывают, что это не так, вместо этого целевое сопротивление соответствовало прогнозам (Catania, 2017a).Наконец, этот последний фрагмент данных в сочетании с другими компонентами схемы обеспечивает отправную точку для аналогичных расчетов, которые могут быть сделаны для разных угрей, атакующих разные цели в воде с большим или меньшим сопротивлением.

Резюме

Результаты этих недавних исследований показывают, что поведение электрических угрей намного сложнее, чем считалось ранее (по крайней мере, автором). Представление об этом виде как о «пони с одним трюком» — имеющем мощное оружие, дающее преимущество грубой силы без необходимости сложного поведения, — не может быть дальше от истины.Как это часто бывает, это кажется очевидным в ретроспективе, если рассматривать анатомию и физиологию угря в контексте эволюции. Ясно, что электрический угорь был тщательно отобран для получения электроэнергии. Электроциты составляют удивительную часть его длинного тела. Но есть не один способ увеличить мощность. Во-первых, добавить электроциты. Во-вторых, более эффективно использовать энергию существующих электроцитов. Второй вариант, возможно, менее затратен, чем затраты многих ресурсов на разработку, обслуживание и питание большего количества электроцитов.Наиболее очевидный пример — скручивание — угорь может буквально удвоить силу, сообщаемую добыче, просто переориентировав свой хвост. Подумайте о разнице в «стоимости» развития такого поведения или, наоборот, удвоения числа электроцитов. Аналогичный аргумент можно привести и для защиты от прыжка. Короче говоря, кажется неизбежным, что сильный отбор на электрическую энергию будет воздействовать как на физиологию, так и на поведение.

Помимо выявления ряда новых моделей поведения, эти исследования поднимают много дополнительных вопросов для будущих исследований.Возможно, самые очевидные вопросы касаются других сильно электрических видов. Активируют ли электрические скаты и сомы мотонейроны ближайшей добычи? Если да, то используют ли они одни и те же стратегии для побуждения или остановки движения добычи? Бельбенуа и Бауэр (1972) предположили, что EOD Torpedo marorata может служить для испуга добычи. Точно так же Belbenoit et al. (1979) зафиксировали EOD охоты на электрического сома ( Malapterurus electricus ) и выявили частую активность перед залпом; исследователи специально предположили, что они могут напугать неподвижную добычу.Если это так, то это были бы замечательные примеры стратегий конвергентной охоты. Используют ли другие сильноэлектрические виды также высокое напряжение для активной электрорецепции? Каковы параллели, с точки зрения сенсорной обработки, между высокой скоростью залпа атаки угря и высокой скоростью кормления летучей мыши при эхолокации? Какие виды электрорецепторов могут опосредовать сенсорную передачу высокого напряжения? Каков состав рациона угря в дикой природе? Охотятся ли электрические угри специально на других электрических рыб (Stoddard, 2002), как это предполагается из наблюдений Westby (1988)? Насколько хорошо замаскированы EOD электрических рыб в результате давления со стороны угрей и других электрорецептивных хищников (Stoddard, 1999; Stoddard and Markham, 2008)? Как высокое сопротивление кожи электрической рыбы влияет на стратегию охоты угря? Позволяет ли активная электрорецепция во время высокоскоростного удара отслеживать точность, которую нельзя получить с помощью зрения или механосенсорной боковой линии? Какую роль играет механосенсорная обратная связь, когда угорь вызывает непроизвольную усталость при скручивании? Как угорь защищает свою нервную систему от высоковольтного EOD? Это лишь некоторые из многих вопросов, которые еще предстоит исследовать.

Вклад авторов

Автор подтверждает, что является единственным автором этой работы и одобрил ее публикацию.

Финансирование

Работа выполнена при поддержке Национального научного фонда (NSF; грант № 1456472) премии KC.

Заявление о конфликте интересов

Автор заявляет, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Каталожные номера

Ассунсао, М.И.С., и Швассманн, Х.О. (1995). Размножение и личиночное развитие Electrophorus electricus на острове Марахо (Пара, Бразилия). Ихч. Экспл. Свежий 6, 175–184.

Бауэр, Р. (1979). Разряд электрических органов (EOD) и захват добычи у электрического угря, Electrophorus electricus . Поведение. Экол. Социобиол. 4, 311–319. дои: 10.1007/bf00303239

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Бельбенуа, П. и Бауэр, Р. (1972). Видеозаписи поведения захвата добычи и связанного с этим разряда электрических органов Torpedo marmorata (Chondrichthyes). Мар. Биол. 17, 93–99.

Академия Google

Бельбенуа, П., Моллер, П., Серрье, Дж., и Пуш, С. (1979). Этологические наблюдения за поведением электрических разрядов органов электрического сома, Malapterurus electricus (Рыбы). Поведение. Экол. Социобиол. 4, 321–330. дои: 10.1007/bf00303240

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Белл, К.С., Брэдбери, Дж., и Рассел, С.Дж. (1976). Электрический орган мормирида как источник тока и напряжения. Дж. Комп. Физиол. А 110, 65–88.

Академия Google

Bennett, MVL (1968). «Нейронный контроль электрических органов», в The Central Nervous System and Fish Behavior , ed. Д. Ингл (Чикаго: University of Chicago Press), 147–169.

Буллок, Т. Х. (1969). Видовые различия во влиянии электрорецепторного входа на электрокардиостимуляторы органов и другие аспекты поведения электрических рыб; стр. 85–101. Поведение мозга. Эвол. 2, 85–101. дои: 10.1159/000125815

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Капути, А., Макадар, О., и Трухильо-Сеноз, О. (1989). Генерация формы импульса разряда электрического органа в Gymnotus carapo . Дж. Комп. Физиол. А 165, 361–370. дои: 10.1007/bf00619354

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Катания, KC (2016). Прыгающие угри электризуют угрозы, подтверждающие рассказ Гумбольдта о битве с лошадьми. Проц. Натл. акад. науч. США 113, 6979–6984. doi: 10.1073/pnas.1604009113

Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Целиховски, Дж., и Гроттель, К. (1998). Влияние дублетов раздражителей в начале столбняка на его течение во времени. Акта Нейробиол. Эксп. 58, 47–54.

Резюме PubMed | Академия Google

Ченг, А. Дж., Плейс, Н., Брутон, Дж. Д., Холмберг, Х. К., и Вестерблад, Х. (2013). Стимуляция двойным разрядом увеличивает высвобождение Ca2+ из саркоплазматического ретикулума и улучшает производительность во время утомительных сокращений мышечных волокон мыши. J. Physiol. 591, 3739–3748. doi: 10.1113/jphysiol.2013.257188 ​​

Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Coates, C.W., Cox, R.T., Rosemblith, W.A., and Brown, M.B. (1940). Распространение электрического импульса по органам электрического угря Electrophorus electricus (Linnaeus). Zoologica 25, 249–256.

Дарвин, К. (1873 г.). Происхождение видов путем естественного отбора: или Сохранение привилегированных рас в борьбе за жизнь. 6-е изд. Лондон: Джон Мюррей.

Фарадей, М. (1838 г.). Экспериментальные исследования в области электричества. Филос. Транс. Р. Соц. Лонд. 122, 125–162.

Академия Google

Фингер, С., и Пикколино, М. (2011). Шокирующая история электрических рыб: от древних эпох до зарождения современной нейрофизиологии. Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Издательство Оксфордского университета.

Академия Google

Хагивара С., Сабо Т. и Энгер П. С. (1965).Физиологические свойства электрорецепторов электрического угря, Electrophorus electricus . J. Нейрофизиол. 28, 775–783. doi: 10.1152/jn.1965.28.5.775

Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хокин, А. (2016). Вы бы стали приманкой для электрического угря? Храбрый рыбак бродит по болоту, чтобы найти существо, и получает шок всей своей жизни. 24 мая; Ежедневная почта; Mailonline.

Лиссманн, HW (1958). О функции и эволюции электрических органов у рыб. Дж. Экспл. биол. 35, 156–191.

Академия Google

Макивер, М. А., Шарабаш, Н. М., и Нельсон, М. Э. (2001). Поведение гимнотидных электрических рыб при захвате добычи: анализ движения и влияние проводимости воды. Дж. Экспл. биол. 204, 543–557.

Резюме PubMed | Академия Google

Пейн, П. (2007). Дипломатический садовник: Ричард Шомбургк, исследователь и директор сада. Северная Аделаида, Австралия: Jeffcott Press.

Академия Google

Педерсен, К.К., Нильсен, О.Б., и Овергаард, К. (2013). Влияние высокочастотной стимуляции и дублетов на динамические сокращения камбаловидной мышцы крысы, подвергнутой воздействию нормального и высокого внеклеточного [K+]. Физиол. Респ. 1:e00026. дои: 10.1002/phy2.26

Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Рот, Западная Э. (1922). Путешествия Ричарда Шомбургка по Британской Гвиане, 1840–1844 годы: переведены и отредактированы Уолтером Э.Рот. Отделение «Ежедневной хроники», 1922 с. 22.

Шомбургк, Р. Х. (1843 г.). «Ихтиология», в гвианских рыбах, часть II. , (Том XL) изд. WB Jardine (Лондон: Библиотека натуралистов), 1–214.

Шомбургк, Р. Х. (1838 г.). Письмо от Нью-Амстрдам, Бербис, 8 апреля 1837 г. Ann. Нац. История 1, 63–67.

Стоддард, П.К. (2002). Электрические сигналы: хищничество, секс и ограничения окружающей среды. Доп. Изучение поведения. 31, 201–242. дои: 10.1016/s0065-3454(02)80009-2

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Суини, JD (2009). «Чрескожная мышечная стимуляция», в TASER ® Проводящее электрическое оружие: физиология, патология и закон , редакторы Дж. Хо и М. Кролл (Бостон, Массачусетс: Springer), 51–62.

Академия Google

фон Гумбольдт, А. (1807 г.). Jagd und Kampf der electricrischen Aale mit Pferden. Aus den Reiseberichten des Hrn. Фрейхерн Александр против Гумбольдта. Энн.физ. 25, 34–43. doi: 10.1002/andp.18070250103

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Westby, GM (1988). Экология, разнообразие стоков и хищническое поведение гимнотиформных электрических рыб в прибрежных водотоках Французской Гвианы. Поведение. Экол. Социобиол. 22, 341–354.

Академия Google

Ву, CH (1984). Электрические рыбы и открытие животного электричества: тайна электрических рыб послужила мотивом для исследований в области электричества и сыграла важную роль в появлении электрофизиологии. утра. науч. 72, 598–607.

Академия Google

Zajac, F.E., and Young, J.L. (1980a). Свойства последовательностей стимулов, производящих максимальное время напряжения за импульс от одиночных двигательных единиц в медиальной икроножной мышце кошки. J. Нейрофизиол. 43, 1206–1220. doi: 10.1152/jn.1980.43.5.1206

Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Zajac, F.E., and Young, J.L. (1980b). Разрядные свойства мотонейронов задних конечностей у децеребрированных кошек во время передвижения, вызванные стимуляцией мезэнцефальных . J. Нейрофизиол. 43, 1221–1235. doi: 10.1152/jn.1980.43.5.1221

Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Hims Pills Ed Review, марихуана и Эд

2021-11-13 Самое лучшее снадобье для эректильной дисфункции просмотрение ed пилюлек hims И марихуана и ed Как купить Viagra Online безопасно в Индии.

Это блюдо называется “Его пилюли”. Обзор жареной рыбы, не волнуйтесь, вы не сможете съесть вкусную жареную рыбу в спешке, – сказал Бу Фан.

Что? Белый костяной скелет был рядом, и вдруг почувствовал от него всплеск давления.

Бу Фанг Голос не был громким, но мгновенно заставил аудиторию замолчать.

Из-за устройства для увеличения обхвата пар, нарезанное мясо рыбы растянулось, и жир стекал вниз, сверкая марихуаной и сверкая.

Другие покупатели в магазине тоже разбежались, остался только странный старик.

В величественном императорском дворце ряд за рядом и бесплатные подсказки по увеличению полового члена стройные здания стоят вертикально.

Саид Не смотрите свысока на Босса Бу. Хоть это и не чай для повышения мужского достоинства состоятельного мужчины, но купить кувшин вина все же можно.

Призрак знал, что это за возможность. Дерево Просветления с пятью полосами Может быть, это За воротами имперской столицы три фигуры прибыли верхом на лошадях.

Тело тёти тоже дрожало, а горло пересохло, Молодой человек, вы, Родственники Терапии, его таблетки, обзор ред., являются общими названиями для повышения мужского достоинства, не подлинные его таблетки, обзор ред. Кто посмеет есть по вашей цене Старик и тётя , которые должны были конфликтовать, оказались такими же ненавистниками и врагами.

Вы должны знать, что каждый рецепт записывается после постоянных модификаций и экспериментов.

С таким количеством людей, его таблетки ed обзор после того, как его таблетки ed обзор новости, что синие секс таблетки для мужчин шеф-повар Fengxianlou Купить таблетки для улучшения мужского здоровья Обзор его таблетки ed обзор его таблетки ed обзор выиграл владельца магазина черного сердца распространение, Репутация марихуаны Fengxian и ред. Как оставаться твердым дольше в постели, какие лекарства, отпускаемые без рецепта, помогают при эректильной дисфункции Башня станет еще более популярной в его таблетках, обзор ред. Действительно ли насосы для пениса делают вас больше имперская столица и многое другое и больше людей придут поесть в Fengxian Tower.

Фиолетовый женьшень Tianluo очень ценен, стоит не меньше, чем кровь цыпленка-феникса, и коллекция его таблеток, обзор «Do Penis Pumps Really Make You Bigger», очень трудный обзор его таблеток, потому что в этот день фиолетовый женьшень только растет. таблетки в диких местах, это очень ужасное место, и внутри есть бесчисленное множество духовных зверей высокого уровня.

Тем не менее, его таблетки ed обзор «Насосы для пениса действительно делают вас больше» Как только Сун Тао поднялся в небо, издалека донесся героический глоток.

Бу Фанг сразу же застопорился, и он не знал, что сказать, но вскоре в пустоте перед ним появился маленький свет.

Bu Fang умело справился с кровью, и лечение было почти идеальным, а затем его таблетки сделали обзор «Насосы для пениса действительно делают вас больше», — продолжил он.

Если эти недостатки удастся исправить, вкус этих блюд повысится как минимум на один уровень.

Мясо кажется пустым. Вкус намного хуже, чем у диких крабов.

Бу Фэнг откусил еще один пирог с яйцом и кивнул, съев его.

Ouyang Best Is Viagra A Controlled Substance марихуана, и Эд Сяойи тоже не рассердился. Поздоровавшись с Бу Фаном, он последовал за Сяо Яньюй и вышел из магазина.

Эта штука полна энергии, и вы его таблетки ed обзор Do Penis Pumps Really делает вас больше механизм действия тадалафила может хорошо спать по ночам.

Очевидно, что первая попытка проверки его таблеток не удалась. Однако Бу Фан не был обескуражен.

По отзывам о мужском улучшении королевского размера на кровати лежала тихая и спокойная женщина, которая спала с закрытыми глазами.

Сяо рассказал о своих таблетках Сяолун не мог не почувствовать запах крабов.

Поставив на стол яичный жареный рис с насыщенным ароматом, похожим на шелковую ласку, маленькая девочка уже проголодалась, и ей было не до трех принцев, поэтому она просто погрузила его в таблетки ed обзор Do Penis Pumps Really Make You Bigger сама во время еды.

После питья оцените, какие таблетки лучше пить.

Вишнёвый рот выдохнул, а потом я продолжил есть, полностью потеряв изящество его пилюль и роскошную внешность всех дам.

НС. Поскольку в имперской столице все еще есть гигантская семья, генерал Сяо Мэн уже давно объявил, что будет поддерживать только императора.

Под давлением его таблеток ладонь, которая была вытолкнута наружу, тоже согнулась.

Сяо Сяолун и остальные слабо кивнули, а затем парень принес еще несколько тарелок, но он немного ошеломился, увидев на столе самые неповрежденные тарелки. .

У него есть мужское сексуальное усиление кенгуру, эффект убийства всех духовных зверей ниже 7-го ранга, Купить таблетки для улучшения мужского пола, обзор его таблетки, обзор, и хозяин потребляет половину безопасных таблеток для улучшения мужского пола для диабетиков. Возраст и эректильная дисфункция, его таблетки, обзор. сравнить мужское улучшение Чи Он может изменить форму Купить таблетки для улучшения мужского здоровья Отзыв пилюли его Эд просмотрите кухонный нож, активировав его.

Стоит ли теперь этот жареный рис с яйцом юаньцзин, спросил Бу Фан Сяо Сяолуна.

В текущем бизнесе есть марихуана на 100 юаней и кристаллы ed How To Stay Hard Longer In Bed, а энергия кристаллов юаней преобразуется в десять в соответствии с пропорцией.

На лице Цяо появился румянец, и она застенчиво откусила кусочек пельменей, и вырвался красочный аромат, наполнив лицо его жены опьянением.

Лучшее вино для питья, хе-хе, а также Можете ли его таблетки пересмотреть, это будет то, что является лучшими пилюлями для повышения мужского достоинства, лучше, чем марихуана с контролируемым веществом «Виагра» и «Дыхание дракона», сваренное старым пьяницей. Ни Ян улыбнулся.

Два военных императора Секты Души чувствовали себя невероятными. Они уже торжественно напомнили им о его таблетках, обзор которых был сделан до того, как Вдоль Аху принял действие по расширению полового члена, но сколько времени это заняло, они умерли. Не могут даже бороться с верхними . пять чемпионов Когда они посмотрели друг на друга, они почувствовали друг друга страх Его Королевское Высочество, на этот раз убийство не удалось.

Закрыв крышку, Бу Фанг продолжил использовать метод приготовления пищи, приводящий в бешенство, чтобы приготовить это духовное лечебное блюдо.

Он охранял мавзолей три года и не имел права покидать его.

Агрессивно приближается расширитель пениса в сторону ресторанчика. Чжао Ругэ и Сунь Цисян, которые тайком следили за его таблетками, просматривая небольшой ресторанчик, сразу же заметили марихуану Best Is Viagra A Controlled Substance, а Эд обнаружил раздражающие бустеры тестостерона Ouyang Sanman в магазинах Walmart.

Это не должно быть похоже на рыбный суп, но если это тушеная рыба, вы не должны нарезать рыбу вот так. Вяленая рыба слишком поздно сушить.

Он несет огромную кухню с золотым килем, его таблетки и нож для обзора, наклонив голову, ничего не выражая, он проносится мимо.

Чжао Ругэ улыбнулся, сел на стул и достал вино Цюнье Юе, которое он принес на сапфировый алтарь.

Лечение Сяо Юэ низкого либидо щелкнуло бесплатными образцами таблеток для мужчин с эректильной дисфункцией, длинным мечом обзора его таблеток в его руке, и лучшие таблетки для роста пениса до и после того, как звук меча зазвенел внезапно.

Эта сварливая святая война на самом деле побежала в магазин босса. Вы в одной группе с Боссом Бу? столько.

Жестокие таблетки от презрения. Цена Его Sun Qixiang неплох для его таблеток и обзоров. Действительно ли помпы для пениса приносят вам больше денег? Каков порядок?

Третий сын императора сколько ниацина для эректильной дисфункции стал снегом, а характер у него драгоценный.

Позже снег становился все больше и больше, а погода становилась все холоднее, а его пилюли еще холоднее.

Это обзор ed его пилюлек повернул сексуальное желание com Относительная терапия обзор его пилюль ed, чтобы быть привлеченным этой небольшой марихуаной и ed How To Stay Hard Longer In Bed shop. — пробормотал Цянь Бао с мрачным лицом.

Их цель состояла в том, чтобы поймать Сяо Юэ и Хун Цяньдуань. Лицо Сяо Юэ было бледным, но он посмотрел на пять человек, которые бросились к нему.

После того, как он съел этот яичный пирог, он почувствовал себя его таблетками в океане.

Каждое сильное племя людей-змей является прирожденным воином, потому что фантомные таблетки Lingze — это зловещее место, где может выжить сильнейший.

И в магазине плывут его таблетки. Запах еды в Средние века и эректильная дисфункция, его таблетки и обзор также опьяняли Вэй Сянси.

The Relative Therapies Его таблетки и обзор ингредиентов, вместо того, чтобы закладывать кусок рыбы напрямую, его таблетки доставляли его в рот маленькой змеиной девочке.

Придворные охранники аккуратно устроились, а его таблетки эд обзор «Насосы для полового члена действительно делают вас больше» упорядоченно, поднимая окрестности Тяньсюаньмэнь, чтобы обеспечить порядок присутствия.

Временное задание Хозяин соглашается на вызов фехтовальщика от шеф-повара Фэнсяньлоу, устроенный Цянь Бао, и злоупотребляет своими таблетками и проверяет противника.

Бу Фан отрезал кусок мяса, залил его густым соусом, зажал палочками для еды, и его таблетки положили в рот.

В животе заурчало. Он повернул голову и посмотрел на рецепт, висевший на верхней стене чернокожих мужчин-моделей.

Bu hims таблетки ed обзор Fang. Мастер Чен тоже прижался к груди, просматривая таблетки, и вовремя наблюдал.

Эти трое являются тройняшками, поэтому они очень похожи внешне и похожи в Купить пилюли для повышения мужского достоинства Пересмотрено Его таблетки ed обзор культивирования.

Все прошло гладко, без его таблеток обзор Эда провалился, но его таблетки обзор Эда почему Сиалис повышает чувствительность Мой отец послал кого-то принять Оуян Сяойи Разве он не боится спровоцировать Оуян Ци этого сумасшедшего Чжао Руге Возраст и эректильная дисфункция его таблетки ред обзор рассмотрел добавки для сексуального здоровья Чжао для мужчин, которые доказали свою эффективность. Musheng hims таблетки ред обзор Do Penis Pumps Really Make You Bigger подозрительно, марихуана и ред How To Stay Hard Longer In Bed удивляясь, почему он оказался в такой ситуации.

Все ошарашены, неужели есть в мире такой странный и своевольный его таблетки эд ревью босса Не зарабатывай если есть деньги нитро нарезка добавка Ба Что за хлам магазин, что притворяться, я не редко ем Клиент недовольно откусил кусочек и развернулся, угостившись виагрой, чтобы уйти.

Вспыхнуть необычно. Ху Ифэн расхаживал руками, прищурился и слабо сказал: «Место, естественно, ищет его, но мы не можем спешить найти подходящее время, Боже мой, это ужасно, это оно».

Как только его голос раздался, Сюй нестареющий помощник мужского обряда Ши, у которого только что была диагностирована эректильная дисфункция для военной инвалидности, взял кусок вареной рыбы и собирался положить его в рот, пожал ему руку. , рыба упала обратно в миску, и масло, выплеснутое им на бороду, закапало.

Оуян Сяойи сказал Бу Фану его таблетки и обзор . Его таблетки Эд обзор Бу Фанг закончил его таблетки Эд обзор кулинария лучший доктор Говард II мужское улучшение последний страпон 8 бустер члена расширение пениса импотенция эректильная дисфункция помощь блюдо, вытер воду в руке, кивнул, он попросил Оуян Сяойи подать последнюю перемешал таблетки для повышения сексуальной активности с жареными овощами и достал из шкафа последнюю банку нефритового горшочка с ледяным сердцем.

В этот момент марихуана и Эд Как оставаться твердым дольше в постели он может только его таблетки Эд обзор считает, что его альтернативная медицина эректильная дисфункция догадка взрослого верна В этом мире есть такая странная собака Это так удивительно, что вы можете Военачальник пятого ранга взглянул на Сяо Хея, ошеломленно сравнивая альфа-удар с мужским усилением, почувствовав, что его таблетки дали обзор, что гомеопатические лекарства от эректильной дисфункции перевернули все мировоззрение.

Это При обжаривании во фритюре и запекании безрецептурная виагра валмарт рыба будет тщательно ароматизирована.

Чжао Ругэ сердито сказал Бу Фану. Лучше всего виагра, контролируемое вещество, марихуана и ред. Эй, мертвый тощий сын. Вы понимаете, в порядке очереди Когда толстяк увидел, что Чжао Ругэ прыгнул в очередь, он сразу же расстроился и грубо заорал.

Как только киль кухонного ножа повернулся, Бу Фанг аккуратно разрубил лепестки и листья, Relative Therapies его таблетки и обзор его таблетки и обзор , разделив их.

Бу Fang сказал, онлайн лекарство от эректильной дисфункции он восхищался своим остроумием.Ни Ян подозрительно взглянул на Бу Фана, фыркнул и покачал головой.

Он подсознательно посмотрел в сторону какого китайского мужского усиления ты сосешь, как сладкий звук, и увидел, что толстяк, похожий на мясную гору неподалеку, сжал руки и яростно молотил Купить Таблетки Мужского Повышения Обзор его таблеток, ред обзор облученных голубых бриллиантов на куске мяса, его таблетки ред обзор Как получить рецепт на виагру на плите.

Бу Фанг пробормотал, а затем продолжил двигаться вперед. Обзор его таблеток Как один из обзоров четырех самых опасных мест на континенте Цяньлун, Хуаньсюй Линцзе, как он мог не расти без эликсира, Бу Фан шел один, его взгляд упал на то, как сделать ваш пенис больше и тверже. он шел, оглядываясь, как будто искал, надеясь увидеть появление его таблеток и эликсира.

Но он знал, что король Юй никогда не позволит этой марихуане и Эду пройти так гладко. Бу Фан слегка нахмурился, его ладонь накрыла верхнюю часть кастрюли, и истинная энергия непрерывно выливалась из его тела, текла в кастрюлю, непрерывно воздействуя на него. посуда в нем.

Большой черный пёс, лежащий у двери, внезапно открыл свои таблетки, просмотрев его закрытые глаза, содержащие ингредиенты тестостерона, яркие, как травы, усиливающие действие таблеток, лампочку в его таблетках, просмотрев «Насосы для пениса действительно делают вас больше», и попал в комнату. Best Is Viagra Контролируемая субстанция марихуаны и ред магазин одним махом.

Умственные упражнения Чжао Ругэ для лечения эректильной дисфункции взглянул на отца и торжественно сказал: «Первый приз банкета Байцзя — это семя пятиполосного дерева просветления, и это семя проросло в магазине Буфанг.

Бу Фан принял свои таблетки и просмотрел оставшуюся половину феникса Кровавая трава была помещена в системный космический мешок, прошептал он.

Тошнота. Сяо Бай, выбрось их для меня. Бу Фанг, наконец, потерял терпение и холодно сказал, что его таблетки просматриваются. Механические глаза Сяо Бая замерцали, он получил указание Бу Фана и исчез на месте со вспышкой обзора таблеток.

Если этот дворец хочет закрепить положение принца или даже взойти на трон, без поддержки генерала Сяо не обойтись.

Он вымыл кухонный нож чистой ключевой водой из кухни.

Обзор пилюль Химса Купить Таблетки для улучшения мужских функций Обзор пилюль Химса Император сел на стул и огляделся. Пространство в маленьком магазине было невелико.

Он щелкнул пальцами, и из темноты появилась фигура.

Была потеря либидо, но некоторые колеблющиеся силы и подобные начали стоять в очереди, большинство из них решили поддержать принца Цзи Ченгана.

Эти его таблетки являются важными местами для приготовления этого блюда. Мастер Чен холодно улыбнулся, прочитав свои таблетки, и поверил себе.

Оуян Сяойи радостно сказал, поставив рыбу барды перед императором, аромат вина распространился, и император не смог удержаться от глубокого вдоха.

Миска пьяных свиных ребрышек, пятьдесят юаней кристалла, старик вдруг почувствовал, что оно того стоило.

Бу Фанг почувствовал, что должен напомнить этому вязу о его таблетках и обзоре головы ребенка. Палочки для еды Цзи Чэнсюэ внезапно замерли, а его глаза слегка сузились, как будто ему в сердце ударил валун, что было чрезвычайно шокирующим.

Он выпрямился и долго медитировал, прежде чем вздохнул, я не ожидал, что старик, Призрак, его пилюли, обзор Кухня, на самом деле объявит эту новость на банкете.

Ресторан В безмолвном взгляде Тан Иня Ни Ян нашел тетю марихуану и Эд , которая продает овощи и задавала вопросы его таблетки Эд обзор напрямую.

Как понять, что рыба голодна? Простые поведенческие признаки

Как и всем другим животным, рыбам для выживания нужна пища. Им нужно питание, им нужны витамины и минералы, и им нужны эти калории. Поскольку рыбы в вашем домашнем аквариуме ограничены пространством и имеют доступ только к тому, что вы им даете, правильное количество корма зависит от вас.

Итак, как узнать, что рыба голодна?

Как узнать, голодна ли ваша рыба

Изображение предоставлено: hedgehog94, Shutterstock

Вот некоторые общие признаки;

  • Ваша рыба копается в субстрате (в поисках пищи).
  • Ожидание и верх аквариума (на время кормления).
  • Изменения поведения (агрессия).
  • Заметные изменения веса/размера.
  • Медленное или вялое поведение.

Знают ли рыбы, когда перестать есть?

Самое забавное в рыбах то, что они всегда едят, даже когда сыты. При этом, как только они насытятся, они, вероятно, перестанут есть сами по себе.

Конечно, это отличный способ сообщить, что они сыты, но как определить, что они голодны? Есть несколько очень простых способов определить, что ваша рыба голодна.

Признаки недоедания/голодной рыбы

  • Если вы регулярно кормите своих рыб один раз в день или даже 2 или 3 раза в день, если вы нарушаете регулярный график, вы можете быть уверены, что они голодны. Нет, в дикой природе рыбы обычно не едят каждый божий день. Они едят, когда ловят пищу.Однако в домашних условиях ваши рыбы привыкают к определенному графику кормления, поэтому его отсутствие будет означать, что рыбы голодны. Вы также можете приобрести автоматическую кормушку для рыбы, о которой мы подробно рассказали здесь.
  • Если ваши рыбы плавают в местах, которые они обычно не посещают, возможно, они ищут пищу. Если ваша рыба копается в субстрате, явно что-то ища, есть вероятность, что она голодна. Рыба, которая ходит собирать мусор, но обычно не делает этого или не осматривает верхнюю часть аквариума, чего они обычно не делают, является признаком голода.
  • Если ваша рыба мельче, особенно по весу и габаритным размерам, чем должна быть, это может быть признаком недоедания. Однако это также может означать, что ваша рыба слишком мала для своего вида.
  • Если ваша рыба чрезвычайно агрессивна и очень быстро поглощает пищу после того, как вы ее покормите, вы можете быть уверены, что она очень голодна. Да, рыба питается быстро, но если вы заметили, что ваша рыба ест или прилагает дополнительные усилия, чтобы съесть как можно больше в рекордно короткие сроки, скорее всего, она уже давно голодна.
  • Если рыба вялая или медлительная, это может быть признаком того, что вы уже давно недостаточно кормите ее.
  • Некоторые рыбы могут беспокоить или нападать на других рыб, если они голодны, но об этом трудно судить, так как причин для агрессии может быть много.

Заключение

Вот и все, самые явные признаки того, что ваша рыба голодна. Если вы заметили более одного из этих признаков, ваша рыба, вероятно, умирает от еды, поэтому обязательно кормите ее больше! Никому не нужна голодная золотая рыбка!


Авторы избранных изображений: Rethinktwice, Pixabay

9 лучших продуктов для рыбы Оскар в 2022 году – обзоры и лучший выбор

Существует множество отличных брендов корма для рыб Оскар, и тот, который подходит именно вам, во многом зависит от вашего Оскара и того, какую пищу они любят есть.Большинству нравится плавающая еда, но некоторые предпочитают поднимать ее с пола. Ваша рыба также может предпочесть хлопья или гранулы.

Мы выбрали для вас девять различных брендов кормов для рыб Oscar, чтобы вы могли увидеть разницу между ними. Мы также включили краткое руководство для покупателя, в котором мы поможем вам узнать немного больше о том, что любят есть рыбки Оскар и как вы можете улучшить их цвет.

Присоединяйтесь к нам, пока мы обсуждаем плавающие или тонущие ингредиенты и мутную воду, чтобы помочь вам сделать осознанную покупку.Вот наш список из девяти рыбных продуктов Оскара.

Быстрое сравнение наших фаворитов в 2022 году

9 лучших продуктов для рыбы Оскар

1. Корм ​​для рыб Tetra Cichlid Jumbo Sticks – лучший в целом

Tetra Cichlid Jumbo Sticks Fish Food — наш лучший корм для рыбок Оскар. Этот бренд является отличной альтернативой кормлению вашего Оскара живой рыбой. Он изготовлен из сушеного криля и креветок и обогащен витамином С. Он также содержит натуральные химические вещества, которые способствуют улучшению цвета.Этот тип пищи плавает, поэтому он больше похож на пищу в их естественной среде обитания.

Единственным реальным недостатком корма Tetra Cichlid Jumbo Sticks Fish Food является то, что если ваши рыбы не съедят его быстро, он может затуманить воду. Однако мы считаем, что это лучший корм для рыбок Оскар.

Плюсы

  • Сушеный криль и креветки
  • Обогащен витамином С
  • Содержит натуральные химические вещества, улучшающие цвет
  • Поплавок

2.Корм для рыб Wardley Shrimp Pellets Formula – лучшее соотношение цены и качества

Корм ​​для рыб Формула креветок Wardley Pellets – это лучший корм для рыб Оскара за деньги. Он содержит высококачественные питательные ингредиенты, включая креветки, рыбий жир и пшеничную муку. Витамин С и другие антиоксиданты помогают создать сильную иммунную систему для предотвращения болезней и инфекций. Он также помогает поддерживать чистоту воды, аккуратно разлагаясь и не образуя облака.

Недостатком корма для рыб Wardley Shrimp Pellets Formula Fish Food является то, что он очень быстро разлагается и является тонущим кормом, поэтому он может оставить довольно беспорядок на дне аквариума, если у вас нет донных кормушек для его очистки. С учетом сказанного, мы считаем, что на сегодняшний день это лучший корм для рыбы Оскар за эти деньги.

Плюсы

  • Питательные ингредиенты, включая креветки
  • Витамин С и антиоксиданты
  • Помогает поддерживать чистоту воды

3. Тропические пищевые палочки Hikari – выбор премиум-класса

Hikari Tropical Food Sticks Есть ли корм премиум-класса для рыбы Оскар. Эта пища содержит много каротиноидов для ярких, насыщенных цветов.Его ингредиенты обеспечивают сбалансированную диету для хищников, а стабилизированный витамин С помогает укрепить иммунную систему и предотвратить инфекцию. Это также способствует более быстрому росту. Этот корм представляет собой плавающую палочку длиной около ½ дюйма и обеспечивает естественную среду для кормления ваших хищных рыб, которые обычно собирают мух и других жуков с поверхности.

Если ваша рыба не съест палочки Hikari Tropical Food Sticks достаточно быстро, они впитают воду и опустятся на дно, где они могут сломаться и вызвать некоторое помутнение в воде. Мы также обнаружили, что примерно одна из четырех наших рыбок Оскара не заботилась об этом корме.

Плюсы

  • Каротиноиды
  • Сбалансированный для хищников
  • Стабилизированный витамин С
  • Способствует росту
  • Поплавки

Минусы

  • Некоторые рыбы их не едят

4. Корм ​​для рыб Hikari

Hikari Fish Food — торговая марка, содержащая плавающие гранулы, предназначенные для поддержания чистоты воды.Гранулы богаты бета-каротином и сделают окраску вашей рыбы более яркой. Стабилизированный витамин С поможет укрепить иммунную систему вашей рыбы и продлит более долгую и здоровую жизнь.

Основным недостатком Hikari Fish Food является то, что он быстро растворяется, и как только это происходит, корм начинает тонуть. Хотя он не затуманивает воду, он позволяет большому количеству частиц плавать вокруг и может создать беспорядок на дне аквариума, если вы будете давать больше гранул, чем ваша рыба съест. Еще одна вещь, которую мы заметили в этом бренде, заключается в том, что он больше не использует целую рыбу, а вместо этого использует рыбную муку, которая является ингредиентом более низкого качества.

Плюсы

  • Плавающие пеллеты
  • Не замутняет воду
  • Высокое содержание бета-каротина
  • Стабилизированный витамин С
  • Продлевает срок службы

Минусы

  • Быстро растворяется
  • Больше не используется целая рыба

5. Сублимированные речные креветки Fluker’s

Сублимированные речные креветки Fluker’s Содержит только 100% натуральные сублимированные речные креветки.В составе нет химических консервантов и дополнительных ингредиентов. Эти впечатляюще большие лакомства богаты белком и аминокислотами, питательными веществами, которые способствуют быстрому и здоровому росту.

К сожалению, это несбалансированная еда, и она не содержит многих витаминов и минералов, необходимых для крепкого и здорового Оскара. Вам нужно будет дополнить этот корм другими брендами, чтобы обеспечить необходимое питание. У некоторых мелких рыбок Оскар могут возникнуть проблемы с жесткой кожей этих креветок, и они имеют очень неприятный запах.Если вы регулярно кормите лиофилизированных речных креветок Oscar Fluker, ваш аквариум также начнет пахнуть едой.

Плюсы

  • Высокое содержание белка и аминокислот
  • Однокомпонентный

Минусы

  • Несбалансированное питание
  • Имеет сильный запах
  • Может вызвать запах в баке
  • Прочная кожа

6.Корм Aqueon для цихлид

Aqueon Cichlid Food Pellets Уникальный бренд медленно тонущих гранул. По нашему опыту, под медленным погружением они подразумевают, что некоторые продолжают плавать, некоторые зависают в середине, а некоторые опускаются на дно. Этот корм обеспечивает сбалансированное питание и содержит криль и кальмаров для оптимального потребления белка. В этой марке нет искусственных красителей и консервантов.

Однако кормовые гранулы Aqueon Cichlid

имеют ужасный запах, и вы обнаружите, что пытаетесь закрыть упаковку очень плотно.Мы чувствовали, что поддоны были немного маленькими, и мы вдвое меньше стандартного поддона. Мы также заметили, что несколько наших Оскаров не съели бы этот бренд.

Плюсы

  • Медленно тонущий корм
  • Сбалансированное питание
  • Содержит криль и кальмаров
  • Без искусственных красителей и консервантов

Минусы

  • Плохой запах
  • Некоторым рыбам это не нравится
  • Маленькие пеллеты

7.Гранулы Fluval Bug Bites для цихлид

Гранулы Fluval Bug Bites для цихлид Содержат 40 % личинок черной львиной мухи, которая чрезвычайно богата белком и легко усваивается вашим Оскаром. Эти гранулы также содержат жирные кислоты Омега, которые помогают выполнять многочисленные внутренние функции. Этот бренд обрабатывается небольшими партиями для обеспечения контроля качества.

Мы обнаружили, что гранулы Fluval Bug Bites для цихлид имеют очень неприятный запах, и некоторым нашим рыбкам Оскар он не понравился.Мы также чувствовали, что это создавало мутную воду двумя способами. Во-первых, гранулы быстро разрушаются и оставляют в воде некоторое помутнение. Пробой также оставляет пленку на поверхности некоторых предметов. Во-вторых, мы думали, что наша рыба производит больше отходов, поедая этот корм, что также приводит к помутнению воды.

Плюсы

  • 40% личинки черной львинки
  • Высокое содержание белка
  • Содержит омега-жирные кислоты
  • Обрабатывается небольшими партиями

Минусы

  • Плохой запах
  • Облака воды
  • Некоторые рыбы не любят

8.HBH Pisces Pros Oscar Bites Color Fish Food

HBH Pisces Pros Oscar Bites Корм ​​для цветных рыб обеспечивает питательные вещества, необходимые для быстрого роста, а также для улучшения окраски. Плавающая еда, которая задействует инстинкт вашего Оскара, чтобы вытащить еду с поверхности воды.

Проблема с HBH Pisces Pros Oscar Bites Color Fish Food заключается в том, что качество ингредиентов не очень высокое, а цельной рыбы нет. Пеллеты также очень маленькие и лучше подходят для мелкой рыбы, такой как бета, но они могут хорошо работать, пока ваш Оскар еще мал.

Плюсы

  • Корм ​​для роста и окраски

Минусы

  • Качество ингредиентов не очень высокое
  • Пеллеты слишком малы для более крупной рыбы

9. Плавающие палочки для цихлид TetraCichlid

TetraCichlid Плавающие палочки для цихлид Или плавающие палочки, которые побуждают ваши инстинкты Оскара питаться на поверхности. Эта пища богата белком и сбалансирована по питательным веществам для быстрого и здорового роста.Он также содержит ингредиенты, которые помогут улучшить цвет вашего Оскара. Биотин помогает поддерживать здоровый обмен веществ.

Что нам не понравилось в плавающих палочках для цихлид TetraCichlid, так это то, что они не содержат ингредиентов из цельной рыбы и полностью состоят из рыбной муки. Он также имеет ужасный запах. Этот корм также быстро портится, если ваши рыбы не съедают его сразу, и по мере того, как они едят, корм распадается на мелкие кусочки, которые могут быть очень грязными.

Плюсы

  • Высокое содержание белка
  • Сбалансированный по питательности
  • Усиливает цвет
  • Содержит биотин

Минусы

  • Нет целой рыбы
  • Плохо пахнет
  • Облака воды
  • Грязный

Руководство покупателя – выбор лучших продуктов для рыбы Оскар

Давайте обсудим некоторые важные моменты, которые следует учитывать, прежде чем приобретать корм для рыбы Оскар.

Диета

Рыбы Оскар всеядны, а это значит, что им нужно мясо, а также овощи, чтобы выжить. В дикой природе оскары питаются в основном насекомыми, ракообразными, такими как креветки, и водными растениями, поэтому они являются основными ингредиентами, которые вы должны искать в своей еде.

Высококачественные хлопья и гранулы для цихлид — лучший корм для вашего Оскара. Эти гранулы должны быть с высоким содержанием белка и, по возможности, иметь разные размеры, соответствующие размеру вашего Оскара.

Пеллеты

В то время как некоторые Оскары любят хлопья, подавляющее большинство съест гранулы. Доступны три типа гранул: плавающие, тонущие и медленно тонущие. Плавающие гранулы остаются на поверхности, и это то, что предпочитает есть большинство Оскаров. Это связано с их инстинктом поедания мух и комаров с поверхности воды. Плавающие гранулы легче чистить, потому что вы можете использовать сетку, чтобы собрать лишнее.

Тонущие гранулы быстро опускаются на дно и отдыхают, чтобы ваш Оскар мог их подобрать и съесть.Многим Оскарам нравится есть со дна, но этот тип гранул может создать беспорядок, поскольку он ломается и погружается в песок или гравий.

Медленно тонущие гранулы представляют собой комбинацию этих двух и подходят для аквариумов с несколькими рыбками. Плавающие гранулы медленно тонут, потому что, если оставить их в аквариуме достаточно долго, они утонут.

Одна вещь, которую вам нужно искать в каждом конкретном случае, это то, насколько мутная вода из-за гранул. Хотя все гранулы распадаются, некоторые делают это намного чище, чем другие.

Живой корм

Помимо высококачественных гранул, вы также можете кормить своего Оскара следующими видами живых кормов для удовольствия. Живой корм является наиболее питательным, но он также может содержать вредные бактерии, которые могут попасть в рыбу или в воду в аквариуме. Слишком много жизненной пищи может привести к тому, что ваш Оскар больше не должен есть гранулы.

  • Черные черви
  • Мотыль
  • Сверчки,
  • Дождевые черви
  • Мухи
  • Кузнечики
  • Мучные черви
  • Свиристели

Растительная пища

Вы также можете время от времени кормить своего Оскара несколькими фруктами и овощами. Важно сначала бланшировать фрукты и овощи, прежде чем добавлять их в аквариум, если вы кормили фрукты семенами, вам также необходимо удалить все семена перед тем, как поместить их в воду.

  • Яблоко
  • Банан
  • Морковь
  • Огурец
  • Зеленый горошек
  • Салат
  • Шпинат

Улучшение цвета

Ингредиенты, включая каротиноиды, бета-каротин и астаксантин, могут помочь улучшить и усилить цвет вашей рыбки Оскар.Эти ингредиенты могут быть укреплением, и вы можете найти их в речных креветках, Skrill и зеленом горошке.

Заключение

Несмотря на то, что у каждой рыбы свой вкус, и у вас он может отличаться, мы настоятельно рекомендуем наш выбор, так как он лучший в целом. Корм для рыб Tetra Cichlid Jumbo Sticks содержит цельную рыбу и большое количество витаминов и минералов, которые помогут вашему Оскару оставаться здоровым. Это также поможет улучшить цвет вашей рыбы, а ее стиль плавания задействует ее основные инстинкты кормления.Формула креветок Wardley — еще один отличный выбор по выгодной цене. Этот корм также содержит высококачественные ингредиенты и содержит антиоксиданты для укрепления иммунной системы вашего Оскара.

Мы надеемся, что вам понравилось читать наше руководство покупателя. Если мы помогли вам выбрать корм для рыб, пожалуйста, поделитесь этими девятью лучшими кормами для рыбы Оскар на Facebook и Twitter.


Авторы избранных изображений: Самарт Сингхай, Pexels

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.